鹽酸戊乙奎醚對大鼠肢體缺血-再灌注繼發(fā)肺損傷的影響.pdf

1、肢體缺血-再灌注常見于腹主動脈瘤手術、大血管栓塞再通或者損傷修復、斷肢再植術、體外循環(huán)等,缺血范圍較廣,不僅缺血肢體可發(fā)生更嚴重的損傷,還可導致遠隔器官(如肺)的損傷,甚至多器官功能障礙.有學者認為抗膽堿藥物有細胞膜保護作用,能提高細胞對缺血缺氧的耐受性,穩(wěn)定溶酶體和線粒體等亞細胞結構,減少溶酶體酶的釋放,抑制花生四稀酸代謝物的產(chǎn)生和休克因子的形成.這些都有利于解除小血管痙攣,擴張血管,降低心臟的前后負荷,減少肺損傷后肺水的滲出量.臨床

2、證明體外循環(huán)下心內直視手術病人使用鹽酸戊乙奎醚對體外循環(huán)后的肺損傷有明顯的保護作用,其效果優(yōu)于阿托品和東莨菪堿,且較大劑量時效果更好. 本課題通過動物實驗,來初步探討不同劑量的鹽酸戊乙奎醚對缺血-再灌注繼發(fā)肺損傷的影響的機制,為臨床研究提供相關依據(jù). 對象與方法: (1)制備缺血-再灌注大鼠模型大鼠經(jīng)標號分組稱重腹腔注射4﹪水合氯醛麻醉后置于手術板上,于雙側股三角處切開皮膚,分離股動、靜脈,用無創(chuàng)微動脈夾夾閉股動

3、脈造成雙后肢缺血,3小時后,右頸部開口分離頸內靜脈,建立輸液系統(tǒng),去除動脈夾恢復雙后肢血流4小時后處死.大體標本觀察呈暗紅色,體積變大,水腫,邊緣變鈍,可見點灶狀出血即說明模型制作成功. (2) 用藥Ⅰ組(對照組,即進行同樣的麻醉及手術,只是不進行血管夾閉,不用藥),Ⅱ組(損傷組,即建立缺血再灌注模型但不用藥),Ⅲ組和Ⅳ組分別于開放前10分鐘肌肉注射鹽酸戊乙奎醚2mg/kg、9mg/kg. (3) 觀察指標:取右肺組織用

4、鹽水沖去殘血,濾紙吸干水分,在分析天平上精確稱濕重后于80℃烘干48小時,再稱干重,計算肺組織含水率=(濕重-干重)/干重×100﹪,取左肺上葉組織約1mm<'3>肺組織置于2.5﹪戊二醛磷酸緩沖液中固定1-4小時,再經(jīng)4℃,1﹪鋨酸后固定1-2小時,包埋染色后,行透射電鏡觀察.取左肺中葉制成10﹪組織勻漿用酶聯(lián)免疫吸附法檢測TNF-a和IL-10的含量. (4) 統(tǒng)計學分析用SPSS軟件系統(tǒng)分析結果,計量資料以均數(shù)±標準差(x

5、±S)表示,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義. 結果 (1) 一般資料:四組大鼠月齡、體重、麻醉時間、手術時間、缺血-再灌注時間差異均無顯著性(P>0.05). (2) 肺組織含水率:損傷組肺組織含水率明顯高于對照組(P<0.05),小劑量組肺組織含水率明顯低于損傷組(P<0.05),大劑量組肺組織含水率明顯低于小劑量組(P<0.05. (3) 電鏡結果:對照組肺毛細血管基底膜較

6、完整,肺泡Ⅱ型上皮細胞呈圓形或橢圓形,胞漿豐富,游離面微絨毛及板層體較完整; 損傷組及小劑量組可見肺毛細血管基底膜連續(xù)性中斷,毛細血管內皮細胞腫脹,內皮細胞間隙增寬,肺泡Ⅱ型上皮細胞微絨毛破壞程度嚴重,微絨毛變短、減少甚至消失,Ⅱ型上皮細胞板層體排空;大劑量組游離面微絨毛輕度破壞,損傷程度介于Ⅰ、Ⅱ兩組之間. (4)肺組織勻漿中TNF-和IL-10含量:損傷組肺組織勻漿中TNF-a含量明顯高于對照組(P<0.05),小劑量組肺組

7、織勻漿中TNF-a含量明顯低于損傷組(P<0.05),大劑量組肺組織勻漿中TNF-a含量明顯低于小劑量組(P<0.05); 損傷組肺組織勻漿中IL-10含量明顯低于對照組(P<0.05),,小劑量組肺組織勻漿中IL-10含量明顯高于Ⅱ組(P<0.05),大劑量組肺組織勻漿中IL-10含量明顯高于小劑量組(P<0.05). 結論；(1)肢體缺血一再灌注可以引起遠隔器官(如肺)的損傷,甚至導致多器官功能障礙. (2)