蒼術(shù)苷的致突變性觀察及對(duì)氧化磷酸化的抑制作用研究.pdf

1、含蒼術(shù)苷的植物種類繁多，我國(guó)含蒼術(shù)苷的植物主要是蒼耳子。蒼耳子作為中醫(yī)治療的重要藥物，療效確切，應(yīng)用非常廣泛，但多數(shù)需要長(zhǎng)期服用，因此在我國(guó)蒼耳子中毒的病例并不少見(jiàn)。但關(guān)于蒼術(shù)苷的中毒機(jī)理及遺傳毒性的研究報(bào)道還很少。本論文通過(guò)經(jīng)典的Ames實(shí)驗(yàn)考查蒼術(shù)苷的遺傳毒性；采用MTT實(shí)驗(yàn)確定蒼術(shù)苷的染毒濃度；PTP開放度測(cè)定實(shí)驗(yàn)判斷蒼術(shù)苷是否導(dǎo)致線粒體腫脹；利用線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和ATP酶的活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)，探索蒼術(shù)苷對(duì)氧化磷酸化作用

2、的電子傳遞過(guò)程中的具體的酶的影響；力求找到作用靶點(diǎn)，進(jìn)一步確認(rèn)蒼術(shù)苷抑制氧化磷酸化的作用機(jī)制；為含蒼術(shù)苷中草藥的安全使用，以及探索蒼術(shù)苷中毒的救治方法奠定一定的理論基礎(chǔ)。
　　TA97、TA100、TA102三種菌株，在加和不加S9活化系統(tǒng)條件下，在0.8-250μg·皿-1測(cè)試濃度范圍內(nèi)，致突變結(jié)果均為陰性結(jié)果。在4-250gμg·皿-1測(cè)試濃度范圍內(nèi)，蒼術(shù)苷在S9活化系統(tǒng)參與下，TA98測(cè)試菌株有間接致突變作用，其原因可能是在

3、微粒體酶系統(tǒng)作用下，蒼術(shù)苷代謝轉(zhuǎn)化成為了有遺傳毒性的產(chǎn)物。
　　本研究結(jié)果還顯示，蒼術(shù)苷可以影響大鼠肝臟線粒體活性，在一定濃度范圍內(nèi)，濃度越高，線粒體活性越低。蒼術(shù)苷可促使線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運(yùn)孔開放，NAC對(duì)蒼術(shù)苷誘導(dǎo)的PTP開放有保護(hù)作用，而ROT則能增加蒼術(shù)苷誘導(dǎo)的PTP開放。
　　蒼術(shù)苷能夠降低復(fù)合體Ⅰ、Ⅳ的活性，而且呈小的劑量相關(guān)性降低的趨勢(shì)，即蒼術(shù)苷濃度增大，復(fù)合體Ⅰ、Ⅳ的活性降低；而復(fù)合體Ⅱ的活性與空白對(duì)照組相比變

4、化不大，復(fù)合體Ⅲ活性有下降的趨勢(shì)，但作用不明顯，也沒(méi)有劑量相關(guān)性。魚藤酮是復(fù)合體Ⅰ的抑制劑，而NAC可減弱ROT的抑制作用。蒼術(shù)苷不能夠抑制ROT的作用，還可能協(xié)同ROT抑制復(fù)合體Ⅰ的作用。
　　Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase的活力與空白對(duì)照組相比，均具有下降的趨勢(shì)，且呈現(xiàn)一個(gè)小的劑量相關(guān)趨勢(shì)，蒼術(shù)苷20μM時(shí)，兩種ATP酶活性下降不明顯，蒼術(shù)苷100μM時(shí)，兩種ATP酶活性下降顯著。
　　提示