α-MSH、EPO減輕橫紋肌溶解大鼠急性腎損傷和心臟術(shù)后SKI的臨床研究.pdf

1、第一部分、一、α促黑素細(xì)胞激素和EPO預(yù)防橫紋肌溶解大鼠急性腎損傷的實(shí)驗(yàn)研究；二、α-MSH對(duì)橫紋肌溶解所致急性腎損傷大鼠腎臟保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究
　　 背景：橫紋肌溶解是急性腎損傷(AKI)常見(jiàn)原因，發(fā)病機(jī)制未完全清楚。研究顯示缺血性AKI是一種炎性反應(yīng)性疾病，抑制炎性反應(yīng)可減輕缺血再灌注引起的急性腎損傷。橫紋肌溶解性AKI是否有炎癥因素的參與未見(jiàn)報(bào)道，用具有強(qiáng)大抗炎作用的α促黑素細(xì)胞激素(α-MSH)能否抑制腎臟局部炎性反應(yīng)及

2、是否可減輕腎損害尚不清楚。
　　 目的：探討(α-MSH)能否減輕甘油誘導(dǎo)橫紋肌溶解大鼠腎組織中炎性反應(yīng)和對(duì)腎損害是否有保護(hù)作用。
　　 方法：建立甘油誘導(dǎo)的橫紋肌溶解大鼠急性腎損傷模型。禁水14h后48只SD大鼠隨機(jī)分4組：健康對(duì)照組：雙側(cè)后腿肌注生理鹽水10 ml/kg；ARF組：肌注50％甘油10 ml/kg；α-MSH立即干預(yù)組：肌注50％甘油的同時(shí)腹腔注射α-MSH200μg/kg，12 h后重復(fù)1次；α-MS

3、H延遲干預(yù)組：肌注50％甘油6 h后腹腔注射α-MSH200μg/kg，12 h后重復(fù)1次。24 h后處死大鼠，測(cè)血肌酐、尿素、肌酸激酶水平；腎組織PAS染色光鏡下行腎小管壞死半定量評(píng)分、免疫組化ED-1染色半定量計(jì)數(shù)，實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)腎組織中MCP-1 RNA表達(dá)水平，ELISA法測(cè)定腎組織NF-κ B P65 DNA結(jié)合活性。
　　 結(jié)果：與對(duì)照組相比，ARF組大鼠腎組織內(nèi)ED-1染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(16.8±7.0比1.46±

4、1.24)，MCP-1的RNA表達(dá)量(11.0±3.8比7.8±1.9)均顯著增加(P均<0.05)。α-MSH立即干預(yù)組ED-1染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(9.5±8.2)和MCP-1的RNA表達(dá)量(8.7±5.1)與ARF組相比均顯著減少(P<0.05)。α-MSH立即干預(yù)組血肌酐、尿素氮和。腎小管壞死評(píng)分均低于ARF組[分別為(152±76)比(333±60)μmol/L、(23.8±9.3)比(56.0±10.0)mmol/L和1.7±0.

5、4比2.7±0.4，P均<0.05]。健康對(duì)照組、ARF組、α-MSH立即干預(yù)組和延遲干預(yù)組腎臟轉(zhuǎn)錄因子NF-κ B P65 DNA結(jié)合活性分別為3.19±0.99、5.30±0.84、3.34±1.0、5.05±1.1(μg/ml)(方差分析，P<0.01)，提示α-MSH立即干預(yù)可減輕橫紋肌溶解大鼠腎臟NF-κ B活性。而α-MSH延遲干預(yù)組各指標(biāo)與ARF組之間，各組間血IL-6和TNF-α之間，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)

6、論：甘油所致橫紋肌溶解大鼠腎組織中巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)增加，MCP-1表達(dá)增加，腎臟轉(zhuǎn)錄因子NF-κ B P65 DNA結(jié)合活性增加，即刻注射α-MSH有抑制腎組織炎性反應(yīng)、減輕腎損害作用。
　　 二、促紅細(xì)胞生成素對(duì)橫紋肌溶解大鼠急性腎損傷的保護(hù)作用
　　 背景：地震等突發(fā)事件可引起大批橫紋肌溶解綜合征，并可出現(xiàn)急性腎損傷，預(yù)防、減少橫紋肌溶解后AKI的發(fā)生有重要的意義。近期研究提示EPO可減輕缺血再灌注腎小管細(xì)胞凋亡和壞死、

7、刺激其再生，促進(jìn)腎功能恢復(fù)。EPO是否對(duì)橫紋肌溶解引起的AKI有腎臟保護(hù)作用及其機(jī)理尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　 目的：研究促紅細(xì)胞生成素能否減輕橫紋肌溶解引起的大鼠急性腎損傷(AKI)并探討機(jī)理。
　　 方法：重200g左右SD大鼠48只，禁水14小時(shí)后分4組，正常對(duì)照組：兩后腿肌注生理鹽水10ml/Kg；ARF組：兩后腿肌肉內(nèi)注射50％甘油(10ml/Kg)；EPO立即干預(yù)組：肌注50％甘油的同時(shí)腹腔注射EPO2000μg/K

8、g；12h后重復(fù)1次；EPO延遲干預(yù)組：在肌注甘油6h后注射EPO2000μg/Kg，12h重復(fù)1次。觀察尿量、腎功能和腎組織病理變化，用Western blotting法檢測(cè)腎組織中子Bcl-XL的蛋白質(zhì)表達(dá)。
　　 結(jié)果：與ARF組相比，EPO立即干預(yù)組和延遲干預(yù)組24h后血尿素(分別是56±10、24±10和25.8±9 mmol/L)、血肌酐濃度(分別是333±60、171±103和178±98μmol/L)均明顯降低，

9、ATN評(píng)分下降(分別為2.7±0.4，1.5±0.6和1.54±0.4，P<0.05)。造模48h后ARF組血肌酐急性上升，而EPO立即干預(yù)和延遲干預(yù)組血肌酐已有所下降，分別是477±223、119±89、117±130μmol/L，P<0.01。肌注甘油的3組大鼠24h腎組織中均存在小管細(xì)胞凋亡，ARF組比較明顯，EPO干預(yù)組凋亡情況減輕；肌注甘油的大鼠腎組織抗凋亡因子Bcl-XL的蛋白質(zhì)表達(dá)比正常對(duì)照組增加，EPO立即干預(yù)和延遲干預(yù)

10、組增加更加明顯。
　　 結(jié)論：立即注射和延遲6h注射EPO均可減輕甘油誘導(dǎo)的橫紋肌溶解性大鼠急性腎損傷，可能與EPO減輕腎小管上皮細(xì)胞凋亡有關(guān)。
　　 第二部分：心臟手術(shù)后急性腎損傷的危險(xiǎn)因素、死亡原因及預(yù)后相關(guān)因素分析
　　 背景：急性腎損傷是心臟手術(shù)后常見(jiàn)而嚴(yán)重并發(fā)癥，使心臟手術(shù)患者住院時(shí)間延長(zhǎng)、治療費(fèi)用增加、住院和遠(yuǎn)期死亡率增加，分析心臟手術(shù)患者發(fā)生AKI的危險(xiǎn)因素、死亡原因和預(yù)后相關(guān)的因素，有助于預(yù)防、減

11、少術(shù)后AKI發(fā)生率，降低住院費(fèi)用和病死率。
　　 1.心臟手術(shù)后急性腎功能衰竭危險(xiǎn)因素的多因素分析
　　 目的：分析心臟手術(shù)后發(fā)生急性腎功能衰竭(ARF)的危險(xiǎn)因素。
　　 方法：回顧性病例對(duì)照研究，腎衰組108例，隨機(jī)選同期非腎衰152例為對(duì)照組，用logistic回歸分析10種手術(shù)前、后因素與ARF的相關(guān)性。ARF定義為術(shù)后48h內(nèi)血肌酐上升>0.5mg/dl(44.2μmol/L)或較基礎(chǔ)值上升超過(guò)50％。

12、
　　 結(jié)果：與對(duì)照組相比，腎衰組術(shù)前內(nèi)生肌酐清除率低(65.2±26.7ml/min vs91.4±28.1ml/min，P<0.001)，左室射血分?jǐn)?shù)差(0.54±0.09 vs0.58±0.07 vs，P<0.001)，體外循環(huán)總時(shí)間(145.8±111min vs99.9±46.0min，P<0.001)、心臟停跳時(shí)間(77.5±34.7min vs67.7±35.2min，P=0.027)和手術(shù)時(shí)間(6.1h±3.5h

13、 vs3.9h±1.5h，P<0.001)均較長(zhǎng)，術(shù)中輸血量多(1360±1076ml vs847±400ml，P<0.001)。Logistic逐步回歸分析提示術(shù)前心功能分級(jí)(OR：3.04)、內(nèi)生肌酐清除率(OR：0.97)、術(shù)后低血壓(OR：9.66)、再次開(kāi)胸(OR：11.61)、手術(shù)時(shí)間(OR：1.32)是發(fā)生ARF的最危險(xiǎn)因素。
　　 結(jié)論：術(shù)前血肌酐清除率降低、心功能差，術(shù)后低血壓、需要再次開(kāi)胸術(shù)和手術(shù)時(shí)間是預(yù)示心

14、臟術(shù)后ARF發(fā)生率增加。充分評(píng)價(jià)術(shù)前危險(xiǎn)因素，縮短手術(shù)時(shí)間、避免術(shù)中和術(shù)后并發(fā)癥可能會(huì)減少心臟手術(shù)后ARF的發(fā)生率。
　　 2.108例心臟手術(shù)后急性腎功能衰竭的病因和預(yù)后因素分析
　　 目的：分析心臟手術(shù)后急性腎功能衰竭(ARF)的原因及預(yù)后相關(guān)因素。
　　 方法：回顧性研究，分析1994年～2002年一個(gè)中心心臟手術(shù)后并發(fā)ARF的患者急性腎損傷原因、死亡原因和死亡危險(xiǎn)因素。ARF定義為術(shù)后48h內(nèi)血肌酐上升>

15、0.5mg/dl(44.2μmol/L)或較基礎(chǔ)值上升超過(guò)50％。
　　 結(jié)果：符合ARF診斷108例，原因主要有心源性低血壓(50例)，嚴(yán)重感染3例，呼吸衰竭4例，溶血8例，間質(zhì)性腎炎1例，42例不能明確。病人存活38例(占35.2％)，死亡70例(64.8％)。死亡原因有：MODS33例；心源性死亡26例，呼吸衰竭2例，高鉀血癥4例，出血性休克2例，腦損傷1例，DIC1例，肺出血窒息1例。有9例患者死于腎功能恢復(fù)期或恢復(fù)后。

16、單變量分析結(jié)果顯示，無(wú)尿(OR：10.4)、持續(xù)性低血壓(OR：21.4)、需要呼吸機(jī)支持超過(guò)3天(OR：18.3)、昏迷(OR：9.4)、消化道出血(0R：4.11)等情況下患者病死率明顯增加。死亡組受累臟器數(shù)明顯多于存活組(平均3.34 vs1.63，P<0.001)。Cox回歸分析顯示少尿、持續(xù)低血壓、需機(jī)械通氣大于3天是預(yù)示死亡的重要因素(β：1.19、1.13 and1.11respectively；P：<0.001、=0.0