高壓靜電紡絲法制備分離純化木瓜蛋白酶的親和膜基材的應(yīng)用研究.pdf

1、近年來，親和膜色譜技術(shù)在蛋白質(zhì)的分離純化中得到了快速發(fā)展，與柱親和色譜相比，親和色譜具有許多優(yōu)點，如流速高、分離速度快、壓降低和易于規(guī)模化生產(chǎn)等。
　　 利用高壓靜電紡絲技術(shù)制造的具有納米或微米尺度的聚合物復(fù)合纖維膜是作為親和膜色譜基材的良好原料。本課題就從選擇理想親和膜基材的角度出發(fā)，成功地利用高壓靜電紡絲技術(shù)制備出不同混合比例的尼龍6/殼聚糖納米復(fù)合纖維膜。首先介紹了靜電紡絲的發(fā)展、方法、成絲理論、成絲影響因素以及靜電紡納米

2、纖維的廣闊應(yīng)用前景。通過實驗為尼龍6／殼聚糖靜電紡絲找到了合適的溶劑體系，即體積比為9/1的六氟異丙醇／甲酸混合體系，首次制備出了尼龍6／殼聚糖靜電紡納米纖維膜。研究了一些紡絲參數(shù)（紡絲電壓、給液速率、紡絲距離），紡絲液濃度和尼龍6／殼聚糖不同比例配比對紡絲結(jié)果的影響。
　　 對不同比例的尼龍6／殼聚糖共混靜電紡納米纖維的形態(tài)、性能進(jìn)行了研究。通過掃描電鏡分析發(fā)現(xiàn)制備的靜電紡納米纖維直徑分布在80-310nm范圍內(nèi)；通過紅外光譜

3、分析和DSC分析，發(fā)現(xiàn)尼龍6和殼聚糖分子之間存在一定的相互作用；X射線衍射分析證明，在經(jīng)過靜電紡絲以后，纖維的物相結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，靜電紡絲纖維更趨向無定型態(tài)；通過對電紡纖維的接觸角測試和力學(xué)性能顯示，所得的復(fù)合纖維具有良好的親水性能以及良好的機(jī)械性能。
　　 本研究的首要目的是制備出具有更高蛋白質(zhì)吸附能力的新型親和膜材料。本論文首次以靜電紡尼龍6／殼聚糖為材料，以活性染料Cibacron Blue F3GA為配基制備了一種新型的

4、分離木瓜蛋白酶的親和膜基材，研究了其物理性能和色譜性能。實驗結(jié)果表明，染料F3GA的鍵和量為102μmol/g，親和膜對木瓜蛋白酶(2.0mg/ml)的飽和吸附量達(dá)到93.46mg/g，利用該親和膜對木瓜蛋白酶原液的純化倍數(shù)提高了5倍。本文綜合運用批量法和動態(tài)法以親和膜對木瓜蛋白酶的吸附過程進(jìn)行研究，結(jié)果表明，親和膜對木瓜蛋白酶的吸附行為滿足Langmuir模型。綜上，本研究所制備以靜電紡尼龍6／殼聚糖納米復(fù)合纖維膜為基材，以活性染料F