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文檔簡介
1、目的:
研究lncRNA-AF113014對肝癌發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生的作用及機制研究。
方法:
1.通過qRT-PCR對從基因芯片技術(shù)篩選出的在正常肝細胞和肝癌細胞中具有差異表達的lncRNAs進行驗證,從中選取在肝癌細胞中低表達的lncRNA-AF113014作為研究對象。
2.通過MTS和克隆形成實驗檢測了lncRNA-AF113014對SMMC-7721和SK-Hep1肝癌細胞增殖功能的影響。
2、> 3.尋找lncRNA-AF113014的靶基因。在SMMC-7721細胞中用qRT-PCR和Western blot實驗分別在mRNA和蛋白水平檢測lncRNA-AF113014對靶基因表達的影響。
4.MTS和克隆形成實驗檢測靶基因Egr2生物學(xué)功能。
5.雙蟲熒光素酶實驗對lncRNA-AF113014,miRNA-20a和Egr2三者間相互關(guān)系的研究。
6.用裸鼠成瘤、免疫組化和Western
3、blot實驗在體內(nèi)驗證lncRNA-AF113014對腫瘤增殖和Egr2的影響。
結(jié)果:
1.lncRNA-AF113014在肝癌細胞中呈低表達。
2.lncRNA-AF113014抑制肝癌細胞增殖。
3.lncRNA-AF113014促進靶基因Egr2的表達。
4.Egr2能夠抑制SMMC-7721細胞增殖。
5.lncRNA-AF113014通過結(jié)合miRNA-20a從而上
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