TtATG8基因在嗜熱四膜蟲(chóng)(Tetrahymena thermophila)自噬發(fā)生中的功能研究.pdf

1、自噬是細(xì)胞內(nèi)主要用于降解大分子蛋白質(zhì)或受損傷的細(xì)胞器如細(xì)胞核和線粒體等，以此來(lái)維持細(xì)胞動(dòng)態(tài)平衡的代謝途徑。盡管自噬相關(guān)基因(ATG)相繼在酵母，植物及哺乳動(dòng)物細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，但其在單細(xì)胞真核原生動(dòng)物四膜蟲(chóng)（Tetrahymena）中的同源基因尚未被鑒定。本研究首次克隆發(fā)現(xiàn)了四膜蟲(chóng)的自噬相關(guān)基因TtATG8，該基因所編碼的蛋白質(zhì)序列與酵母ATG8和人LC3基因的蛋白質(zhì)序列具有很高的同源性。我們的研究發(fā)現(xiàn)雷帕霉素（Rapamycin）處理可導(dǎo)

2、致TtATG8表達(dá)的增加;同時(shí)在熒光顯微鏡下可觀察到EGFP-TtATG8綠色熒光信號(hào)增強(qiáng)，結(jié)果提示TtATG8可作為衡量四膜蟲(chóng)自噬水平的良好指標(biāo)。我們的研究還發(fā)現(xiàn)饑餓處理可誘導(dǎo)增強(qiáng)自噬的發(fā)生，TtATG8表達(dá)水平并隨后增加細(xì)胞死亡率;雷帕霉素預(yù)處理可放大饑餓條件下的細(xì)胞中TtATG8的轉(zhuǎn)錄水平，同時(shí)通過(guò)增強(qiáng)自噬作用和防止ATP的消耗來(lái)增加細(xì)胞存活率。另外，我們的研究結(jié)果提示TtATG8過(guò)表達(dá)可促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)ATP的積累并延長(zhǎng)細(xì)胞生存期。綜