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文檔簡介
1、食源性致病菌是以食物為載體，導致人類發(fā)生疾病的細菌。針對傳統(tǒng)的細菌檢測方法，如生化培養(yǎng)、分離鑒定、免疫學技術(shù)等，操作繁瑣，需時長、特異性不強、靈敏度不高等問題，本研究在進行特異性引物設計后，建立起沙門氏菌(Salmonellasp.)、志賀氏菌(Shigellasp.)、銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、腸出血型大腸桿菌O157(EterohaemorrhagicEHEC)和副溶血弧菌(Vibriorahaem
2、olyticus)等5種致病菌的單重及多重PCR檢測技術(shù)，通過優(yōu)化測定條件，對10個屬的35株常見致病菌、條件致病菌和實驗室人工污染的飲用水、河水、池塘水等樣本進行檢測，這5種致病菌均有清晰、特異的預期條帶產(chǎn)生，并經(jīng)序列測定驗證同源性，表明本研究建立的反應體系及條件合適，篩選的引物高度特異。采用PCR技術(shù)對5種致病菌進行檢測，每個樣品所需時間為5～8h，單重PCR技術(shù)檢測靈敏度分別為：腸出血型大腸桿菌O157100cfu.mL-1、志賀
3、氏菌100cfu.mL-1、副溶血弧菌101cfu.mL-1、銅綠假單胞菌100cfu.mL-1、沙門氏菌101cfu.mL-1；多重PCR技術(shù)檢測靈敏度分別為：腸出血型大腸桿菌O157101cfu.mL-1、志賀氏菌102cfu.mL-1、副溶血弧菌102cfu.mL-1、銅綠假單胞菌102cfu.mL-1、沙門氏菌101cfu.mL-1。相對于傳統(tǒng)檢測方法，本研究極大地縮短了檢測時間，適用于大通量樣品的檢測研究。此外，本研究在建立了
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