鹽酸戊乙奎醚預先給藥對大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷的影響及其相關機制的研究.pdf

1、高強度軍事訓練、戰(zhàn)創(chuàng)傷等可導致橫紋肌溶解癥，進而導致急性腎損傷，病死率較高。因此，探討橫紋肌溶解致急性腎損傷的致病機制及其防治措施，具有重大的軍事價值和臨床意義。本課題組以往研究表明，抗膽堿藥山莨菪堿可通過改善微循環(huán)、減輕組織氧化應激反應、抗腎細胞凋亡等途徑，減輕橫紋肌溶解導致的大鼠急性腎損傷。鹽酸戊乙奎醚(PHC)是一種新型莨菪類選擇性抗膽堿藥，同時具有抗毒蕈堿和抗煙堿作用，目前在國內(nèi)已廣泛應用于麻醉術前用藥。研究表明，PHC具有減輕

2、組織氧化應激、抗細胞凋亡等作用，其還可改善大鼠腎缺血-再灌注損傷。而PHC是否可減輕橫紋肌溶解導致的急性腎損傷，及其分子作用機制如何，尚不明確，有待進一步研究。
　　目的：本研究擬通過建立大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷模型，采用PHC預先給藥的干預方法，評價PHC對大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷的影響及其相關機制。
　　方法：雄性清潔級SD大鼠90只，體重200～220 g，采用隨機數(shù)字表法分為5組（n=18）:對照組（C組），雙側

3、后肢肌肉注射生理鹽水10 ml/kg;模型組(AKI組)，雙側后肢肌肉注射50％甘油生理鹽水溶液10 ml/kg;戊乙奎醚預處理組(PHC組)，甘油肌注30 min前給予腹腔注射鹽酸戊乙奎醚0.2 mg/kg; HO-1抑制劑組(ZnPP組)，甘油肌注24 h前給予腹腔注射ZnPP10 mg/kg;戊乙奎醚預處理+HO-1抑制劑組(PHC+ZnPP組)，按PHC組和ZnPP組的處理方法分別給予腹腔注射ZnPP和PHC。各組于甘油肌注后1

4、h、6h和24 h時分別隨機選取6只大鼠，采集靜脈血樣測定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)和肌紅蛋白濃度;采集腎組織標本，分別行腎組織病理檢查、血紅素加氧酶1(HO-1)活性測定、免疫組織化學檢查、原位TUNEL法細胞凋亡率測定、RT-qPCR檢測和Western blotting檢測。
　　結果：(1)與C組比較，AKI組各時點血清BUN、Cr和CK濃度、腎小管損傷評分升高(P＜0.01);與AKI組比較，P

5、HC組各時點血清BUN和Cr濃度、腎小管損傷評分降低(P＜0.01或0.05);與PHC組比較，ZnPP組和PHC+ZnPP組各時點上述指標升高(P＜0.01或0.05);(2)與C組比較，AKI組血清和腎組織肌紅蛋白水平升高，腎組織HO-1活性增強，腎組織核蛋白Nrf2表達上調(diào)，腎組織HO-1在基因和蛋白質水平上表達上調(diào);與AKI組比較，PHC組血清和腎組織肌紅蛋白水平降低，腎組織HO-1活性增強，腎組織Nrf2和HO-1在基因和蛋白

6、質水平上表達上調(diào);與PHC組比較，ZnPP組和PHC+ZnPP組血清和腎組織肌紅蛋白水平升高，腎組織HO-1活性減低，部分時點腎組織Nrf2和HO-1在基因和蛋白質水平上表達下調(diào);(3)與C組比較，AKI組各時點腎細胞凋亡率升高(P＜0.01），腎組織GRP78和caspase-12在基因和蛋白質水平上表達上調(diào)(P＜0.01);與AKI組比較，PHC組各時點腎細胞凋亡率降低(P＜0.01或0.05)，部分時點腎組織GRP78和caspa

7、se-12在基因和蛋白質水平上表達下調(diào)(P＜0.01）。
　　結論：(1)橫紋肌溶解可導致大鼠急性腎損傷，PHC預先給藥可減輕大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷時的腎功能損害和腎組織病理損傷;(2)Nrf2/HO-1信號通路參與了大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷時腎組織保護機制。PHC預先給藥可通過激活腎組織內(nèi)Nrf2/HO-1信號通路，減輕腎組織內(nèi)肌紅蛋白和亞鐵血紅素的蓄積，從而減輕了大鼠橫紋肌溶解導致的急性腎損傷;(3)內(nèi)質網(wǎng)應激(ERS)