星形膠質(zhì)細(xì)胞縫隙連接通訊對(duì)深部腦白質(zhì)低灌注損傷的影響.pdf

1、本文分為兩個(gè)部分進(jìn)行探討：
　　第一部分 星形膠質(zhì)細(xì)胞縫隙連接蛋白Cx43在慢性腦白質(zhì)神經(jīng)血管單元缺血性損害中的影響
　　目的：研究小鼠BCAS造模后不同時(shí)間，腦白質(zhì)髓鞘相關(guān)蛋白MAG、MBP的表達(dá)量的改變，特異性敲除星形膠質(zhì)細(xì)胞connexin43對(duì)小鼠腦白質(zhì)低灌注損害的影響，少突膠質(zhì)細(xì)胞增殖分化的不同。
　　方法：根據(jù)Cre-loxP技術(shù)獲得星形膠質(zhì)細(xì)胞connexin43敲除的C57小鼠，利用雙側(cè)頸總動(dòng)脈狹窄技術(shù)

2、建立其腦白質(zhì)低灌注模型。通過蛋白免疫印跡法對(duì)不同實(shí)驗(yàn)組小鼠白質(zhì)區(qū)域髓鞘相關(guān)蛋白進(jìn)行半定量。通過免疫熒光染色技術(shù)觀察各實(shí)驗(yàn)組小鼠白質(zhì)少突膠質(zhì)細(xì)胞的增殖分化改變和郎飛氏結(jié)相關(guān)結(jié)構(gòu)的改變情況。
　　結(jié)果：在BCAS模型中，低灌注條件下可以導(dǎo)致小鼠腦白質(zhì)脫髓鞘改變，白指處成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞減少。敲除星形膠質(zhì)細(xì)胞cx43后，可以減輕髓鞘脫失的程度，成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞減少降低，減輕軸突郎飛氏結(jié)結(jié)構(gòu)的改變，并促使增殖的少突前體細(xì)胞分化成熟。

3、　　結(jié)論：敲除星形膠質(zhì)細(xì)胞cx43可以減輕低灌注導(dǎo)致的小鼠腦白質(zhì)損傷，有一定的神經(jīng)保護(hù)作用。
　　第二部分 探索星形膠質(zhì)細(xì)胞Cx43介導(dǎo)的縫隙連接通訊在腦白質(zhì)慢性低灌注性損傷中的作用機(jī)制
　　目的：在研究特異性調(diào)控星形膠質(zhì)細(xì)胞Cx43對(duì)腦白質(zhì)低灌注損傷的影響基礎(chǔ)上，探索該縫隙連接通道通訊在深部腦白質(zhì)低灌注性損傷的機(jī)制。
　　方法：利用微透析的方法，透析不同實(shí)驗(yàn)組小鼠白質(zhì)部位細(xì)胞間隙各種小分子成分，通過熒光化學(xué)和電化學(xué)的

4、方法檢測(cè)各組小鼠透析液中小分子：乳酸、谷氨酸、腺苷的變化；通過離體核磁技術(shù)，檢測(cè)了各組小鼠胼胝體部位各種代謝產(chǎn)物的變化情況。
　　結(jié)果：在生理情況下，特異性敲除星形膠質(zhì)細(xì)胞縫隙連接蛋白Cx43對(duì)小鼠的腦白質(zhì)微環(huán)境中并沒有明顯影響；在腦白質(zhì)低灌注損傷第3天，Cx43 lox/lox小鼠腦組織內(nèi)的腺苷、乳酸和谷氨酸出現(xiàn)明顯上升，而在GFAP Cre-Cx43 lox/lox小鼠腦組織內(nèi)保持低平狀態(tài)，其中谷氨酸和乳酸的結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義