高蛋白酶解及抗?fàn)I養(yǎng)因子降解菌株的誘變選育.pdf

1、隨著飼料業(yè)的發(fā)展，動(dòng)物性蛋白源的不斷枯竭與缺點(diǎn)日顯，人們開(kāi)始把目光投向其他蛋白源。豆粕，作為一種質(zhì)量穩(wěn)定的植物蛋白源，因其供應(yīng)充足，氨基酸組成合理，含有異黃酮、脂肪酸、礦物質(zhì)等生物活性物質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)成分，日漸受到人們的青睞。然而，豆粕卻有其自身的局限性:其一是，豆粕主要是由大分子蛋白構(gòu)成，不能像小分子蛋白——寡肽和游離氨基酸那樣被機(jī)體充分吸收。其二是，豆粕中含有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，特別是其中的胰蛋白酶抑制因子和植酸含量最高，二者均在2％左右，它

2、們不僅降低動(dòng)物機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用，也其影響健康。
　　 本研究分四步進(jìn)行:首先，以透明圈法和福林酚法測(cè)定蛋白酶活力擇優(yōu)選出一株酶活力高的出發(fā)菌株;其次，進(jìn)行紫外線誘變重在確定批量誘變的條件;再次，以蛋白酶活力、酸溶蛋白、游離氨基酸以及胰蛋白酶抑制因子和植酸含量為指標(biāo)，篩選出經(jīng)誘變可提高發(fā)酵豆粕中的小分子蛋白含量且降低抗?fàn)I養(yǎng)因子作用的優(yōu)良菌株并對(duì)其進(jìn)行鑒定;最后，對(duì)所獲的優(yōu)良菌株加以效能驗(yàn)證。研究成果如下:
　　 1.對(duì)

3、實(shí)驗(yàn)室保藏的5株產(chǎn)蛋白酶菌株，進(jìn)行產(chǎn)蛋白酶活力高低的對(duì)比，最后擇優(yōu)選擇一株酶活力較高的出發(fā)菌株。
　　 2.確定了紫外批量誘變的條件，即以30W紫外燈、照距15cm照射用稀釋梯度為10-7的菌液涂布后的平板30s，該法穩(wěn)定、可靠、重復(fù)性強(qiáng)。
　　 3.蛋白含量的測(cè)定，通過(guò)測(cè)菌株蛋白酶活力、發(fā)酵豆粕中的酸溶蛋白及游離氨基酸含量，篩選出了兩株菌JY14、JY15。兩株菌經(jīng)抗?fàn)I養(yǎng)因子含量的測(cè)定，即胰蛋白酶抑制因子及植酸含量，確