降解PLA菌株的選育及相關(guān)研究.pdf

1、聚乳酸(PLA)是生物高分子材料中具有廣泛用途的代表，由于其具有等同于石油化工高分子的物性而又能被生物降解，不會引起環(huán)境污染，目前引起人們廣泛的關(guān)注。在醫(yī)學(xué)、生態(tài)學(xué)、紡織業(yè)和人類的日常生活中，PLA正發(fā)揮著越來越重要的作用。PLA具有高于160℃的熔點(diǎn)，透明度高，具有高強(qiáng)度和抗拉伸能力，目前正在取代石油化工塑料而成為新一代的環(huán)保生物塑料。 本論文重點(diǎn)在于證明微生物降解PLA的可行性。篩選出一株具有降解PLA能力的菌株，通過紫外誘

2、變獲得一株能高效降解PLA的突變株，分離、純化出PLA解聚酶，并對其進(jìn)行了初步的酶學(xué)性質(zhì)的研究。主要結(jié)果如下： 1．由撫順石油三廠排出的污泥中篩選出可降解PLA的一株細(xì)菌，經(jīng)初步鑒定屬固氮細(xì)菌屬(Azotobacter sp.)，編號為DS2004。以DS2004為出發(fā)菌株，通過紫外線誘變，采用搖瓶培養(yǎng)測定發(fā)酵液酶活力的復(fù)篩方法，獲得具有遺傳穩(wěn)定性的PLA降解菌株，編號為DS2004-a，測得該菌株的酶活高于原始出發(fā)菌株的16.

3、51％。 2．對DS2004-a菌株產(chǎn)生的PLA解聚酶進(jìn)行了分離、純化，并對其解聚酶的特性進(jìn)行了探討。純化倍數(shù)約為14.67，酶活力回收率10.47％，酶蛋白的相對分子質(zhì)量約為45.2kD。 3．該酶最適反應(yīng)溫度和pH分別為40℃和8.6。在溫度35℃以下和pH8.0～9.2范圍內(nèi)穩(wěn)定。金屬離子Ca<'2+>對PLA解聚酶有激活作用，而Cu<'2+>、Hg<'2+>、Zn<'2+>等金屬離子對此酶有抑制作用。質(zhì)譜儀測得酶