《產(chǎn)淀粉酶菌的分離純化》實驗方案設(shè)計

1、產(chǎn)淀粉淀粉酶菌株的分離菌株的分離純化一、實驗實驗目的目的1.掌握產(chǎn)淀粉酶菌種的分離純化的原理和方法技術(shù)；2.鞏固十倍稀釋法。二、二、實驗實驗原理原理土壤是微生物生活的大本營，是尋找有重要應用潛力的微生物主要的菌源。因此本實驗選擇從土壤中分離出產(chǎn)淀粉酶菌種，再進行純培養(yǎng)。主要運用富集培養(yǎng)技術(shù)，稀釋涂布平板法和平板劃線分離法及無菌操作技術(shù)獲得我們所需要的產(chǎn)淀粉酶菌種。淀粉酶作用于淀粉時，打開了淀粉分子的糖苷鍵，從而使淀粉失去粘性，同時使其失

2、去了與碘的顯色反應能力，不再與碘結(jié)合，從而形成透明圈。產(chǎn)淀粉酶菌株在選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，會水解淀粉形成水解圈，加碘液染色后，水解圈尤為明顯。三、三、實驗實驗材料材料1.菌種：從自然界篩選獲得的淀粉酶產(chǎn)生菌種2.土壤樣品：從栽種土豆的菜園中采集土壤樣品3.培養(yǎng)基：淀粉液體培養(yǎng)基淀粉液體培養(yǎng)基（50mL）：蛋白胨0.5g，NaCl0.25g，牛肉膏0.25g，可溶性淀粉0.1g，蒸溜水50mL。淀粉淀粉瓊脂培養(yǎng)基脂培養(yǎng)基(200mL)：蛋白

3、胨2g，NaCl1g，牛肉膏1g，可溶性淀粉0.4g，蒸溜水200mL，瓊脂34g。牛肉膏蛋白牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基(200mL)：蛋白胨2g，牛肉膏0.6g，NaCl1g，瓊脂34g，蒸餾水200mL，pH7.07.2。4.其他用品：酒精燈、移液槍（20200uL）、接種環(huán)、試管架、三角涂布棒（各一個），電子天平、三角燒瓶（5個）、試管（10支）、培養(yǎng)皿（15個）、1mL移液管（10支）、10mL移液管(1支)、無菌水（200mL）

4、、微波爐、盧戈氏碘液。四、四、試驗試驗方法方法1樣品采集品采集用無菌報紙，在栽有土豆的菜園里，從不同的采樣點采取土樣約15g。（注意應采取距地表23cm以下的土樣）2富集培養(yǎng)富集培養(yǎng)取土樣10g，放入盛90mL無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振動20min，使土樣與水充分混合，使微生物分散開。用一支1mL的五、五、技術(shù)路線樣品采集富集培養(yǎng)（110rmin，37℃，24h）倒平板（淀粉瓊脂培養(yǎng)基12個）土壤稀釋液制備涂布培養(yǎng)（37℃，48