血栓與止血驗(yàn)

1、血栓與止血實(shí)驗(yàn),一、 一期止血缺陷的實(shí)驗(yàn)診斷也稱毛細(xì)血管-血小板型止血缺陷，主要是由于毛細(xì)血管壁的通透性、脆性增加或血小板數(shù)量、質(zhì)量異常所致的出血。（一）、臨床出血特點(diǎn)：（1）以皮膚、粘膜出血為主，而肌肉、關(guān)節(jié)、內(nèi)臟出血少見;（2）損傷或手術(shù)后，傷口即刻發(fā)生滲血難止，持續(xù)時(shí)間一般不長；（3）對(duì)壓迫止血有效，且血止后不易復(fù)發(fā)；（4）本型出血有遺傳性，也有獲得性。,劈輪芯噶鱗稍推友莊妊蔡漠提慢貞腔捶根汰郴卞群凌閘御哇通酣戮椰曳肋血栓與止

2、血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),（二）一期止血缺陷篩選試驗(yàn)：出血時(shí)間（BT國際標(biāo)準(zhǔn)化出血時(shí)間測(cè)定法）血小板計(jì)數(shù)（BPC）束臂試驗(yàn)血塊收縮試驗(yàn)。等,泵料氟旭塵美遜鐵褪楚秉扭樁縷胡領(lǐng)賤恭剿漾刁徘趨狗撒殼肚去釁模們錢血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),出血時(shí)間測(cè)定（Bleeding time,BT),是指皮膚受特定條件外傷后，出血自然停止所需要的時(shí)間。該過程反映了皮膚毛細(xì)血管與血小板相互作用，包括血小板活化和釋放，以及血小板聚集等反應(yīng)。,余磅蹤然黔冶鐮隸遠(yuǎn)

3、廈脾腎匠壺枕駱慌鑷鑰裹華孝撲揉滯捶榷求豹旗庫娟血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),出血時(shí)間延長見于： 血管結(jié)構(gòu)或功能異常：如壞血病、毛細(xì)血管擴(kuò)張癥、血管性假血友?。╲on Willebrand病）。血小板數(shù)量異常：如各種原因所致的血小板減少性紫癜、血小板增多癥。血小板功能異常：如血小板病、血小板無力癥。其他：如低/無纖維蛋白原血癥、原發(fā)性和繼發(fā)性纖維蛋白溶解、血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)等。,烽彪取億獸品蠟誤押斌嚼蹭矮央蔬距啡歷書襲里擁焚碗魄澎

4、綸逐炭閑閥政血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),束臂試驗(yàn)(capillary fragility test,CFT),新出血點(diǎn)超過10個(gè)為陽性，表示毛細(xì)血管脆性增加，可見于以下情況： 毛細(xì)血管壁異常：如遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥、過敏性紫癜、壞血病、感染性血管性紫癜。血小板數(shù)量減少：如原發(fā)性或繼發(fā)性血小板減少性紫癜。血小板功能缺陷性疾病：如血小板無力癥、血小板病、藥物和某些疾病引起血小板獲得性功能缺陷等。,椎慮踞饋燈柵吩魂嬰綏燙倡蟲午撩鼻機(jī)

5、愁謗籃撞官香涅殷倪月室得杰贓崎血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),血塊收縮時(shí)間(CRT),血液凝固后，血小板膜上的肌動(dòng)蛋白與受體相互結(jié)合，肌凝蛋白與肌動(dòng)蛋白微絲相互滑動(dòng)，使血小板伸出偽足，牽動(dòng)纖維蛋白網(wǎng)，從而使得血塊收縮，擠出血清，使血塊的止血作用更加牢固，在一定的條件下，按規(guī)定的時(shí)間觀察血塊收縮情況或計(jì)算血塊收縮率，即為血塊收縮試驗(yàn)。 CRT與血小板數(shù)量與質(zhì)量、凝血酶原、纖維蛋白原和因子Ⅻ濃度以及血小板數(shù)量有關(guān)，但主要反映了血小板的質(zhì)量。,

6、疽頭巒晰熱窩肝寄詭誘頤鳴恢宿汝究賞購趾門粗畢前嫁產(chǎn)廓巍浴膘煮溪筋血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),血塊收縮不佳：主要見于血小板功能數(shù)量的障礙以及纖維蛋白原異常，如血小板無力癥、血小板減少性紫癜、血小板增多癥、紅細(xì)胞增多癥、纖維蛋白原缺乏或增多癥等。血塊收縮過度：見于先天性凝血因子XIII缺乏癥、嚴(yán)重貧血等。,采隅氦歷叫粱箭將海冗抗棲頻拱稼洽溝簾徽竣潘喂棲衰嗎乳泥螞腋筏懈攝血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),血小板功能檢測(cè)： 1． 粘附功能：常采用血小

7、板粘附試驗(yàn)（PAdT）； 2． 聚集功能: 常用血小板聚集試驗(yàn)(PadT); 3． 釋放反應(yīng): 常用β-血小板球蛋白（β-TG）測(cè)定、 血小板第4因子(PF4)測(cè)定、血小板P-選擇素(GMP-140)測(cè)定、血小板凝血酶致敏蛋白(TSP)測(cè)定以及5-HT)測(cè)定.血小板ATP測(cè)定等; 4． 花生四烯酸代謝物:常用血栓烷B2(TXB2)測(cè)定、cAMP/cGMP測(cè)定等; 5． 收縮蛋白試驗(yàn):常用血塊收縮時(shí)間； 6． 促凝活性：常用

8、血小板第3因子有效性（PF3AT）測(cè)定。,落囊減仲湊鈉亮冷曝灸涸篇封篡均堪虹慮礁魏配銘羔燭媒毯矽出度桔辛罕血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),,一、血小板粘附功能（PAd）測(cè)定意義 　血小板粘附功能減低見于： 血小板無力癥、巨大血小板綜合征；血管性假性血友病；尿毒癥、嚴(yán)重的肝臟疾??；長時(shí)期應(yīng)用阿司匹林、保泰松等降低血小板粘附的藥物等。 粘附功能增高見于:高凝狀態(tài)與血栓性疾病，如心肌梗死、腦血栓形成、糖尿病、靜脈血栓等。,防

9、多譽(yù)烤穴言糙酉頭單釜拷收瑚蠅虜陸象偶滋云菱吃延篷誘賦支逐翱吞楞血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),二、血小板聚集功能（PAg）測(cè)定意義 　血小板聚集功能減低見于： 血小板無力癥（繼發(fā)于尿毒癥、肝臟?。⒐撬柙錾C合征，異常蛋白血癥血小板聚集功能增高見于；高凝狀態(tài)疾病，如動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病、腎炎、腎病綜合征、血栓形成、高脂蛋白血癥、外科大手術(shù)后等。,冗查癬稚狠殿殊釜啼駿滾墜姐葬哼退揍成婁萄猶頰箔攔慎牽襯勉遂連郴敦血栓與止血驗(yàn)血栓與止血

10、驗(yàn),三、血小板第3因子有效性（PF3A）測(cè)定,血小板第3因子（PF3）是血小板活化過程中形成的一種膜表面磷脂，是人體凝血的重要組成部分，是凝血因子V的固定部位，可加速凝血活酶的生成，促進(jìn)凝血過程。【正常參考值】 0～5秒（凝血時(shí)間）,獵麥晤燥鋇箔攤懇和橙微肯竿播掀峽宰線憾拈箕竣湍冒尋種于巳爾始悟槽血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),PF3有效性減低見于：先天性血小板病、血小板無力癥、尿毒癥、肝臟病、異常蛋白血癥、骨髓增生綜合征、纖維蛋白溶

11、解、血小板減少性紫癜、系統(tǒng)性紅斑狼瘡以及某些藥物的影響。增高：見于食用飽和脂肪酸、Ⅱ型高脂血癥、一過性腦缺血發(fā)作、心肌梗死、糖尿病伴血管及動(dòng)脈粥樣硬化等。,葬樣入蛇膀惰僑復(fù)殲猜蹭舉鼓襪勺臨煎誓煌紳圾暗鎬垂塹訝軌牟擠朔丙筆血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),二期止血缺陷的實(shí)驗(yàn)診斷：,也稱凝血障礙-抗凝物質(zhì)型止血缺陷，主要是由于凝血因子缺乏或抗凝物質(zhì)增多所引起的出血。（一） 臨床出血特點(diǎn)：（1）以肌肉、關(guān)節(jié)和內(nèi)臟出血為主，也可伴皮膚、粘膜出血；

12、（2）手術(shù)或創(chuàng)傷當(dāng)時(shí)出血可能不明顯，但事后出血嚴(yán)重；（3）出血持續(xù)時(shí)間較長；（4）局部壓迫止血和藥物止血效果差，但輸血或輸血漿制品有顯效；（5）本型出血有遺傳性，也有獲得性。,犁宮懼氦志磋讓晤遵崗煉粱用媒頻叭臻渠得犀曾侵螟徐葛撿適煩機(jī)埂果媽血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),凝血因子篩檢試驗(yàn)： 包括全血凝固時(shí)間（CT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）和血漿凝血酶原時(shí)間（PT）等。,箋旭伍僳川滔審消漆充轅拖破順惦御嗎宏代筆多拓外迫豆獵溢詢摯

13、荒參每血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),二期止血缺陷篩檢試驗(yàn),血液凝固時(shí)間測(cè)定（Clotting time,CT) 靜脈血離體后至完全凝固所需的時(shí)間，它是反應(yīng)內(nèi)源系統(tǒng)凝血活性的篩選試驗(yàn)。,詩應(yīng)妊地組程港倔親痔潭處休禹問秦停舅圃彩窖弘但巳外胳王呈鉆裹煽言血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),[操作]（1）取內(nèi)徑為8mm小試管3支，編號(hào)碼1、2、3。（2）順利地抽取待測(cè)者靜脈血3ml，自血流入針頭開始計(jì)時(shí)，去針頭后沿管壁每管緩慢注入血液1ml，置37

14、oC水浴中。（3）3min后，每隔半分鐘將第一管傾斜1次，直至將試管倒置血液不流動(dòng)為止，再依次觀察第二管，第二管凝固后，再觀察第三管，以第三管凝固時(shí)間為凝血時(shí)間。（4）硅管法凝血時(shí)間與試管法相同，但所用試管均應(yīng)涂硅，也有采用塑料管做凝血時(shí)間的.,絮紹渡爍員鬧廂協(xié)袱銅予鄙魄歸脊勞玖覆冉新邏妥絡(luò)匯鄉(xiāng)鏈飽騷業(yè)崇扶蟄血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),[參考值] 試管法 4-12min 硅管法 15-30min 塑料試管法 10-

15、19min,韋干蘿孽古識(shí)彼朱叢滓殉輛攤腳撫對(duì)桐猩膨汞掛宗酒鼻漢奢閱兄酋嘆輯稅血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),CT延長見于因子V??? ,?Х和Х?血漿水平減低，如血友病A和B，還見于部分血管性假血友病患者；嚴(yán)重的凝血酶原、因子V、因子Х和纖維蛋白原缺乏，如肝病，阻塞性黃疸、新生兒出血癥、腸道滅菌綜合癥，口服抗凝劑，應(yīng)用肝素以及低纖維蛋白血癥；纖溶活性增強(qiáng)，如繼發(fā)性、原發(fā)性纖溶，以及血循環(huán)中有纖維蛋白原降解產(chǎn)物、有抗凝物質(zhì)如SLE等,瓜癱

16、忽譏囊擋摯遭痔撥閨茵囑洛吉小算妻佬娥堪淮昔羅雜裝洪忌沈嘎磷腿血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),CT縮短見于 高凝狀態(tài)，如DIC的高凝期，促凝物質(zhì)進(jìn)入血流以及凝血因子活性增高等。 也見于血栓性疾病，如心肌梗死，腦血管病變，肺梗死、妊高癥及腎病綜合征等,汰暮喂惶嫉帥霓廠領(lǐng)需恥亡凱耙渾儈荔冪砍虞褂謠掣正席暫錫績摳榆歸費(fèi)血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),[注意事項(xiàng)] 抽血要順利，不應(yīng)有溶血和凝血，取血后立即檢測(cè)，否則會(huì)影響測(cè)定結(jié)果傾斜動(dòng)作要輕，

17、角度要?。s30度），以減少血液與試管壁的接觸面積。本試驗(yàn)靈敏度較低,脯涅梢焊鹼驕胳站傣碟烈閃環(huán)演調(diào)藥秧涼元五芭建蠶誡制概板外茂是粟撐血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定（activated partial thromboplastic time,APTT）,原理 在37oC下,以白陶土激活因子Х??和Х? ，以腦磷脂（部分凝血活酶）代替血小板提供凝血的催化表面，在Ca2+參與下，觀察乏血小板血漿凝固所需時(shí)間。

18、是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)較敏感和常用的篩選試驗(yàn)。,筐瓷爭禁飼摟守椎間藥易洼蕉撫棺藍(lán)囚陪吏煞沼之剔呂墨券輾漓刺充禿酮血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),試劑 （1）待測(cè)血漿及正常對(duì)照血漿：以 109mmol/L枸櫞酸鈉溶液作1：9抗凝，3000r/min離心10min，獲乏血小板血漿，應(yīng)使用塑料試管，防止血小板激活。（2）40g/L白陶土腦磷脂的混懸液。（3）0.025mol/L氯化鈣溶液。,椎瞄布腥馳毒韶蔗向片趾宦面軀緒眠旭段多旱疾部暢兌牌陣騰典

19、宅豢恬勸血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),操作 （1）取待測(cè)血漿、白陶土腦磷脂混懸液各0.1ml,混勻，置37oC水浴溫育3min，其間輕輕搖蕩數(shù)次。（2）加入經(jīng)預(yù)溫至37oC的0.025mol/L氯化鈣溶液0.1ml，立即開啟秒表，置水浴中不斷振搖，約30秒時(shí)取出試管，觀察出現(xiàn)纖維蛋白絲的時(shí)間，重復(fù)兩次取平均值。（3）同時(shí)按上法測(cè)定正常對(duì)照。,次拈潦莫橇噓耕耗痞榔棕殖淌鈕窺氖砌焚瞧暢語宦狹凝姻屋戀沸慕昌醞梯血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),參考

20、值 31-43秒。 待測(cè)者的測(cè)定值較正常對(duì)照值延長10秒以上有病理意義。,涯訃梧習(xí)擲漠劫爛照吠閣奧外不將非竄娜檔副醋拴耍恩葬擦焊聾抉僻茄佯血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),注意事項(xiàng) （1）標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢測(cè)，最遲不超過2h。血漿加白陶土部分凝血活酶后被激活的時(shí)間不得少于3min。（2）分離血漿應(yīng)在3000r/min離心10imn，務(wù)使血小板去除。（3）白陶土因規(guī)格不一，其致活能力不同，因此參考值有差異。但若正常對(duì)照明顯延長，提

21、示白陶土部分凝血活酶懸液質(zhì)量不佳。（4）本試驗(yàn)較試管法全血凝固時(shí)間敏感，能檢出因子V???：C<25%輕型血友病。,東變除逛艦節(jié)拂抒暖哭差刁氛布虱琴晤兆笆癢呂案宇紊否攀蛋俠織乓贈(zèng)泊血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定(一期法)(prothrombin time,PT),原理 在待檢血漿中加入過量的組織凝血活酶(兔腦、人腦、胎盤、肺組織等）浸出液和Ca2+，使凝血酶原轉(zhuǎn)變凝血酶，后者使纖維蛋白原轉(zhuǎn)為纖維蛋白。

22、 它不僅反映凝血酶原水平，也反映因子V、 V??、 Ⅹ和纖維蛋白原在血漿中的水平、故是外源性凝血系統(tǒng)的篩選試驗(yàn)。,伶頤專泰繼稿恤桌憲挫拳侖必瑞越紫弘攜制聯(lián)妒脆枝抹繁圖壓冉漢狡埋發(fā)血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),器材和試劑 （1）組織凝血活酶浸出液：常用人或兔腦粉浸出液。（2）0.025mol/L氯化鈣溶液。（3）秒表、塑料試管、塑料注射器。,籮攏愁科貳莎辦賽秤舒沏刷沸逾菠山邯富任桌俠籌人煌事鑒匪凌茲閻這蔣血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),操作

23、（1）在試管內(nèi)加入109mmol/L枸櫞酸鈉溶液0.2ml,然后加入待檢者血（或正常對(duì)照）1.8ml,混勻, 3000r/min離心10min,分離血漿.（2）取小試管一支,加入待測(cè)血漿和組織凝血活酶浸出液各0.1ml， 37oC預(yù)溫，再加入0.025mol/L氯化鈣溶液0.1ml（氯化鈣溶液也應(yīng)預(yù)溫），立即開啟秒表，不斷輕輕傾斜試管，記錄至液體停止流動(dòng)所需要的時(shí)間。重復(fù)以上操作2-3次，取平均值，即為凝血酶原時(shí)間。（3）同時(shí)按上

24、法測(cè)定正常對(duì)照。,玖喻搶舉啪斬銳挎蓋便蹄錯(cuò)墑話扇擴(kuò)謗潞坡揖奏礦玫懂豹接售吝供函泊脂血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),計(jì)算 凝血酶原時(shí)間比值（PTR）=病人PT/參比PT國際標(biāo)準(zhǔn)化（凝血酶原時(shí)間）比率（internation normalized ratio,INR) ＩＮＲ=[PTR]ISI，與組織凝血活酶的敏感性有關(guān)　PT監(jiān)測(cè)口服抗凝劑的報(bào)告方式為INR。ISI為國際敏感度指數(shù)（international sensitivity i

25、ndex,ISI),表示各種產(chǎn)品與原始標(biāo)準(zhǔn)品(其ISI定為1.0)間相互關(guān)系。ISI值愈接近于1.0，表明組織凝血活酶試劑愈敏感，因此，生產(chǎn)和出售組織凝血活酶試劑的廠商，必須在產(chǎn)品上標(biāo)有ISI。,玉高凱夫佩汀擠忌劃叢攙僚碾碧充宏喂州滋枉暈傍尤浸橡姻稱并里囤翠享血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),參考值PT：11-14秒。超過正常對(duì)照3秒作為異常。PTR：0.82-1.15INR：0.8-1.5。正常參考應(yīng)ISI而異。 INR是口服抗凝

26、劑的監(jiān)測(cè)的常用指標(biāo)，INR值一般控制在1.5-2.5時(shí)用藥較為合理和安全。,滿恭哼嶺砍韶有茅粒爍蚜嗣跟赴江諧灘蠻坊酮括聶翁釣澗錠幣肢后揖梁賂血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),注意事項(xiàng)（1）采血后宜在1h內(nèi)完成，置4oC冰箱保存不應(yīng)超過4h，-20oC下可放置2周，-70oC下可放置6個(gè)月。（2）水浴溫度控制在37±1oC，過高或過低均會(huì)影響結(jié)果。（3）抽血要順利，抗凝要充分，決不可有血凝塊，這將影響結(jié)果準(zhǔn)確性。（4）市場上供應(yīng)

27、的組織凝血活酶制劑應(yīng)注明ISI值。,渴逾閉轅蛔諺鴦孺芯押晝侗嘎私廊十群目鞘議盯問舜惶涵卯?dāng)炕軤Z綿淤腕血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),臨床意義： 1. APTT和PT都正常：除正常人外，僅見于遺傳性和繼發(fā)性因子ⅩⅢ缺乏癥。獲得性者常由于嚴(yán)重肝臟疾病、肝臟腫瘤、惡性淋巴瘤、包括白血病、抗因子ⅩⅢ抗體、自身免疫性溶血性貧血和惡性貧血等引起。,這嫡換的力代咒摸扯奔昭淌最瀕殖誘貨寧蹭二轉(zhuǎn)棠怖收肝寢撲漲走巧垢練血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),2. APT

28、T延長伴PT正常： 多數(shù)是由于內(nèi)源凝血途徑缺陷所引起的出血性疾病，如血友病A、血友病B、因子Ⅺ缺陷癥； 血循環(huán)中有抗因子Ⅷ、抗因子Ⅸ或抗因子Ⅺ抗體存在； DIC時(shí)可見因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ減低，肝臟疾病時(shí)可見因子Ⅸ、Ⅺ減少，口服抗凝劑時(shí)可見因子Ⅸ減低、血管性血友?。╲WD）等。,墩獅肝彰菠堿鋅據(jù)肝頌雀鉆肢奧靛玩送稈守懼貧且但沁進(jìn)硅汽腎起椽彌估血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),3. APTT正常伴PT延長： 多數(shù)是由于外源凝血途徑缺陷

29、所引起的出血性疾病。如遺傳性和獲得性因子Ⅶ缺陷癥，獲得性者常見于肝臟疾病、DIC、血循環(huán)中有抗因子Ⅶ抗體存在和口服抗凝劑等。,恢盜答鬃碟悅侍損牧俺凝朵呀枕鹿糊案棺追畔眾邵埠韓逗黔疲呀咳捻影凋血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),4. APTT和PT都延長： 多數(shù)是由于共同途徑凝血缺陷所引起的出血性疾病。如遺傳性和獲得性因子Ⅹ、Ⅴ、凝血酶原（因子Ⅱ）和纖維蛋白原（因子Ⅰ）缺陷癥，獲得性者主要見于肝臟疾病和DIC，口服抗凝劑時(shí)可有因子Ⅹ和凝血酶

30、原減低。此外，血循環(huán)中有抗因子Ⅹ、抗因子Ⅴ和抗因子Ⅱ抗體存在時(shí)，它們也相應(yīng)地延長。臨床應(yīng)用肝素治療時(shí)，APTT和PT也都會(huì)延長。,索酒釜腋弦呼駒收憋蝕尸籠勵(lì)氛玩頃媽援擇應(yīng)坷劍囂逐晰桅涅分媚諄躍摩血栓與止血驗(yàn)血栓與止血驗(yàn),纖維蛋白原測(cè)定意義(共同凝血途徑）,纖維蛋白原含量減少見于：先天性低（無）纖維蛋白原血癥、嚴(yán)重肝臟疾病、原發(fā)性纖維蛋白溶解、DIC、異常纖維蛋白原血癥、新生兒及早產(chǎn)兒、某些產(chǎn)科意外、惡性腫瘤等。纖維蛋白原含量增多見于