介孔分子篩固定木瓜蛋白酶的研究.pdf

1、木瓜蛋白酶作為被研究較早、較深入的酶，廣泛應(yīng)用于食品、工業(yè)、醫(yī)藥中。固定化是解決其易失活、熱穩(wěn)定性差等問題的有效方法，同時還能提高其對pH、溫度適應(yīng)性，并實現(xiàn)循環(huán)使用。
　　 本文選擇以介孔分子篩SBA-15為載體吸附固定木瓜蛋白酶。為了調(diào)控載體與木瓜蛋白酶之間的作用力的類型與強弱，對SBA-15進行改性，合成了載體NH2-SBA-15、SH-SBA-15、COOH-SBA-15、IL-SBA-15、酸化SBA-15和Al/SB

2、A-15。受靜電作用影響，pH=7時，固載能力SBA-15>IL-SBA-15，COOH-SBA-15>SBA-15>NH2-SBA-15。
　　 首次考察了合成羧基改性分子篩時使用的酸化處理步驟對固定酶的影響，并排除這一因素，孤立地考察了羧基對固定酶的貢獻。在不同pH條件下考察了SBA-15、IL-SBA-15、COOH-SBA-15和酸化SBA-15四種載體固定木瓜蛋白酶的能力，發(fā)現(xiàn)在酶的等電點時固載率不一定最大，COOH-

3、SBA-15在pH=8.75和9時對酶有強烈的吸附作用(固載量大于400 mg/g)。并通過動力學研究，得到了上述四種載體的吸附、脫附速率常數(shù)比值κ和單層飽和吸附量Q0。以水解酪蛋白反應(yīng)為探針，測試了固定化酶的活性。由于單層吸附有效地解決了多層吸附帶來的活性位點被掩蓋的問題，固定化酶的比活性大幅提高。而固定酶時的pH1值對于固定化酶的活性也是有影響的。相比于游離木瓜蛋白酶，以IL-SBA-15和COOH-SBA-15為載體的單層固定化酶