層狀材料—水滑石固定化木瓜蛋白酶的研究.pdf

1、該文以陰離子型層狀材料—水滑石(LDHs)作為載體,經(jīng)過(guò)戊二醛活化處理后采用共價(jià)結(jié)合的方法固定化木瓜蛋白酶.首先,討論了層板電荷密度對(duì)固定化酶活的影響,并優(yōu)化固定化時(shí)間、溫度、pH值、給酶量和戊二醛濃度等固定化條件,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:木瓜蛋白酶的最佳固定化條件是給酶量為每0.5克載體固定16mL1og/L的溶液酶,固定化溫度15℃,pH7.0,固定化時(shí)間12~24h,與2mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5％的戊二醛交聯(lián),所得固定化木瓜蛋白酶活力回收率平均

2、可達(dá)55％左右.其次,對(duì)此固定化酶的性質(zhì)進(jìn)行了研究.比較了溶液酶及固定化酶的催化特性,結(jié)果表明:固定化酶的最適反應(yīng)pH值為8.0~9.0,最適反應(yīng)溫度為65℃;固定化酶的pH穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性、貯藏穩(wěn)定性與溶液酶相比都有顯著的提高,并且固定化酶具有較好的操作穩(wěn)定性,連續(xù)反應(yīng)11批后,酶活未見(jiàn)下降.第三,利用氨基酸插層組裝載體,并制得固定化酶,對(duì)此固定化酶性質(zhì)進(jìn)行研究,包括對(duì)尿素和有機(jī)溶劑穩(wěn)定性、貯藏穩(wěn)定性、操作穩(wěn)定性.第四,對(duì)上述幾種載體

3、和固定化酶進(jìn)行了XRD分析.測(cè)定了固定化酶木瓜蛋白酶和溶液酶的米氏常數(shù),其值分別為溶液酶K<,m>=97.78mmol/L,CO<,3><'2->水滑石固定化酶K<,m>(app)=18.01mmol/L,GLU插層水滑石固定化酶Km(app)=5.36mmol/L.最后,嘗試了固定化木瓜蛋白酶在啤酒工業(yè)中的應(yīng)用.用固定化酶處理啤酒,結(jié)果發(fā)現(xiàn),固定化酶對(duì)防止啤酒的冷渾濁現(xiàn)象具有明顯的效果,處理后的啤酒仍可保持啤酒原有的風(fēng)味和理化性質(zhì),且