microRNA-363通過下調S1PR1抑制肝癌細胞增殖.pdf

1、1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1PR1)是一種 G蛋白偶聯(lián)受體,屬于1-磷酸鞘氨醇受體家族,是重要的信號分子,通過與其配體1-磷酸鞘氨醇(S1P)結合調解下游信號通路活性。S1PR1廣泛表達與各種組織和器官細胞表面,參與了多種生物學功能。
　　前期研究證實 S1PR1作為癌基因,通過上調很多信號通路,促進了肝癌的發(fā)生發(fā)展。首先,相對正常的人胎肝細胞,肝細胞癌細胞高表達 S1PR1分子。而相對正常的人胎肝細胞,肝癌細胞則低表達 mir-

2、363。其次,S1PR1調節(jié)了很多經(jīng)典信號通路的活性,例如 ERK和 STAT3。第三,ERK和 STAT3信號通路調控了很多下游靶基因表達,涉及了多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展。
　　因此,我們嘗試研究肝癌細胞中S1PR1高表達的機制,并將研究聚焦于microRNA對S1PR1的調控機制上,取得以下的結果:
　　1.通過生物信息學預測,S1PR1 mRNA3′-UTR上有mir-363的結合位點,并通過熒光素酶報告基因實驗證實mir-

3、363在S1PR13′-UTR上的結合位點位于nt1256-1262處,并具有生物學功能。
　　2.我們通過qPCR和Western Blot發(fā)現(xiàn),相對人胎肝細胞系,肝癌細胞系高表單S1PR1而低表達mir-363。
　　3.通過qPCR和Western Blot,我們發(fā)現(xiàn)mir-363能夠在mRNA和蛋白水平下調S1PR1的表達。
　　4.通過CCK-8實驗,我們證實mir-363能夠抑制肝癌細胞增殖。
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