阿膠強(qiáng)骨口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的完善性研究.pdf

1、目的：完善阿膠強(qiáng)骨口服液（EJQGOS）的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，建立定性、定量方法及口服液澄明度的工藝優(yōu)化方法，為口服液內(nèi)在質(zhì)量的控制和評(píng)價(jià)提供依據(jù)。
　　方法：
　　1、定性方法：建立阿膠強(qiáng)骨口服液中阿膠的定性鑒別方法，采用胰蛋白酶對(duì)阿膠強(qiáng)骨口服液中的阿膠成分進(jìn)行酶解，利用液智聯(lián)用技術(shù)（HPLC-MS）對(duì)阿膠的專屬特征離子峰進(jìn)行檢測(cè)，并進(jìn)行方法學(xué)考察；
　　2、定量方法：(1)建立高效液相色譜法（HPLC）同時(shí)測(cè)定阿膠強(qiáng)骨口服液

2、中L-羥脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸的柱前衍生方法，并進(jìn)行方法學(xué)考察；(2)建立原子吸收分光光度法（AAS）檢測(cè)阿膠強(qiáng)骨口服液中的鉛、鎘、汞、砷、銅五種重金屬的定量方法，測(cè)定不同批號(hào)口服液中的重金屬殘留，并進(jìn)行方法學(xué)考察；(3)建立蒸發(fā)光散射檢測(cè)器高效液相色譜法（ELSD-HPLC）法測(cè)定口服液中的黃芪甲苷并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證；3、口服液澄明度的工藝優(yōu)化：采用殼聚糖作為絮凝劑對(duì)口服液的澄明度進(jìn)行考察，以提高口服液的澄明度。
　　

3、結(jié)果：
　　(1)采用 HPLC-MS鑒別阿膠的質(zhì)譜與色譜條件是：ACQUITY UPLC BEH-C18(2.1×100mm)色譜柱，以0.1％甲酸水溶液為流動(dòng)相A，以乙腈為流動(dòng)相B，流速0.3 mL/min-1，柱溫40℃，進(jìn)樣量5μL，選擇阿膠特征分子離子峰m/z539.8(雙電荷)→612.4和m/z539.8(雙電荷)→923.8作為檢測(cè)離子對(duì)，離子化模式為ESI+，進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測(cè)；
　　(2)采用HPLC測(cè)定四種

4、氨基酸的樣品處理方法及色譜條件是：樣品以6mol/L-1鹽酸于150℃水解24h，以異硫氰酸苯酯（PITC）作為衍生化試劑衍生，采用Welch XB-C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)；流動(dòng)相A為0.1mol/L-1醋酸鈉緩沖液（以醋酸調(diào) PH6.5）-乙腈(93:7)，流動(dòng)相 B為乙腈-水(4:1)，梯度洗脫，體積流量1mL/min-1，檢測(cè)波長254nm，進(jìn)樣體積5μL，柱溫43℃；
　　(3)采用2015版《中國

5、藥典》通則上的重金屬定量方法（AAS）測(cè)定鉛、鎘、汞、砷、銅，可作為阿膠強(qiáng)骨口服液中重金屬殘留的定量方法；
　　(4)ELSD-HPLC作為考察黃芪甲苷含量的測(cè)定方法準(zhǔn)確，專屬性良好；
　　(5)通過實(shí)驗(yàn)所確定的絮凝最佳工藝為：殼聚糖配制成冰醋酸:水:殼聚糖=1:100:1的溶液，在提取液中按照1.0ml/100ml的比例加入殼聚糖溶液，攪拌均勻，20℃水浴，靜置16h后，在6000r/min-1的轉(zhuǎn)速下離心12min，取上