降解PCL菌株的選育及其解聚酶的研究.pdf

1、聚己內(nèi)酯(poly caprolactone，PCL)是以石油為原料合成的一種可生物降解的脂肪族聚酯，在自然界中易被微生物或酶分解，最終產(chǎn)物為水和二氧化碳。目前，PCL作為一種新型的可生物降解高分子材料，在醫(yī)學(xué)、藥物、工業(yè)、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。 本項工作的目的是從自然界中篩選出可降解PCL的菌株，研究PCL降解菌株降解PCL的特性和降解規(guī)律，探討PCL解聚酶的生化特性及其降解過程，為PCL的應(yīng)用奠定理論和實踐基礎(chǔ)。

2、 本論文的主要結(jié)果如下： 1．對不同地區(qū)和生態(tài)環(huán)境下采集的數(shù)個樣品進行篩選分離，共獲得四株可降解PCL的菌株，分別為YD0401、YD0402、YD0403、YD0404。對其中一種真菌YD0401進行初步鑒定：YD0401菌株屬于半知菌綱，從梗孢目、從梗孢科、曲霉族、青霉屬。 2．以青霉(Penicillium sp)YD0401為出發(fā)菌株，通過紫外誘變分生孢子，采用透明圈初篩和搖瓶培養(yǎng)復(fù)篩的方法獲得2株能穩(wěn)定遺傳

3、的分泌PCL解聚酶的高產(chǎn)菌株YD0401-Ae和YD0401-Bc。 3．原始菌株對PCL膜的降解過程是緩慢降解-等速降解-快速降解；而YD0401-Ae及YD0401-Bc突變菌株對PCL膜的降解過程是緩慢降解-快速降解-緩慢降解。 4．測定原始菌株及突變株每日PCL解聚酶酶活時發(fā)現(xiàn)YD0401-Ae、YD0401-Bc突變株的酶活力比原始菌株要高，且有兩個產(chǎn)酶高峰，分別在48h和120h，其PCL解聚酶酶活力分別比原

4、始菌株提高32.1％、41.86％和35.8％、31.4％。 5．對原始菌株及YD0401-Ae突變株的PCL解聚酶粗酶液的基本性質(zhì)進行了對照研究。原始菌株及YD0401-Ae突變株的PCL解聚酶粗酶液最適反應(yīng)溫度均為20℃。原始菌株及YD0401-Ae突變株的最適反應(yīng)pH值為8.6。 6．質(zhì)譜儀測得酶降解PCL的產(chǎn)物均為單體，即ε-羥基己酸。 7．研究了PCL膜的生物降解過程，PCL膜的生物降解首先發(fā)生在PCL