基于癌基因SHP-2(PTPN11)酪氨酸磷酸酶高效、特異性抑制物4-肼基苯磺酸的合成與鑒定.pdf

1、【研究背景】
　　惡性腫瘤是嚴(yán)重危害人類健康的疾病,發(fā)病率連年居高不下,在死因中的構(gòu)成比也在逐年上升,卻仍然無法安全有效地治療。在所有治療手段中化學(xué)藥物治療一直占有重要地位,因此長期以來各研究機(jī)構(gòu)對(duì)抗腫瘤藥物的研究一直是高度重視,抗腫瘤藥物的市場(chǎng)前景也十分廣闊。傳統(tǒng)腫瘤藥物特異性差,不能精確地針對(duì)腫瘤細(xì)胞發(fā)揮作用,嚴(yán)重影響療效和患者生存質(zhì)量。由于腫瘤發(fā)生發(fā)展的本質(zhì)是腫瘤細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的紊亂,因此尋找腫瘤發(fā)生發(fā)展信號(hào)通路中各種靶分子

2、的抑制物應(yīng)是一個(gè)很好的途徑。近年來在抗腫瘤藥物的研究上取得了重大進(jìn)展,越多越多的研究證明,磷酸酶在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中扮演重要角色,是有效的抗腫瘤靶點(diǎn),其中就包括SHP-2。SHP-2是酪氨酸磷酸酶家族中的一員,含有2個(gè)SH-2結(jié)構(gòu)域和激酶結(jié)構(gòu)域(PTP結(jié)構(gòu)域),廣泛存在于哺乳動(dòng)物組織細(xì)胞中,在多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中都起著重要作用。有研究證明,大約50％的努南綜合征、髓系白血病、兒童型粒單細(xì)胞性白血病及多種實(shí)體瘤中存在SHP-2的突變,SH

3、P-2也因此而成為第一個(gè)被定義為癌基因的磷酸酶。腫瘤患者SHP-2激活突變位點(diǎn)主要位于N端SH2結(jié)構(gòu)域(最常見的是E76K或D61G/Y突變)或PTP結(jié)構(gòu)域,這些突變往往使SHP-2活性不同程度的增強(qiáng),并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的發(fā)生,與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)。因此對(duì)其異常增高的磷酸酶活性有抑制作用的小分子抑制物應(yīng)該有良好的抗腫瘤效果。目前對(duì)SHP-2有高效特異性抑制作用的小分子抑制物還有很大的研發(fā)空間。我室前期研究初步篩選出三類結(jié)構(gòu)式

4、9個(gè)化合物可能與SHP-2分子結(jié)構(gòu)相結(jié)合,或可抑制其異常增高的磷酸酶活性。其中三類具有代表性的化合物分別命名為＃162、＃216、＃220化合物。關(guān)于這些化合物對(duì)SHP-2活性顯著增強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞是否具有特異性的抑制作用尚無明確報(bào)導(dǎo)。本文試圖通過合成此類目標(biāo)化合物,并檢測(cè)相關(guān)化合物對(duì)SHP-2激活突變的腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為的影響來鑒定該化合物是否具有特異、高效的抗腫瘤作用,為新的抗腫瘤藥物的研發(fā)提供一些參考。
　　【研究方法】

5、>　　為了鑒定目標(biāo)化合物對(duì)SHP-2激活突變的腫瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響,首先合成純化了目標(biāo)化合物＃162,并合成了＃216化合物的合成方法中所必須的部分中間產(chǎn)物,然后使用＃162來處理SHP-2磷酸酶活性異常增高的腫瘤細(xì)胞來鑒定它對(duì)SHP-2酪氨酸磷酸酶的高效特異性抑制作用并討論其可能的機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下。
　　【研究結(jié)果】
　　(1)成功合成了＃162號(hào)化合物4-肼基苯磺酸,應(yīng)用熔點(diǎn)測(cè)定、薄層色譜、核磁共振氫譜等檢測(cè)確

6、認(rèn)了其結(jié)構(gòu),提示純化完成。
　　(2)合成了＃216化合物的合成步驟中所必須的部分中間產(chǎn)物。
　　(3)鑒定了＃162號(hào)化合物對(duì)SHP-2激活突變的腫瘤細(xì)胞增殖力與遷移力的抑制作用,證明＃162號(hào)化合物可通過對(duì)活性異常增高的SHP-2酪氨酸磷酸酶特異、高效的抑制作用來靶向性地抑制此類腫瘤細(xì)胞的增殖與遷移。
　　【結(jié)論】
　　(1)成功合成了＃162號(hào)化合物4-肼基苯磺酸以及＃216號(hào)化合物合成方法中所必須的中間產(chǎn)