PCL解菌株的選育及其解聚酶的研究.pdf

1、聚己內(nèi)酯(PCL)是由ε-己內(nèi)酯開環(huán)聚合制得的熱塑性聚酯，由于PCL的熔點較低，熱穩(wěn)定性和水解穩(wěn)定性優(yōu)良，與多種聚合物的相容性很好等諸多優(yōu)點，與其他脂肪族聚酯相比有著廣闊的應(yīng)用前景。但是，目前對于PCL生物降解的研究還很少，本文的重點是從環(huán)境中篩選出一株可生物降解PCL的細(xì)菌菌株，將其編號為DS0801，通過菌落形態(tài)、生理生化指標(biāo)和16SrDNA技術(shù)對該菌株進行鑒定，并且使用蛋白分離純化手段對DS0801菌株的PCL胞外解聚酶進行了分離

2、純化，對酶學(xué)性質(zhì)進行了表征。主要實驗
　　結(jié)果如下:
　　1.PCL降解菌株的篩選鑒定。從環(huán)境污水中篩選出具有PCL降解能力的菌株，對菌種進行初步鑒定。通過菌落形態(tài)、生理生化指標(biāo)和16SrDNA技術(shù)確定該菌為銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）。
　　2.對PCL解聚酶進行分離純化，并對其解聚酶粗酶的性質(zhì)進行了探討。實驗證明，DS0801菌株的最佳發(fā)酵時間為36h，粗酶最適反應(yīng)溫度為40℃，最適

3、反應(yīng)pH值為8.0。
　　3.用電子顯微鏡觀察PCL膜的降解，在3d之內(nèi)，PCL膜表面變化不大;在降解5d后，PCL膜表面開始發(fā)生斷裂，表面發(fā)生嚴(yán)重侵蝕;降解7d時，PCL膜失重率接近于100％，膜樣品斷裂成碎片，基本上完全降解。
　　4.對粗酶的降解產(chǎn)物進行質(zhì)譜分析，PCL解聚酶粗酶的降解產(chǎn)物中有單體ε-己內(nèi)酯生成，失活的粗酶與PCL混合后沒有單體ε-己內(nèi)酯的出現(xiàn)，證明PCL解聚酶粗酶能夠降解PCL，并且將其降解成ε-己內(nèi)