膽堿與帕瑞昔布鈉聯(lián)合應(yīng)用在急慢性疼痛模型中的鎮(zhèn)痛效應(yīng)及其機(jī)制.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開(kāi)論述：
　　第一部分 膽堿與帕瑞昔布鈉在急性醋酸扭體模型中的協(xié)同鎮(zhèn)痛作用其機(jī)制
　　目的：探討膽堿和帕瑞昔布鈉在鎮(zhèn)痛中的互相作用并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行簡(jiǎn)單研究。
　　方法：醋酸扭體模型：昆明小鼠，150只，雄性，隨機(jī)分為4組：(1)對(duì)照組(S)（n=10）：尾靜脈注射0.9％的生理鹽水0.2mL/20g;(2)膽堿組(C)(n=50)：50只小鼠設(shè)立5個(gè)劑量即3mg/kg、6mg/kg、12mg/kg

2、、24mg/kg、48mg/kg;(3)特耐組(P)(n=50)：50只小鼠設(shè)立5個(gè)劑量即1.5mg/kg、3mg/kg、6mg/kg、12mg/kg、24mg/kg;(4)聯(lián)合用藥組(C+P)(n=40)：40只小鼠設(shè)立4個(gè)劑量，分別為兩藥ED50的1/2、1/4、1/8、1/16，進(jìn)而可求出兩藥合用時(shí)的ED50。所有藥物均在造模前經(jīng)尾靜脈給予。膽堿給藥時(shí)間為造模前2h，帕瑞昔布鈉為30min。研究生理鹽水對(duì)照組(S)、ED50膽堿組

3、(C)、ED50帕瑞昔布鈉組(P)、以及1/2ED50膽堿和帕瑞昔布鈉組[1/2(C+P)]對(duì)醋酸扭體模型小鼠血中細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)的影響。藥物預(yù)處理時(shí)間同上，在腹腔給予醋酸后10min立即實(shí)施摘眼球采血。所采血液采用ELISA試劑盒檢測(cè)IL-1、TNF-α、PGE2、NF-kB、I-kB的含量。
　　結(jié)果：(1)醋酸扭體模型中，膽堿和帕瑞昔布鈉單獨(dú)經(jīng)尾靜脈給藥后所得的ED50，膽堿8.64mg/kg，帕瑞昔布鈉6.33mg/kg

4、;二者聯(lián)合用藥時(shí)膽堿為2.13mg/kg，帕瑞昔布鈉為1.56mg/kg。(2)在等輻射圖見(jiàn)膽堿與帕瑞昔布鈉合用時(shí)的ED50實(shí)測(cè)值落在理論值的下方，兩點(diǎn)作t檢驗(yàn)的P＜0.05。聯(lián)合用藥指數(shù)CI＜0.9。(3)與S組比較，C組、P組、1/2(C+P)組中IL-1、TNF-α的含量均降低（P＜0.05），且1/2(C+P)組比C組及P組分別單獨(dú)使用降低更加明顯(P＜0.05);P組以及1/2(C+P)組中PGE2含量較對(duì)照組均有降低(P＜0

5、.05)，1/2(C+P)組與C組相比PGE2含量下降更多(P＜0.05);與S組相比，NF-kB的含量在C組、P組、1/2(C+P)組中均降低（P＜0.05），I-kB的含量在1/2(C+P)組及C組中出現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的降低，NF-kB、I-kB在1/2(C+P)組中較P組有更明顯降低（P＜0.05）。
　　小結(jié)：膽堿與帕瑞昔布鈉共同作用于急性醋酸扭體模型中較兩藥分別使用，可以增加鎮(zhèn)痛效果，并減少單藥使用劑量，同時(shí)更好地降低血中

6、炎癥因子的含量。
　　第二部分 膽堿與帕瑞昔布鈉聯(lián)合應(yīng)用對(duì)CCI大鼠的鎮(zhèn)痛效應(yīng)
　　目的：觀察膽堿與帕瑞昔布鈉對(duì)慢性坐骨神經(jīng)損傷神經(jīng)病理性疼痛模型(CCI)大鼠的鎮(zhèn)痛效應(yīng)及脊髓HMGB1蛋白與NF-κBp65的表達(dá)，并對(duì)其可能的機(jī)制進(jìn)行探討。
　　方法：1.健康雄性SD大鼠，體重180-220g，隨機(jī)分為5組(n=8)，生理鹽水治療假手術(shù)組（sham組）大鼠腹腔注射相同容量的0.9％氯化鈉溶液;生理鹽水治療CCI組（C

7、CI+saline組）大鼠腹腔注射相同容量的0.9％氯化鈉溶液;膽堿(cho)治療CCI組大鼠腹腔注射膽堿6mg/kg，12mg/kg，24mg/kg;帕瑞昔布鈉(pare)治療CCI組大鼠腹腔注射帕瑞昔布鈉3mg/kg，6mg/kg，12mg/kg;膽堿與帕瑞昔布鈉聯(lián)用治療CCI組大鼠在確定無(wú)效劑量后，合用。各組均進(jìn)行相應(yīng)處理，并連續(xù)給藥7天。所有大鼠均在術(shù)前、術(shù)后第3、5、7、10、14天進(jìn)行測(cè)試。周藥組在注射藥物后30min測(cè)定大

8、鼠的疼痛閾值。2.另取30只SD大鼠，分為5組，即sham組，CCI+saline,CCI+choline6mg/kg,CCI+parecoxib3mg/kg,CCI+choline6mg/kg+parecoxib3mg/kg，造模成功后，連續(xù)給藥7天，每組隨機(jī)選取5只大鼠取L4-6節(jié)段脊髓背根神經(jīng)節(jié)，用Western blot檢測(cè)HMGB1蛋白及NF-κBp65。
　　結(jié)果：1.膽堿12mg/kg和24mg/kg劑量與模型組相比

9、能夠顯著減少機(jī)械性異常性疼痛及熱痛覺(jué)過(guò)敏(P＜0.05)，而6mg/kg對(duì)CCI大鼠機(jī)械痛及熱痛無(wú)明顯作用(圖1-2A);2.帕瑞昔布鈉6mg/kg和12mg/kg與模型組相比均有明顯的抗異常性疼痛的作用（P＜0.05），但是3mg/kg沒(méi)有觀察到其抗異常性傷害的作用（圖1-2B）;3.膽堿6mg/kg和帕瑞昔布鈉3mg/kg聯(lián)合應(yīng)用于CCI模型較生理鹽水治療的模型組產(chǎn)生顯著的抗傷害作用（P＜0.05）（圖3A-B）;4.膽堿與帕瑞昔布

10、鈉聯(lián)合應(yīng)用與模型組相比，其脊髓HMGB1蛋白及NF-κBp65的表達(dá)顯著降低(P＜0.05)（圖4）。
　　小結(jié)：在慢性神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型中，膽堿與帕瑞昔布鈉分別在無(wú)痛劑量下聯(lián)合使用表現(xiàn)出顯著的抗機(jī)械痛及熱痛的作用;同時(shí)脊髓HMGB1蛋白及NF-κBp65的表達(dá)也顯著降低。
　　結(jié)論：1.膽堿與帕瑞昔布鈉分別單獨(dú)使用能夠降低急性醋酸扭體模型小鼠的扭體次數(shù)，且這一作用呈劑量依賴(lài)性。2.膽堿與帕瑞昔布鈉在急性醋酸扭體模型中聯(lián)