病毒免疫

1、病 毒 免 疫,現(xiàn)代免疫學(xué)（Immunology)認(rèn)為，機(jī)體識別自我(self)和非我(nonself)的物質(zhì)，通過免疫應(yīng)答(immune response)以排除非我，維持自身穩(wěn)定性的生物學(xué)功能即為免疫。機(jī)體的免疫系統(tǒng)通過免疫應(yīng)答反應(yīng)，承擔(dān)著三大基本功能：免疫防護(hù)，免疫自穩(wěn)和免疫監(jiān)視。近年來抗病毒免疫又引起了免疫學(xué)領(lǐng)域的廣泛關(guān)注和重視并成為新的研究熱點(diǎn)，這一方面是因?yàn)楸M管已經(jīng)消滅了天花且即將消滅脊髓灰質(zhì)炎等病毒，但病毒感染引起

2、的疾病仍然具有很高的發(fā)病率和死亡率。另一方面，在過去的二十多年中，又出現(xiàn)了幾種對人類具有極大危害的新的病毒(HIV)，埃博拉病毒(Ebola viru)以及漢坦病毒(Hantavirus)等，尤其是艾滋病病毒和肝炎病毒等的流行以給人類健康帶來了極大的危害?？共《久庖哐芯坎粌H有助于病毒感染性疾病的診斷和治療，還可為研究新的抗病毒疫苗提供試驗(yàn)和理論依據(jù)。,AIDS Virus,Ebola viru,Hantavirus,肝 炎 病 毒,,6

3、,目錄CONTENTS,,第一節(jié) 抗病毒免疫的細(xì)胞和分子機(jī)制免疫系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)和功能病毒感染的過程和免疫學(xué)特征抗病毒感染的免疫學(xué)機(jī)制第二節(jié) 病毒免疫逃逸的機(jī)制限制病毒基因的表達(dá)感染免疫特赦部位逃避抗體的識別逃避T細(xì)胞的識別抑制細(xì)胞表面免疫分子的表達(dá)阻礙抗原提呈干擾細(xì)胞因子和趨化因子的作用免疫耐受,第一節(jié) 抗病毒免疫的細(xì)胞和分子機(jī)制,一.免疫系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)和功能1.免疫系統(tǒng)的組成2.免疫應(yīng)答的類型和基本過程

4、二.病毒感染的過程和免疫學(xué)特征三.抗病毒感染的免疫學(xué)機(jī)制1.非特異性抗病毒免疫2.特異性抗病毒免疫3.抗病毒免疫調(diào)節(jié)4.抗病毒免疫記憶,1.免 疫 系 統(tǒng) 的 組 成,免疫系統(tǒng)(immune system)是人及動物體內(nèi)行使抗微生物和病毒免疫功能的生理結(jié)構(gòu)，是由生物體長期進(jìn)化發(fā)展生成的，由免疫器官，免疫細(xì)胞和免疫分子組成。,免 疫 器 官,免疫器官分為中樞免疫器官和外周免疫器官，中樞免疫器官包括骨髓，胸腺以及禽類的腔

5、上囊。外周免疫器官包括淋巴結(jié)，脾臟，扁桃體和一些廣泛分布的粘膜相關(guān)淋巴組織與皮膚相關(guān)淋巴組織等，是淋巴細(xì)胞及其他免疫細(xì)胞定居的場所，成熟的免疫細(xì)胞就在這里執(zhí)行其免疫應(yīng)答功能。,免 疫 器 官,中樞免疫器官還包括禽類的腔上囊。,免 疫 細(xì) 胞,從功能角度來看，機(jī)體的免疫功能是在免疫細(xì)胞和免疫分子協(xié)同作用下完成的。參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答相關(guān)的細(xì)胞通稱為免疫細(xì)胞(immunocyte)根據(jù)其功能可分為淋巴細(xì)胞，抗原提呈細(xì)胞以及粒細(xì)胞和其他免

6、疫細(xì)胞三類。,免 疫 細(xì) 胞 的 分 化,免 疫 分 子,免疫分子是免疫球蛋白IgG抗體（富含脯氨酸的多肽（PRP）占22%，乳清蛋白、溶菌酶……等物質(zhì)），抗病毒、細(xì)菌，中和毒素，促進(jìn)腸道有益菌的生長，達(dá)到腸道內(nèi)的菌群平衡，從而提高人體的抗病能力。免疫細(xì)胞發(fā)揮抗病毒免疫的分子基礎(chǔ)是其表達(dá)的多種膜表面分子包括各類受體，MHC分子，粘附分子等，以及分泌的多種可溶性分子包括抗體，補(bǔ)體以及細(xì)胞因子等。隨著研究的深入，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了更多的免疫分子參

7、與了機(jī)體的抗病毒免疫過程。,MHC 分 子,MHC代表個體特異性的同種異型抗原稱移植抗原或組織相容性抗原，其中能引起強(qiáng)而迅速排斥反應(yīng)的抗原稱主要組織相容性抗原.在不同種屬或同種不同系別的個體間進(jìn)行組織移植時(shí)，會出現(xiàn)排斥反應(yīng)，其本質(zhì)是細(xì)胞表面的同種異型抗原誘導(dǎo)的一種免疫應(yīng)答。,2.免疫應(yīng)答的類型和基本過程,廣義的免疫應(yīng)答(immune response)包括非特異性免疫應(yīng)答和特異性免疫應(yīng)答，兩者相互補(bǔ)充，共同完成排除異己的物質(zhì)，維持機(jī)體

8、自身生理平衡和穩(wěn)定的功能。非特異性免疫由機(jī)體的生理屏障，吞噬細(xì)胞，組織和體液中的抗微生物因子組成。人體的生理屏障包括皮膚及粘膜屏障，血-腦脊液屏障，胎盤屏障，血眼屏障等。免疫應(yīng)答通常指特異性免疫應(yīng)答，是指抗原刺激機(jī)體后機(jī)體發(fā)生應(yīng)答并產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細(xì)胞，以及抗體或致敏淋巴細(xì)胞與與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合并銷毀抗原的全過程。免疫應(yīng)答分為三個階段：一是感應(yīng)階段(inductive stage)，是指抗原刺激機(jī)體，免疫細(xì)胞識別，加工和傳

9、遞抗原信息的階段；其次是增值和分化階段(proliferative and differentiative stage),指免疫活性細(xì)胞相互作用，分化增值和產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細(xì)胞的階段。最后是效應(yīng)階段(effective stage),即指免疫效應(yīng)物質(zhì)（抗體或致敏淋巴細(xì)胞）分布到抗原所在部位與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合并銷毀抗原的階段。,特 異 性 免 疫 應(yīng) 答,根據(jù)特異性免疫應(yīng)答的特點(diǎn)，可將其分為兩種類型：B細(xì)胞介導(dǎo)的特異性體液免疫和

10、T細(xì)胞介導(dǎo)的特異性細(xì)胞免疫，前者產(chǎn)生的主要效應(yīng)物質(zhì)是抗體，后者產(chǎn)生致敏淋巴細(xì)胞發(fā)揮效應(yīng)功能。,二.病毒感染的過程和免疫學(xué)特征,病毒在宿主體內(nèi)的繁殖及在宿主之間的散播一般需經(jīng)過以下環(huán)節(jié)：首先必須有效地進(jìn)入宿主體內(nèi)并復(fù)制和擴(kuò)散，然后釋放至體外，再感染新的宿主。在此過程中，不同病毒所誘導(dǎo)的抗病毒免疫反應(yīng)的類型及機(jī)制也不同。病毒感染的第一步是進(jìn)入宿主，進(jìn)入的部位主要是皮膚，尿道，結(jié)膜，呼吸道和消化道等。進(jìn)入機(jī)體后，部分病毒的感染僅局限于進(jìn)入

11、的部位，另有一些則擴(kuò)散至全身，病毒在體內(nèi)的感染部位對于抗病毒免疫的產(chǎn)生有重要影響。一般說來，局部感染誘導(dǎo)機(jī)體所產(chǎn)生的免疫保護(hù)作用持續(xù)時(shí)間較短，而全身感染后機(jī)體產(chǎn)生的免疫保護(hù)作用持續(xù)時(shí)間大大延長。,三.抗病毒感染的免疫學(xué)機(jī)制,機(jī)體的抗病毒免疫反應(yīng)可分為非特異性免疫（天然免疫）和特異性免疫（獲得性免疫）兩類，非特異性免疫主要由前文所介紹的機(jī)體的一些生理屏障，吞噬細(xì)胞，NK細(xì)胞以及組織和體液中的抗病毒因子構(gòu)成；特異性免疫則是個體出生后，在生活

12、過程中感染病毒或接種疫苗而獲得的免疫力。這兩種抗病毒免疫分別在病毒感染的不同時(shí)期發(fā)揮著不同的作用。,（一）非特異性病毒免疫,多種免疫細(xì)胞（除T細(xì)胞及B細(xì)胞以外）參與了機(jī)體的非特異性抗病毒免疫，由這些細(xì)胞和其他免疫組織來源的細(xì)胞所產(chǎn)生的一些可溶性因子也在此過程中發(fā)揮著重要作用。非特異性免疫在病毒感染的早期發(fā)揮抗病毒效應(yīng)，能抑制早期感染的細(xì)胞內(nèi)病毒的復(fù)制，溶解這些細(xì)胞并阻止病毒進(jìn)一步感染其他細(xì)胞。,1.參與非特異性抗病毒免疫的細(xì)胞,(1)N

13、K細(xì)胞：NK細(xì)胞體積較大，胞漿富含嗜苯胺藍(lán)顆粒，故又稱為大顆粒淋巴細(xì)胞。NK細(xì)胞表達(dá)的CD56和CD16是其特征性的表面標(biāo)志。作為一種淋巴細(xì)胞，NK細(xì)胞因其對于某些敏感的腫瘤細(xì)胞具有明顯的殺傷活性而被發(fā)現(xiàn)的。,ADCC 效應(yīng)中文名稱是“抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用”(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity)。是指抗原在和抗體結(jié)合后，由于帶有了表面標(biāo)記，而引發(fā)具有細(xì)胞 毒性作用的細(xì)胞的

14、攻擊，進(jìn)而清除抗原。 　　當(dāng)IgG抗體通過Fab段與靶細(xì)胞表面抗原決定簇特異性結(jié)合后，其Fc段可與NK細(xì)胞表面FcγRIII結(jié)合，從而使NK細(xì)胞對靶細(xì)胞產(chǎn)生非特異性殺傷作用，即ADCC作用。,參與非特異性抗病毒免疫的細(xì)胞,(2)巨噬細(xì)胞:巨噬細(xì)胞在機(jī)體防御病毒感染的過程中具有一定的作用，但有時(shí)也介導(dǎo)了某些病毒在體內(nèi)的擴(kuò)散，因?yàn)榫奘杉?xì)胞能攜帶病毒至機(jī)體的各個部位（包括大腦）。有趣的是隨著年齡的增加，機(jī)體的抗病毒能力也增強(qiáng)，這與巨噬細(xì)胞的抗

15、病毒功能的增強(qiáng)有密切關(guān)系，如從低齡鼠體內(nèi)分離的巨噬細(xì)胞較從曾感染過多種病毒的高齡鼠體內(nèi)分離的巨噬細(xì)胞對病毒更易感，從臍帶血分離的人巨噬細(xì)胞也較成年人巨噬細(xì)胞對于病毒（HIV）更易感。,2.在非特異抗病毒免疫過程中發(fā)揮重要作用的分子,(1)細(xì)胞因子：細(xì)胞因子是重要的抗病毒分子，不同的細(xì)胞因子的功能和作用機(jī)制均不同。多種細(xì)胞如單核細(xì)胞，NK細(xì)胞，病毒感染或活化的成纖維細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞等均能產(chǎn)生參與非特異性免疫的多種細(xì)胞因子，包括IFN-α，I

16、FN-β，IFN-γ，TNF,IL-12，IL-1α，IL-1β，IL-6，IL-10，IL-15，IGIF，TGF-β等，這些細(xì)胞因子多在病毒感染的早期產(chǎn)生，參與了非特異性抗病毒免疫過程。病毒之所以能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生這些細(xì)胞因子以增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，是因?yàn)椴《颈旧頁碛信c宿主不同的特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)成分。(2)趨化因子：趨化因子是一類能夠吸引免疫細(xì)胞發(fā)生定向運(yùn)動的小分子蛋白質(zhì)，病毒等病源微生物進(jìn)入組織后能通過趨化因子促使吞噬細(xì)胞向病原體入侵部

17、位或炎癥部位運(yùn)動。,（二）特異性病毒免疫,在抗原特異性抗病毒免疫過程中發(fā)揮主要作用的是抗體和T細(xì)胞?？贵w能識別游離的病毒和病毒感染的細(xì)胞，能中和病毒，也能通過補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用或ADCC效應(yīng)殺傷病毒感染的細(xì)胞。在此過程中，識別的主要病毒蛋白是表面糖蛋白或外殼蛋白。T細(xì)胞對病毒的識別與抗體單獨(dú)識別病毒蛋白不同，它需要同時(shí)識別病毒抗原和MHC分子，抗原特異性TCR能識別與MHC分子結(jié)合的病毒抗原肽，但卻不能識別游離的病毒，這就使其作用局

18、限于只能殺傷病毒感染的細(xì)胞?？贵w和T細(xì)胞在體內(nèi)發(fā)揮著不同的抗病毒功能：抗體能清除游離的病毒而T細(xì)胞則可殺傷病毒感染的細(xì)胞。,特異性病毒免疫,特異性體液抗病毒免疫：病毒特異性抗體的主要作用在于預(yù)防病毒的再次感染以及防止病毒擴(kuò)散。如果在病毒進(jìn)入機(jī)體的部位有足夠的中和抗體（如粘膜部位的IgA），病毒感染在此階段就能被阻斷。如果病毒進(jìn)入了體內(nèi)，血清中的特異性抗病毒IgG也能組織病毒的擴(kuò)散。特異性細(xì)胞抗病毒免疫：盡管病毒感染時(shí)體內(nèi)CD4+T細(xì)

19、胞反應(yīng)的程度CD8+T細(xì)胞弱，但兩者在體內(nèi)的生物學(xué)過程很相似，都經(jīng)歷三個階段：活化和增殖期（感染的第一期），死亡期（病毒清除后的第二期），免疫記憶期（可維持較長時(shí)期）。,（三）抗病毒免疫調(diào)節(jié),免疫調(diào)節(jié)（immunoregulation）指免疫應(yīng)答過程中免疫系統(tǒng)內(nèi)部各細(xì)胞之間，免疫細(xì)胞與免疫分子之間以及免疫系統(tǒng)與神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)之間相互作用，構(gòu)成了相互協(xié)調(diào)，相互制約的調(diào)解網(wǎng)絡(luò)，使免疫應(yīng)答維持合適的強(qiáng)度以保證機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。免疫器官和組織內(nèi)

20、有神經(jīng)纖維的分布，神經(jīng)系統(tǒng)可據(jù)此調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的功能；神經(jīng)系統(tǒng)還能產(chǎn)生多種細(xì)胞因子作用于免疫系統(tǒng)。細(xì)胞因子的免疫調(diào)節(jié)作用：目前已知IFN-α/β對于特異性免疫和非特異性免疫均具有廣泛的調(diào)節(jié)作用，作用之一在于誘導(dǎo)NK細(xì)胞的殺傷活從而對非特異性抗病毒免疫產(chǎn)生影響；還能通過增強(qiáng)抗原通過MHC1類途徑的加工處理和提成，而促進(jìn)CD8+T細(xì)胞反應(yīng)。NK細(xì)胞反應(yīng)的負(fù)向調(diào)節(jié)作用：與已知的T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子IFN-γ能夠活化巨噬細(xì)胞相反，特異性抗病毒

21、免疫應(yīng)答反應(yīng)可通過多種途徑對于NK細(xì)胞產(chǎn)生負(fù)向調(diào)節(jié)作用。,（四）抗病毒免疫記憶,急性病毒感染可同時(shí)誘導(dǎo)T細(xì)胞和B細(xì)胞記憶。但兩者之間有一定的差異。抗病毒B細(xì)胞免疫記憶表現(xiàn)為即使感染已經(jīng)清楚，仍能持續(xù)產(chǎn)生抗體。感染病毒后或接種病毒疫苗后抗體的產(chǎn)生可持續(xù)數(shù)十年。相反，T細(xì)胞介導(dǎo)的抗病毒免疫效應(yīng)階段持續(xù)的時(shí)間很短（盡數(shù)周），抗病毒T細(xì)胞免疫記憶依賴于記憶T細(xì)胞的產(chǎn)生。T細(xì)胞記憶：機(jī)體再次接觸病毒時(shí)出現(xiàn)T細(xì)胞的加速反應(yīng)是因?yàn)轶w內(nèi)存在一定數(shù)量的

22、抗原特異性T細(xì)胞來源的記憶T細(xì)胞，這些細(xì)胞表達(dá)高水平粘附分子，能有效地與抗原提呈細(xì)胞結(jié)合，也有利于這些細(xì)胞在體內(nèi)的循環(huán)及其歸巢。B細(xì)胞記憶:病毒感染誘導(dǎo)機(jī)體所產(chǎn)生的記憶B細(xì)胞不僅能在體內(nèi)存活多年，而且能在體內(nèi)數(shù)十年內(nèi)不斷產(chǎn)生抗體。雖然隨著時(shí)間的遷移血清內(nèi)抗體的水平不斷降低，但有的抗體在感染或免疫后25~50年仍能被檢測到。,第二節(jié) 病毒免疫逃逸的機(jī)制,在機(jī)體通過免疫系統(tǒng)設(shè)法清除病毒的同時(shí)，病毒也會通過多種方式逃避機(jī)體免疫防護(hù)機(jī)制的作用

23、并在體內(nèi)長期存在，從而引起多種疾病如HIV引起AIDS，HBV和HCV引起的慢性肝炎和肝癌等。不同的病毒可有以下不同的免疫逃逸方式。,一.限制病毒基因的表達(dá),這是病毒感染細(xì)胞逃避宿主免疫殺傷的一種簡單而有效的策略，該策略被幾乎所有能在體內(nèi)長期存活的病毒所采用，最典型的是孢疹病毒和反轉(zhuǎn)錄病毒。在疾病的潛伏期，HSV感染神經(jīng)細(xì)胞時(shí)，病毒基因的表達(dá)完全關(guān)閉，在感染的神經(jīng)細(xì)胞的表面也就沒有病毒蛋白的表達(dá)，在此情況下，病毒對于免疫系統(tǒng)來說可以說是

24、隱形的，這種想對隱匿的感染也成為病毒免疫逃逸的理想途徑。,二.感染免疫特赦部位,機(jī)體內(nèi)存在一些免疫系統(tǒng)觸及不到的免疫特赦部位如眼前房，睪丸，中樞神經(jīng)系統(tǒng)等，病毒可以通過對這些部位的感染而獲得免疫逃逸。由于血-腦脊液屏障限制了淋巴細(xì)胞進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，同時(shí)神經(jīng)細(xì)胞低表達(dá)甚至不表達(dá)MHC1類和2類分子，使T細(xì)胞難以識別，因此中樞神經(jīng)系統(tǒng)是多種病毒理想的感染部位。腎臟是另一個病毒易于隱藏的器官，CMV及人多瘤病毒BK和JC等能在腎臟復(fù)制并流至

25、尿液長期存活。,CMV 巨細(xì)胞病毒（CMV）屬于皰疹病毒家族中的一員。CMV感染通過直接接觸感染(垂直感染)的組織或體液（如唾液、血液或尿液）。傳播的途徑非常廣泛，最常見的為子宮內(nèi)、宮頸分泌物或乳汁傳播；與監(jiān)護(hù)室的幼兒密切接觸；性接觸。 CMV 感染也常見于器官移植、骨髓移植和艾滋病患者。CMV是最常見的機(jī)會性感染性病毒，對免疫機(jī)能不全患者可以導(dǎo)致嚴(yán)重的后果。,三.逃避抗體的識別,病毒能通過對病毒蛋白上關(guān)鍵的抗體識別位點(diǎn)的突變而有效地逃

26、避抗體的中合作用，最典型的是流感病毒，其抗原性由于其表面的兩種糖蛋白的突變而易于改變。盡管流感病毒在個體內(nèi)不會持續(xù)存在，但它通過抗原性的改變得以在群體內(nèi)一直存在。一個典型的例子是慢病毒(Lentivirus)感染。,,慢病毒（Lentivirus）載體是以HIV-1（人類免疫缺陷I型病毒）為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體。區(qū)別一般的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，它對分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。,四.逃避T細(xì)胞的識別,病毒蛋白抗原性的改變也會使T細(xì)

27、胞對病毒難以識別，理論上，CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞均可能出現(xiàn)這種現(xiàn)象。目前，研究主要集中在CD8+T細(xì)胞表位方面，通過對LCMV感染體系的研究表明，單個氨基酸的改變就會阻斷CTL的識別，從而導(dǎo)致變異病毒在體內(nèi)的長期存在。這種現(xiàn)象也存在于某些人類病毒感染如HIV，EBV和HBV等。細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（cytotoxic lymphocyte,CTL），亦叫TC細(xì)胞（cytotoxic T cell），是白細(xì)胞的亞部，為一種特異T細(xì)

28、胞，專門分泌各種細(xì)胞因子參與免疫作用。對某些病毒、腫瘤細(xì)胞等抗原物質(zhì)具有殺傷作用，與自然殺傷細(xì)胞構(gòu)成機(jī)體抗病毒、抗腫瘤免疫的重要防線。,五.抑制細(xì)胞表面免疫分子的表達(dá),MHC1,2類分子，粘附分子等是T細(xì)胞有效識別所必需的一些細(xì)胞表面免疫分子，有些病毒能抑制這些分子的表達(dá)從而逃避T細(xì)胞的免疫識別，如腺病毒和CMV等的感染能抑制細(xì)胞MHC1類分子的表達(dá)，此外，CMV，HIV及麻疹病毒等能抑制細(xì)胞MHC2類分子的表達(dá)，EBV則能抑制細(xì)胞表面

29、粘附分子LFA-3和ICAM-1的表達(dá)。,六.阻礙抗原提呈,有研究表明，HSV能干擾MHC1類途徑的抗原提呈，一種名為ICP47的HSV病毒蛋白通過與抗原加工相關(guān)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白TAP結(jié)合，從而阻斷了多肽向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)運(yùn)輸?shù)耐ǖ?，因此，病毒多肽不能有效裝配至MHC分子，也就不能以MHC1類分子——多肽復(fù)合物的形式表達(dá)于細(xì)胞表面。,七.干擾細(xì)胞因子和趨化因子的作用,目前已有證據(jù)表明多種病毒感染能干擾細(xì)胞因子的作用，如腺病毒蛋白E1B，E3能保護(hù)病毒感