高壓靜電紡絲法制備分離純化木瓜蛋白酶的親和膜基材的應用研究.pdf

1、近年來，親和膜色譜技術在蛋白質的分離純化中得到了快速發(fā)展，與柱親和色譜相比，親和色譜具有許多優(yōu)點，如流速高、分離速度快、壓降低和易于規(guī)?；a等。
　　 利用高壓靜電紡絲技術制造的具有納米或微米尺度的聚合物復合纖維膜是作為親和膜色譜基材的良好原料。本課題就從選擇理想親和膜基材的角度出發(fā)，成功地利用高壓靜電紡絲技術制備出不同混合比例的尼龍6/殼聚糖納米復合纖維膜。首先介紹了靜電紡絲的發(fā)展、方法、成絲理論、成絲影響因素以及靜電紡納米

2、纖維的廣闊應用前景。通過實驗為尼龍6／殼聚糖靜電紡絲找到了合適的溶劑體系，即體積比為9/1的六氟異丙醇／甲酸混合體系，首次制備出了尼龍6／殼聚糖靜電紡納米纖維膜。研究了一些紡絲參數(shù)（紡絲電壓、給液速率、紡絲距離），紡絲液濃度和尼龍6／殼聚糖不同比例配比對紡絲結果的影響。
　　 對不同比例的尼龍6／殼聚糖共混靜電紡納米纖維的形態(tài)、性能進行了研究。通過掃描電鏡分析發(fā)現(xiàn)制備的靜電紡納米纖維直徑分布在80-310nm范圍內；通過紅外光譜

3、分析和DSC分析，發(fā)現(xiàn)尼龍6和殼聚糖分子之間存在一定的相互作用；X射線衍射分析證明，在經(jīng)過靜電紡絲以后，纖維的物相結構發(fā)生了變化，靜電紡絲纖維更趨向無定型態(tài)；通過對電紡纖維的接觸角測試和力學性能顯示，所得的復合纖維具有良好的親水性能以及良好的機械性能。
　　 本研究的首要目的是制備出具有更高蛋白質吸附能力的新型親和膜材料。本論文首次以靜電紡尼龍6／殼聚糖為材料，以活性染料Cibacron Blue F3GA為配基制備了一種新型的

4、分離木瓜蛋白酶的親和膜基材，研究了其物理性能和色譜性能。實驗結果表明，染料F3GA的鍵和量為102μmol/g，親和膜對木瓜蛋白酶(2.0mg/ml)的飽和吸附量達到93.46mg/g，利用該親和膜對木瓜蛋白酶原液的純化倍數(shù)提高了5倍。本文綜合運用批量法和動態(tài)法以親和膜對木瓜蛋白酶的吸附過程進行研究，結果表明，親和膜對木瓜蛋白酶的吸附行為滿足Langmuir模型。綜上，本研究所制備以靜電紡尼龍6／殼聚糖納米復合纖維膜為基材，以活性染料F