轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βⅢ型受體在心房顫動(dòng)心房纖維化中的作用研究.pdf

1、心房顫動(dòng)（房顫）是臨床實(shí)際中最常見(jiàn)的心律失常，也是導(dǎo)致死亡率增加的常見(jiàn)原因，房顫與遠(yuǎn)期卒中、心力衰竭等死亡危險(xiǎn)直接相關(guān)。心房重構(gòu)是房顫發(fā)生基礎(chǔ)，房顫自身又可以促重構(gòu)而加重房顫的發(fā)生、發(fā)展。持續(xù)性房顫的發(fā)生是以心房的組織重構(gòu)和電重構(gòu)為基礎(chǔ)的慢性進(jìn)展過(guò)程。心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)最顯著的特征是心房纖維化，在慢性心房顫動(dòng)的維持中發(fā)揮了重要的作用，延緩心房的結(jié)構(gòu)重構(gòu)能有效地預(yù)防房顫的復(fù)發(fā)，在房顫治療中有積極作用。TGF-β信號(hào)通路是一多功能的通路，是啟動(dòng)和

2、終止組織修復(fù)的關(guān)鍵細(xì)胞因子，也是調(diào)節(jié)組織纖維化的基礎(chǔ)，與心房顫動(dòng)的相互關(guān)系密切。TGFBR3（轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βⅢ型受體，transforming growth factorbeta typeⅢ receptor，也被稱為betaglycan）作為TGF-β受體的一部分，與心肌纖維化密切相關(guān)，但其在房顫發(fā)病作用機(jī)制仍有待確定。本研究將通過(guò)房顫患者研究TGFBR3與心房纖維化的關(guān)系，并通過(guò)對(duì)大鼠心房成纖維細(xì)胞的干預(yù)實(shí)驗(yàn)研究TGFBR3對(duì)TGF

3、β信號(hào)通路的調(diào)控作用探討TGFBR3在心房顫動(dòng)心房纖維化中的作用。
　　方法:
　　(1)104例開(kāi)胸手術(shù)患者，分為房顫組（43例）和竇律組（61例）。術(shù)中收取少量右心耳組織，HE染色觀察形態(tài)學(xué)變化，電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)變化，masson染色觀察心房膠原纖維沉積變化，實(shí)時(shí)熒光定量PCR及WesternBlot檢測(cè)兩組患者右心耳TGFBR3、Smad2、纖維連接蛋白(Fibronectin)mRNA和蛋白的表達(dá)水平。
　　(

4、2)實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western Blot檢測(cè)不同濃度和不同時(shí)間TGFβ刺激下原代SD大鼠的乳鼠心房成纖維細(xì)胞。
　　(3)利用siRNA干擾技術(shù)，沉默和過(guò)表達(dá)SD乳鼠心房成纖維細(xì)胞TGFBR3表達(dá)，探討TGFBR3調(diào)控的TGF-β信號(hào)通路在房顫心房纖維化中的作用，為房顫發(fā)病機(jī)制的研究提供新的思路。
　　研究結(jié)果顯示:
　　1.
　　(1)竇律組患者右心耳TGFBR3 mRNA表達(dá)水平(0.9672±0.5

5、436)明顯高于房顫心律組(0.4718±0.3399)，t=4.455，P＜0.05;竇律組右心耳(1.2020±1.05783) TGFBR3蛋白表達(dá)水平明顯高于房顫組患者(0.7471±0.3990)，t=2.331，P＜0.05。
　　(2)竇律組患者右心耳Smad2 mRNA表達(dá)水平(0.4615±0.2281)明顯低于房顫組(4.3095±0.1311)，t=-1.483，P＜0.05;竇律組右心耳Smad2蛋白表達(dá)水

6、平(0.8636±0.4795)明顯低于房顫組患者(1.2758±0.8141)，t=46.128，P＜0.05。
　　(3)竇律組右心耳Fibronectin mRNA表達(dá)水平(1.5884±0.9480)明顯低于房顫組患者(2.2621±1.6670)，t=-2.093，P＜0.05;竇律組Fibronectin蛋白表達(dá)水平(1.5998±1.0376)明顯低于房顫組(2.5122±1.9485)，t=-2.268，P＜0.0

7、5。，t=-2.268，P＜0.05。
　　2.體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　(1)慢病毒轉(zhuǎn)染大鼠乳鼠心房成纖維細(xì)胞沉默和過(guò)表達(dá)TGFBR3基因，表明TGFBR3有抗纖維化的作用;
　　(2)TGF-β干預(yù)大鼠原代心房成纖維細(xì)胞結(jié)果: TGF-β促進(jìn)大鼠心房成纖維細(xì)胞分泌Fibronectin，并呈現(xiàn)濃度依賴性和時(shí)間依賴性，降低TGFBR3的表達(dá)。
　　以上結(jié)果顯示，TGFBR3下調(diào)在心房纖維化發(fā)生的過(guò)程中起著重要作