上海市售貝類中副溶血性弧菌污染調(diào)查及耐藥譜分析.pdf

1、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是一種革蘭氏陰性嗜鹽無芽孢多形態(tài)桿菌，它主要以魚、貝類等海產(chǎn)品為載體進(jìn)行傳播。食用由Vp污染的海產(chǎn)品可引起典型的胃腸炎癥狀。在我國沿海地區(qū)由Vp引發(fā)的食品安全事件已高居微生物性食物中毒的首位。抗生素常用于治療由該菌引起的疾病。然而，隨著抗生素的大量使用，細(xì)菌的耐藥性隨之增強(qiáng)，給臨床治療增添了困難。為此，了解上海市售貝類中Vp的污染狀況及其耐藥趨勢具有重要意義。本研究的主

2、要內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　(1)上海市售貝類中副溶血性弧菌的分離。從上海市4個行政轄區(qū)的超市或農(nóng)貿(mào)市場進(jìn)行為期一年的樣品采集，共采集貝類樣品140份。其中包括牡蠣、海蟶、花蛤、文蛤和扇貝。在國家標(biāo)準(zhǔn)檢測方法的基礎(chǔ)上，使用硫代硫酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂培養(yǎng)基和科瑪嘉弧菌培養(yǎng)基依次進(jìn)行Vp分離，初步篩選出176株Vp疑似菌株。
　　(2)副溶血性弧菌的鑒定及毒力基因篩查。采用生化實驗和PCR方法，對176株Vp疑似菌株進(jìn)行鑒

3、定。其中，生化鑒定采用商用試劑盒對Vp16項生理生化指標(biāo)進(jìn)行檢測；PCR鑒定則采用本課題組發(fā)掘并確認(rèn)的Vp特異性基因irgB進(jìn)行檢測，最終鑒定得到96株Vp。Vp毒力基因篩查結(jié)果顯示：tdh陽性菌株為2株(2.1%)，trh基因檢測結(jié)果均為陰性。
　　(3)副溶血性弧菌ERIC-PCR分型。對分離得到的96株食源性Vp進(jìn)行腸桿菌基因間重復(fù)序列PCR(ERIC-PCR)分型，結(jié)果顯示：當(dāng)相似度為75%時，96株Vp被分為21個類群。

4、表明上海市售貝類產(chǎn)品中Vp的類型具有復(fù)雜的多樣性。
　　(4)副溶血性弧菌耐藥譜篩查及耐藥基因擴(kuò)增。對鑒定為Vp的96株菌進(jìn)行耐藥譜篩查。依照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)最新標(biāo)準(zhǔn)M100-S22，運(yùn)用紙片擴(kuò)散法測定96株Vp對18種抗生素的藥物敏感情況。結(jié)果顯示：96株Vp食品分離株對抗生素氨芐西林的耐藥最強(qiáng)，達(dá)到87.5%；其次為頭孢唑林(31.3%)、頭孢噻吩(6.3%)、阿莫西林/克拉維酸(6.3%)、哌拉西林(6.