肌醇六磷酸對人結(jié)腸癌細胞系HT-29細胞分化的影響及作用機制的探討.pdf

1、目的：不同濃度的IP6作用于人結(jié)腸癌細胞系HT-29，觀察IP6對癌細胞分化的影響，并對其機制進行探討。 方法：將不同濃度的IP6(對照組，1.8mM，3.3mM)作用HT-29細胞不同時間(1d,3d,5d)，分別進行如下研究： 1、使用透射電鏡觀察IP6對HT-29細胞超微形態(tài)的影響。 2、IP6作用3d后，使用流式細胞儀分析各組細胞周期。 3、應用RT-PCR法檢測IP6對HT-29細胞內(nèi)c-Myc

2、 mRNA表達的影響。 4、使用免疫細胞化學法檢測IP6對HT-29細胞內(nèi)Rb、c-Myc蛋白表達的影響。 5、測定堿性磷酸酶比活性。 結(jié)果： 1、3.3mM IP6持續(xù)作用后，透射電鏡下可以觀察到細胞結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，出現(xiàn)核固縮、細胞器豐富、微絨毛增多等分化趨勢。 2、IP6對HT-29細胞細胞周期有明顯的阻滯作用，并呈劑量依賴關(guān)系。流式細胞儀分析，G0/G1期細胞明顯增多，S期、G2/M期細胞則相

3、應減少。 3、RT-PCR和免疫細胞化學實驗結(jié)果顯示，與對照組相比，各濃度IP6均能使細胞內(nèi)e-Myc mRNA和蛋白的表達減少(P＜0.05)。 4、免疫細胞化學實驗結(jié)果表明，IP6能夠上調(diào)Rb蛋白的表達(P＜0.05)。 5、IP6作用HT-29細胞后，堿性磷酸酶比活性明顯增強。 結(jié)論：IP6能夠促使HT-29細胞向正常細胞轉(zhuǎn)化。IP6可能通過上調(diào)Rb蛋白的表達，下調(diào)c-Mye蛋白的表達，阻滯細胞周期，誘導細