版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、耐酸性α-淀粉酶在低pH值的條件下,以隨機(jī)方式切斷淀粉分子內(nèi)的α-1,4糖苷鍵,生成低聚糖、麥芽糖和糊精等,由于其在酸性條件下的穩(wěn)定性,它在淀粉加工、釀造等行業(yè)的應(yīng)用比普通α-淀粉酶更有優(yōu)越性。隨著淀粉工業(yè)的發(fā)展,耐酸性α-淀粉酶的應(yīng)用越來越多,有極大的開發(fā)價值。本文對一株產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶的黑曲霉PZ301進(jìn)行了研究。
本實驗對產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶PZ301菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定,根據(jù)其菌落形態(tài)和產(chǎn)孢結(jié)構(gòu),真菌PZ301被鑒定
2、為黑曲霉(Aspergillus niger)。
研究了微波化學(xué)復(fù)合誘變對菌株P(guān)Z301的致死效應(yīng):NTG濃度為250μg/mL處理90min后,經(jīng)頻率2450HZ、輸出功率800W微波輻照30s時,PZ301孢子的致死率為86.6%,正突變率最高。在此條件下對菌株P(guān)Z301進(jìn)行2輪復(fù)合誘變,得到1株耐酸性α-淀粉酶活力較高的菌株,酶活力為1.985IU/mL,較出發(fā)菌株的酶活力提高了23%。
對菌株P(guān)Z30
3、1產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶固態(tài)發(fā)酵的條件進(jìn)行了摸索,實驗結(jié)果表明最佳的培養(yǎng)基組成為:麩皮7g,復(fù)合碳源(葡萄糖+淀粉(質(zhì)量比為1:4))0.28g,(NH4)2SO40.14g;最佳產(chǎn)酶的固態(tài)發(fā)酵條件:料水比為1∶2,接種量1mL(孢子濃度107個/mL),于35℃條件下發(fā)酵72小時,酶活力為40IU/g。比未優(yōu)化前的酶活力提高55%。
建立了核酸與菌絲體之間的定量關(guān)系,并以此為基礎(chǔ),測定了PZ301固態(tài)發(fā)酵中生物量的變化,得到
4、生長曲線。發(fā)現(xiàn)在優(yōu)化培養(yǎng)條件下,PZ301菌株的生物量和耐酸性α-淀粉酶在72h時均達(dá)到最高,表明耐酸性α-淀粉酶系同步合成型酶。
菌株P(guān)Z301固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)72h后,用5倍體積0.05mol/LpH4.2的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液浸提固態(tài)干曲,過濾、離心后得到粗酶液,用飽和度50-80%硫酸銨進(jìn)行分級沉淀,復(fù)溶、離心取上清液;用3%粉末活性碳對上清液進(jìn)行脫色,離心,對上清液進(jìn)行超濾(超濾膜為100kDa)。取超濾后大于1
5、00kDa以上組分在pH5.4條件下進(jìn)行SephadexDEAEA-50離子交換柱層析,收集有耐酸性α-淀粉酶活性的6號峰,除鹽濃縮后進(jìn)行TSK-GelG4000PWXL柱層析,PAGE電泳得到單一的條帶,并通過SDSPAGE電泳測定分子量,其分子量為58.74KDa。
對該酶的酶學(xué)性質(zhì)研究,實驗結(jié)果表明:粗酶的最適反應(yīng)溫度和pH值分別為50℃
和4.2,在pH2.2-8.0范圍酶的穩(wěn)定性較高,半失活溫度為65
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶菌株的篩選、發(fā)酵條件及酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf
- 產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶菌株的選育及發(fā)酵條件的初步研究.pdf
- 微生物發(fā)酵生產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶的研究.pdf
- 50635.耐酸性α淀粉酶產(chǎn)生菌株的選育和發(fā)酵產(chǎn)物初步分析
- 紅曲霉生淀粉酶發(fā)酵優(yōu)化、分離純化及其酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf
- 曲霉菌發(fā)酵淀粉酶的分離純化和生化性質(zhì)的研究.pdf
- 黑曲霉產(chǎn)果膠酶的分離純化和酶學(xué)特性研究.pdf
- 黑曲霉發(fā)酵生產(chǎn)α-淀粉酶微生物實驗報告
- 固體發(fā)酵黑曲霉產(chǎn)單寧酶的研究.pdf
- 米曲霉固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)蛋白酶的條件優(yōu)化及酶的性質(zhì)研究.pdf
- 黑曲霉產(chǎn)纖維素酶的分離純化及性質(zhì)研究.pdf
- 黑曲霉α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶的產(chǎn)酶條件、純化及其性質(zhì)研究.pdf
- 產(chǎn)底溫α-淀粉酶菌株的篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化及酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf
- 淀粉酶發(fā)酵條件的優(yōu)化2
- 產(chǎn)酸性α-淀粉酶菌株的篩選及其酶學(xué)的性質(zhì)研究.pdf
- 黑曲霉酸性α-淀粉酶基因的克隆及其在畢赤酵母中的表達(dá).pdf
- 《產(chǎn)淀粉酶菌的分離純化》實驗方案設(shè)計
- 纖溶菌固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化及酶的分離純化研究.pdf
- 紅曲霉發(fā)酵產(chǎn)酸性蛋白酶的研究.pdf
- 黑曲霉產(chǎn)糖化酶發(fā)酵工藝優(yōu)化及酶學(xué)特性研究.pdf
評論
0/150
提交評論