博爾納乙肝疫苗

1、Hepavax Gene®益可欣TM 全球第一個(gè)漢遜酵母基因重組乙肝疫苗,,2,內(nèi)容,乙型肝炎多形漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)疫苗中的硫柳汞益可欣TM,3,CrucellBringing Innovation to Global Health,,,,4,Crucell在中國(guó)已上市的產(chǎn)品,因福舒®純度最高的流感疫苗,愛(ài)巴蘇®類病毒體佐劑甲肝疫苗,益可欣TM全球第一個(gè)漢遜酵母乙肝疫苗,5,乙型肝炎: 全球

2、性的公共衛(wèi)生問(wèn)題,,,20億人被感染，3.6億慢性攜帶者每年100萬(wàn)人死于乙肝(肝硬化，肝癌),WHO 2002, 2003,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,根據(jù)2008年4月最新公布的普查數(shù)據(jù)，我國(guó)1－59歲人群的乙肝表面抗原攜帶率為7.18％,6,乙型肝炎感染與年齡,患者感染乙肝時(shí)的年齡是決定疾病結(jié)果的主要

3、因素,慢性感染,癥狀性感染,感染時(shí)的年齡,WHO/V&B/01.31,7,乙型肝炎并發(fā)癥過(guò)程示意圖,,乙肝病毒的感染,,,,,,,,,,,,急性乙型肝炎,短時(shí)，不明顯的感染,臨床癥狀性感染,康復(fù),90%,70%,30%,100%,99%,1%,慢性乙型肝炎,肝硬化,“健康”HBsAg 攜帶者,肝癌,10%,10-30%,70-90%,急性肝衰竭?死亡,潛伏期30至60年,,8,乙型肝炎的免疫應(yīng)答,病毒本身不直接傷害肝細(xì)胞宿

4、主免疫應(yīng)答導(dǎo)致肝細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷細(xì)胞毒性T細(xì)胞在這個(gè)過(guò)程中扮演著重要的角色(1)CTL應(yīng)答是機(jī)體抵抗HBV感染的主要要防御機(jī)制理想的乙肝疫苗應(yīng)同時(shí)誘導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫漢遜酵母HBV母嬰傳播阻斷率高達(dá)95％ (2)細(xì)胞死亡的程度可能非常嚴(yán)重，而沒(méi)有任何臨床癥狀每天死亡的細(xì)胞可達(dá)3-30億 (所有肝細(xì)胞中的0,3% to 3%) (3),(1) 駱利敏等，乙型肝炎病毒多表位抗原基因的設(shè)計(jì)、合成及表達(dá)，中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2

5、004，24（6）：426－432(2) 梁爭(zhēng)論等，一種新型重組乙型肝炎疫苗（漢遜酵母菌表達(dá)）人體安全性、免疫效果考核。中國(guó)計(jì)劃免疫，2004，10（4）：193－197(3) Nowak MA, Bonhoeffer S, Hill AM, et al. (1996). Viral dynamics in hepatitis B viral infection,9,隱匿性乙型肝炎病毒感染/OBI,HBsAg和抗-HBs陰性但抗-H

6、Bc陽(yáng)性的血液可引起輸血后HBV感染，提示單獨(dú)抗-HBc陽(yáng)性者也可以攜帶HBV并引起感染。目前大多數(shù)學(xué)者將HBsAg陰性的HBV感染稱為隱匿性HBV感染（occult hepatitis B virus infection, OBI)OBI患者可能通過(guò)輸血或組織器官移植傳播HBV，是HBV高流行區(qū)乙肝疫苗免疫失敗的重要原因。Luo等在廣州的乙肝疫苗無(wú)應(yīng)答者中用PCR方法調(diào)查，發(fā)現(xiàn)潛在的HBV感染占60－70％，認(rèn)為HBsAg陰性

7、的HBV感染可能是我國(guó)乙肝疫苗免疫失敗的主要原因之一。乙肝病毒突變即存在逃逸突變也是一個(gè)重要原因。,10,內(nèi)容,乙型肝炎多形漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)疫苗中的硫柳汞益可欣TM,11,乙肝疫苗的發(fā)展,12,漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)用于乙肝疫苗生產(chǎn)Hansenula polymorpha Expression System,技術(shù)領(lǐng)先全球第一個(gè)漢遜酵母基因重組乙肝疫苗Crucell核心專利技術(shù)更高免疫原性，更高母嬰阻斷率工藝先進(jìn)完全不含硫柳

8、汞卓越的安全性和耐受性廣泛應(yīng)用WHO認(rèn)證，全球使用量最大的乙肝疫苗之一已在全球90多個(gè)國(guó)家和地區(qū)廣泛使用是UNICEF和PAHO采購(gòu)量最大的乙肝疫苗,13,,不同的表達(dá)系統(tǒng),表達(dá)系統(tǒng)的復(fù)雜程度,不同的表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)HBsAg，其抗原糖基化程度是其主要區(qū)別之一,14,內(nèi)容,乙型肝炎多形漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)疫苗中的硫柳汞益可欣TM,15,硫柳汞在疫苗中的作用,最早在1930年代開始應(yīng)用 生產(chǎn)過(guò)程中加入: 抑制細(xì)菌繁殖 (如 流

9、感疫苗的生產(chǎn))滅活疫苗的抗原 (如 百日咳疫苗的生產(chǎn))穩(wěn)定疫苗抗原 (如 乙肝表面抗原)致使成品中有痕量的硫柳汞成品中加入作為防腐劑:防止微生物污染 殺滅細(xì)菌和真菌是硫柳汞殘留的主要原因,16,為什么關(guān)注硫柳汞？,按重量計(jì)算，硫柳汞中含有49.6%的汞, 降解為硫化水楊酸和乙基汞， 不同于甲基汞的化合物。 汞全世界都可以找到汞，主要以三種形式存在: 金屬, 無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)化合物 (如：甲

10、基汞、乙基汞) 甲基汞甲基汞具有神經(jīng)毒性， 危害人體的健康，包括神經(jīng)損傷甚至死亡。水生食物鏈中積聚 乙基汞可引起遲發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)FDA以甲基汞的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)待對(duì)于多種渠道來(lái)源（食物、醫(yī)療產(chǎn)品）的乙基汞的累積暴露應(yīng)當(dāng)予以關(guān)注,17,硫柳汞的危害,遲發(fā)型局部過(guò)敏反應(yīng)潛在的危險(xiǎn)神經(jīng)發(fā)育紊亂心臟病兒童自閉癥注意缺陷多動(dòng)癥（ADHD）語(yǔ)言遲滯－－－嬰兒可能缺乏汞清除的能力，在新生兒生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵階段即使接觸到的是低劑量的

11、汞也會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)性的紊亂。,18,官方立場(chǎng) – 最好使用不含硫柳汞的疫苗,美國(guó)‘要求生產(chǎn)商明確作出書面承諾和計(jì)劃， 以盡快消除和減少疫苗中的汞含量’ AAP/USPHS 1999,加拿大‘…推薦在嬰兒中使用不含硫柳汞疫苗’ Canadian NACI 2003,歐洲‘針對(duì)嬰兒和幼兒的接種預(yù)防措施， 應(yīng)當(dāng)謹(jǐn)慎地歡迎不含硫柳汞或其他含

12、汞防腐劑的疫苗使用’ EMEA 1999,NACINational Advisory Committee on Immunization AAPAmerican Academy of Pediatrics USPHSUnited States Public Health Service EMEA European Agency for the Evaluation of Medicinal Produc

13、ts,19,乙肝疫苗益可欣,益可欣TM的生產(chǎn),,3. 收獲細(xì)胞 4. 細(xì)胞裂解 5. 澄清 6. 吸收 7. 離子交換層析 8. 極性過(guò)濾 9. 離心過(guò)濾

14、 10. 凝膠過(guò)濾層析 11. 無(wú)菌過(guò)濾,2. 主要發(fā)酵1. 種子發(fā)酵,,上游流程 下游流程,生產(chǎn)過(guò)程完全不添加硫柳汞,,20,無(wú)硫柳汞 更加安全,我國(guó)兒童在半歲前累計(jì)接受的計(jì)劃免疫疫苗中硫柳汞總量為225-400ug，到1歲時(shí)可達(dá)325-500ug.大大超出了EPA和FDA允許的最大甲基汞水平

15、1997年起，WHO、美國(guó)、歐盟和加拿大等相繼要求降低和去除嬰幼兒疫苗中的硫柳汞無(wú)汞疫苗的應(yīng)用是減少汞暴露的主要途徑,益可欣TM完全不含硫柳汞，無(wú)防腐劑,21,內(nèi)容,乙型肝炎多形漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)疫苗中的硫柳汞益可欣TM,22,益可欣TM – 現(xiàn)狀,全球用量最大的乙肝疫苗之一:全球已銷售6億劑WHO 認(rèn)證，銷往:>90 國(guó)家和跨國(guó)組織PAHO 和 UNICEF從1995年起，供應(yīng)超過(guò)1.3億劑可靠的疫苗供應(yīng):

16、大規(guī)模的生產(chǎn)能力快速交貨超過(guò)2億名兒童接種了益可欣TM,PAHO, 泛美健康組織UNICEF, 聯(lián)合國(guó)兒童基金會(huì),23,益可欣TM – 優(yōu)秀的安全紀(jì)錄,基因重組乙肝疫苗的安全性已經(jīng)多年的實(shí)踐證實(shí)和世界所公認(rèn)14項(xiàng)臨床研究:1500名受試者 無(wú)嚴(yán)重的不良反應(yīng)事件上市后監(jiān)測(cè): 1998年1月至2003年4月銷售2.12 億劑 只有42 例不良反應(yīng)事件 大多數(shù)為輕中度 (41例不嚴(yán)重), 數(shù)天內(nèi)可完全恢復(fù)極低的自發(fā)病

17、例上報(bào)率(每20萬(wàn)劑),GCVC 2003,24,益可欣TM – 卓越的抗乙肝保護(hù),0-1-6-月程序,1Cho Y-K, et al. 1996;2Timm`ermans ITF, et al. 2002 3Janowicz ZA, et al. 2002; GMT, geometric mean titer,25,益可欣TM – 針對(duì)乙肝的快速保護(hù),1Hieu NT 1996; 2Timmermans ITF, et al.

18、 2002 3Abraham P, et al. 2000; GMT, geometric mean titer,0-1-2-月接種程序*,*為了獲得理想的免疫效果推薦在第12月接種第4針進(jìn)行加強(qiáng)免疫,26,益可欣TM 產(chǎn)品特性,*不同國(guó)家的年齡段會(huì)有所不同,27,益可欣TM的GMT水平和血清保護(hù)率0-1-6月程序,,,28,益可欣? –與安在時(shí)®具有類似的免疫原性,0-1-6-免疫程序＋新生兒的 HBIG,Nguyen

19、TH, et al. 2002; GMT, geometric mean titerHBIG, hepatitis B immune globulin,29,益可欣TM – 與安在時(shí)®相比的血清保護(hù)率 (0-1-2 程序),Berna Biotech 2004, Data on file,30,益可欣TM – 長(zhǎng)期保護(hù),,Nguyen TH, et al. 2002GMT, geometric

20、mean titer,益可欣TM對(duì)HBV感染產(chǎn)生極好的長(zhǎng)期保護(hù)作用,新生兒中0-1-2月接種程序,31,益可欣TM :具有良好的耐受性,Rebedea I et al. 2006,結(jié)論：益可欣TM與安在時(shí)®具有類似的安全性和耐受性,32,益可欣TM的熱穩(wěn)定性,WHO立場(chǎng)文件：乙肝疫苗具有良好的熱穩(wěn)定性145℃下一周37 ℃下一個(gè)月WHO正在考慮：乙肝疫苗的運(yùn)輸和現(xiàn)場(chǎng)接種時(shí)可無(wú)需使用冷鏈1嚴(yán)禁冰凍?。?） Out

21、 of Cold Chain: Considerations for Hepatitis B Vaccine, Julie Milstien, University of Maryland School of Medicine,33,益可欣TM – 小結(jié)全球第一個(gè)漢遜酵母基因重組乙肝疫苗,更高免疫原性，更高血清保護(hù)率源于優(yōu)秀的多形漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)Crucell的核心專利技術(shù)完全不含硫柳汞, 卓越的安全性和耐受性源于先進(jìn)的生產(chǎn)