米曲霉產(chǎn)淀粉酶和纖維素酶的初步研究.pdf

1、分類號：Q“9密級：(秘密、機密、絕密)學校代碼：10057研究生學號：09813023米曲霉產(chǎn)淀粉酶和纖維素酶的初步研究PrimaryStudyontheAmylaseandCellulaseFermentedinAspergillusoryzae專業(yè)名稱：指導教師姓名：研究塵姓名：申請學位級別：論文提交F1期：論文課題來源：學位授予單位：營養(yǎng)與食品甲生學(醫(yī))曾小紅教授李吲吲醫(yī)學碩士2011年12月天津市重大科技支撐計劃天津科技大學

2、摘要米曲霉是醬油釀造的主要菌株，其產(chǎn)酶活性對于醬油釀造人曲的培養(yǎng)以及后期醬醪的發(fā)酵中發(fā)揮重要作用。Aspergillusoryzae3042是醬油釀造傳統(tǒng)的米曲霉菌株，因其具有酶活力較高，產(chǎn)孢子數(shù)較多等優(yōu)勢，一直在醬油釀造中廣泛應用。然而其酸性蛋白酶活力不高，不適應醬醪發(fā)酵后期pH較低的酸性環(huán)境，原料利用率偏低，影響醬油的風味與品質(zhì)。AspergillusoryzaeA100—8是本實驗室在醬油釀造傳統(tǒng)菌株Aoryzae3042的基礎上

3、，經(jīng)氮離子注入技術(shù)誘變，在以酪素蛋白為主的酸性培養(yǎng)條件下篩選出來。實驗室前期的實驗已經(jīng)證實，AoryzaeA1008相對于Aoryzae3042具有較高的蛋白酶活性。本文從淀粉酶和纖維素酶的角度，比較誘變菌株AoryzaeA100—8與傳統(tǒng)菌株Aoryzae3042的區(qū)別。通過兩株菌的小室培養(yǎng)，用熒光正置顯微鏡對各自的菌體形態(tài)進行觀察，發(fā)現(xiàn)AoryzaeA1008相對于Aoryzae3042的細胞壁更粗壯，橫隔密度更大；以碘熏法透明圈對

4、淀粉酶與纖維素酶活力進行初步比較，發(fā)現(xiàn)AoryzaeA100—8相對于Aoryzae3042的淀粉酶與纖維素酶透明圈與相應菌落的比值略大；對兩株菌在人曲培養(yǎng)下的淀粉酶與纖維素酶的酶活力進行測定，探究淀粉酶、纖維素酶的酶活力的影響因素以及兩者酶活力的大小；通過淀粉酶與纖維素酶相關主要基因的引物設計，采用半定量RTPCR的方法初步探究兩株菌的淀粉酶與纖維素酶基因相對表達水平與時fnJ的關系，以及兩株菌酶活力的差異。整體來說AoryzaeA1

5、00—8相對于Aoryzae3042具有較高的淀粉酶與纖維素酶活力；通過HS—SPME以及GC—MS對兩株菌基于大曲培養(yǎng)以及所釀造醬油中的揮發(fā)性風味物質(zhì)進行分析，通過氨基酸分析儀對其氨基酸的種類與水平進行分析；對大曲風味物質(zhì)分析表明AoryzaeA1008產(chǎn)生出更多的酮、醛、醇、酯、呋喃化合物以及氨基酸類，尤其是甜味與鮮味氨基酸類JxL味物質(zhì)，使大曲的風味更加芬芳、濃郁、協(xié)調(diào)；對醬油風味物質(zhì)的分析表明，除了醇、酯和酸三類風味物質(zhì)外，采用