益生菌對實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠Toll樣受體4表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察兩種益生菌（乳酸桿菌，雙歧桿菌）對潰瘍性結(jié)腸炎的大鼠結(jié)腸粘膜Toll樣受體4及TNF-a的變化及影響
　　 方法：將64只雄性SD大鼠，隨機(jī)分四組，正常對照組、結(jié)腸炎模型組、乳酸桿菌組、雙歧桿菌組；先將益生菌組預(yù)處理給與益生菌灌胃兩周及四周后，采用三硝基苯磺酸／乙醇與免疫復(fù)合物聯(lián)合誘導(dǎo)結(jié)腸炎模型組和益生菌組形成潰瘍性結(jié)腸大鼠模型。造模處理后24小時(shí)處死大鼠。觀察結(jié)腸粘膜的大體和組織學(xué)變化。以免疫組化方法檢測TLR4,T

2、NF-a的表達(dá)，以蛋白免疫印跡法（western blot）檢測蛋白表達(dá)
　　 結(jié)果：（1）一般情況觀察：正常組大鼠活動(dòng)如常，毛發(fā)有光澤，飲食量正常；模型組大鼠精神萎靡，毛發(fā)無光澤，常卷縮而臥，飲食量減少，出現(xiàn)稀便、血便。益生菌干預(yù)組大鼠一般狀況隨干預(yù)時(shí)間延長出現(xiàn)的癥狀減輕，有少許活動(dòng)，毛發(fā)欠光澤，未出現(xiàn)血便。（2）肉眼觀察 正常對照組腸道組織顏色呈白色，粘膜表面明亮光滑，無充血、水腫。模型組大鼠結(jié)腸之間粘連，結(jié)腸壁可見粘膜充血

3、水腫，有多個(gè)大小不一的潰瘍形成。益生菌干預(yù)組大鼠結(jié)腸壁粘膜充血水腫明顯，及少許的潰瘍形成。（3） HE染色鏡下觀察 正常對照組大鼠直結(jié)腸組織見腺體排列整齊，隱窩正常，杯狀細(xì)胞無減少，未見粘膜糜爛，出血；模型組大鼠結(jié)腸部位可見腺體大量破壞，排列紊亂，隱窩變性，隱窩膿腫形成，杯狀細(xì)胞消失，大量的炎性細(xì)胞浸潤。益生菌干預(yù)組可見腺體減少，部分出現(xiàn)隱窩膿腫，杯狀細(xì)胞減少，炎性細(xì)胞浸潤。（4）免疫組化及染色結(jié)果 TLR4在各組腸道粘膜內(nèi)均有表達(dá)。正

4、常組大鼠腸道粘膜層內(nèi)可見少許棕色顆粒沉著;與正常組比較，模型組大鼠腺體消失，可見多處棕色顆粒沉著; 比正常組，益生菌組粘膜里棕色顆粒沉著較多，但比模型組少。（5）Western bolt與正常對照組相比，模型組結(jié)腸組織TLR4的表達(dá)顯著增加（P＜0.01）.TNF-a表達(dá)顯著升高（P＜0.01）；與與模型組相比，益生菌組結(jié)腸組織TLR4的表達(dá)顯著減少（P＜0.01），TNF-a表達(dá)顯著減少（P＜0.01）。其兩種菌相比差異不大（P>0.