棉花纖維素合酶基因克隆和表達(dá)分析.pdf

1、分類號華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文棉花纖維素合酶基因克隆和表達(dá)分析CLONINGANDEXPRESSANALYSISOFCOTTONCELLMLOSESYNTHASEGENES研究生指導(dǎo)教師范建彭良才夏濤教授副教授專業(yè):作物遺傳育種研究方向:植物細(xì)胞壁合成機(jī)理獲得學(xué)位名稱:農(nóng)學(xué)碩士獲得學(xué)位時(shí)間:2011年6月20日華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院作物遺傳改良國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室生物質(zhì)與生物能源研究中心二0一一年六月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2011屆碩卜記l究生學(xué)

2、位論文3結(jié)果一與分析.…，........................................................................................................……283.1GhCesAS、GhCes月8和GhCesA了口cDNA克隆..........................................……283.1.1序列比對與引物設(shè)計(jì)......

3、....................................................................……283.1.2GhCesAJ和GhCeSA了OcDNA序列克隆............................................……303.1.2.IGhCesAJ和GhCesA了口鋅指結(jié)構(gòu)區(qū)克隆.........................................

4、……303.1.3GhCesA8cDNA序列克隆...................................................................……313.2GhCesA萬、GhCesAS和GhCe劉了O生物信息學(xué)分析.................................……323.2.1催化活性區(qū)分析...........................................

5、.......................................……323.2.2跨膜結(jié)構(gòu)域分析..................................................................................……333.2.3磷酸化位點(diǎn)預(yù)測...................................................................

6、...............……343.2.4分子量和等電點(diǎn)分析..........................................................................……353.2.SCESAs保守域分析..............................................................................……353.2.6CESA家族蛋

7、白聚類分析....................................................................……363.2.7在棉纖維不同發(fā)育時(shí)期表達(dá)分析......................................................……373.3GhCESAS、GhCESAS和GhCESA10抗原制備...................................

8、.....……383.3.1抗原區(qū)段的選擇....................................……，…，...................................……383.3.2原核表達(dá)載體的構(gòu)建..........................................................................……393.3.3蛋白的表達(dá).................

9、.........................................................................……393.4GhCESAI、GhCESAZ和GhSUSYI蛋白表達(dá)分析..................................……403.4.1棉花纖維不同發(fā)育時(shí)期蛋白表達(dá)檢測..............................................……403.

10、4.2棉花下胚軸光暗處理蛋白表達(dá)分析..................................................……413.4.3陸地棉24天纖維素合酶復(fù)合體的組成分析...................................……423.5纖維素合酶活性分析.........................................................................

11、...........……433.5.1膜片段大小對纖維素合酶活性的影響..............................................……433.5.2棉纖維不同發(fā)育時(shí)期纖維素合酶的體外活性分析.........................……443.6棉花轉(zhuǎn)基因.......................................................................

12、............................……443.6.IGhSGTj和Ghsu與了超表達(dá)載體構(gòu)建................................................……443.6.2GhSGT和GhCalRNAi載體構(gòu)建.......................................................……453.6.3農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化及棉花花粉管通道注射.......

13、.......................................……464討論..................................................................................................................……，……484.1不同棉花RNA提取方法比較..…，.................................

14、...............................……484.2GhCesA:生物信息學(xué)分析............................................................................……484.3棉纖維不同發(fā)育時(shí)期蛋白表達(dá)模式分析....................................................……494.4纖維素合酶體外活性

15、分析............................................................................……494.SGhSGT]和Ghsu今了在纖維發(fā)育中的作用..................................................……504.6總結(jié)和展望...................................................

16、.................................................……50參考文獻(xiàn).....................................................................................................................……52附錄........................................