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文檔簡介
1、金鐵鎖PsammosilenetunicoidesW.C.WuetC.Y.Wu是石竹科(Caryophyllaceae)單種屬金鐵鎖屬植物，分布于云南，貴州、四川和西藏等省，主產(chǎn)于云南西北部、中部和東北部，為國家二級(jí)保護(hù)植物，是“云南白藥”的主要組成藥材之一。長期以來，金鐵鎖完全靠野外采挖，加之自然生長緩慢，因而野生資源迅速減少，自然產(chǎn)量大幅降低。金鐵鎖資源已經(jīng)不能滿足“云南白藥”等中成藥的需求。金鐵鎖的有效成分為金鐵鎖皂苷(主要是三萜
2、皂苷)。β-香樹素合成酶(β-AS)是三萜皂苷合成途徑中的關(guān)鍵酶，它催化三萜類化合物的合成。針對(duì)有效部位(三萜類皂苷)生物合成途徑中關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶：金鐵鎖β-香樹素合成酶(β-AS)的cDNA的分離、原核表達(dá)和功能鑒定等進(jìn)行研究，通過RT-PCR和cDNA末端快速擴(kuò)增(RACE)等方法克隆其全長cDNA，結(jié)合大腸桿菌的原核表達(dá)得到目的蛋白，得到以下結(jié)果：
1.提取了金鐵鎖根部總RNA，并經(jīng)RT-PCR和RACE等方法分離得到金
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