星形膠質(zhì)細胞微絲表達與細胞縫隙連接的關系及其在癲癇發(fā)病中的意義.pdf

1、目的:研究馬桑內(nèi)酯(CoriariaLactone，CL)和縫隙連接通道阻滯劑1-庚醇(1-hepatal，1-hep)對模擬神經(jīng)元興奮環(huán)境下即給予高濃度kcl作用下的星形膠質(zhì)細胞微絲F-actin的影響及其與縫隙連接通道的關系，以及它們在癲癇發(fā)病中的意義。 方法:利用改良McCarthy的方法培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞，制備細胞爬片，并對培養(yǎng)的細胞進行不同干預分組：A.正常對照組；B.高濃度的kcl作用組；C.kcl+CL組；D.kcl

2、+1-hep組；E.kcl+CL+1-hep組。每組再分為24，48小時作用時間亞組。采用直接免疫熒光法，用BODIPYFLphallacdin對星形膠質(zhì)細胞F-actin進行熒光染色。用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察各組細胞骨架F-actin的結構及分布，同時測定F-actin含量。 結果:培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞經(jīng)過GFAP免疫組化鑒定，陽性率達90％以上。用激光掃描共聚焦顯微鏡測定細胞骨架F-actin含量，發(fā)現(xiàn)高濃度的kcl作用于星

3、形膠質(zhì)細胞24h，48h后，F(xiàn)-actin的熒光強度較對照組升高(P＜0.01)，同時給予kcl+CL作用于星形膠質(zhì)細胞24h，48h后F-actin的熒光強度較kcl組明顯升高(P＜0.01)，而同時給予kcl+CL+1-hep組熒光強度較kcl+CL組明顯降低(P＜0.01)。同一因素作用下24h作用組與48h作用組熒光強度未見統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。 結論:CL可引起星形膠質(zhì)細胞內(nèi)F-actin含量的升高，而通道阻滯劑