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文檔簡介
1、目的:探討輔助性 T細胞因子(白介素-4、白介素-13、γ-干擾素)對于人氣道壁血管平滑肌細胞去整合素金屬蛋白酶33(ADAM33)基因表達的影響。
方法:將人肺組織標本進行原代細胞培養(yǎng),獲得人氣道壁血管平滑肌細胞,分別與不同濃度白介素-4、白介素-13、γ-干擾素(IL-4、IL-13、IFN-γ)共培養(yǎng),采用實時定量反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法及蛋白印跡法(Western Blot)測定不同刺激時間及不同刺激濃度
2、ADAM33基因表達的變化,驗證人氣道壁血管平滑肌細胞中 ADAM33基因表達與 IL-4、IL-13、IFN-γ刺激的濃度關(guān)系和時間關(guān)系。
結(jié)果:人氣道壁血管平滑肌細胞中存在ADAM33的表達,當(dāng)IL-4、IL-13刺激濃度增加時,ADAM33基因表達增加,總體呈現(xiàn)出濃度依賴性趨勢,當(dāng) IFN-γ刺激濃度增加時,ADAM33基因表達減少;當(dāng)分別以100ng/mL IL-4、IL-13刺激時,隨刺激時間延長,ADAM33基因的
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