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文檔簡介
1、戊型肝炎病毒編碼三個開放性閱讀框: ORF1,ORF2和ORF3。其中ORF1編碼病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白,對病毒復制起重要作用。ORF2編碼病毒的外殼蛋白。而ORF3則編碼一個約120個氨基酸的磷酸化且與細胞骨架結(jié)合的蛋白,然其確切的生物學功能尚不詳。
本研究采用昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)和哺乳動物表達系統(tǒng)表達了戊型肝炎病毒ORF3蛋白,并基于本實驗室先前酵母雙雜交篩選戊型肝炎病毒ORF3在人肝細胞中相互作用蛋白的陽性結(jié)果,采用哺乳動物表
2、達系統(tǒng)克隆并表達了RPS11,HPN,ALB,HRG和PIK3CD五個ORF3的候選相互作用蛋白。通過免疫共沉淀驗證,我們發(fā)現(xiàn),其中HPN可以和ORF3相互作用。HPN是一種跨膜絲氨酸蛋白酶,其被廣泛報道具有抑制腫瘤的功能。因而我們推測,ORF3蛋白可能通過結(jié)合HPN蛋白從而具有促進腫瘤發(fā)生的作用。同時,我們也利用了本研究克隆和表達的ORF3蛋白結(jié)合免疫共沉淀,液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用的方法篩選并鑒定了七個ORF3的候選相互作用蛋白,這為進一步
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