簡(jiǎn)介：大理大學(xué)病毒學(xué)檢驗(yàn)期末備考精華大理大學(xué)病毒學(xué)檢驗(yàn)期末備考精華責(zé)任編輯總結(jié)程家國(guó)責(zé)任編輯總結(jié)程家國(guó)第1章細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)一、名詞解釋一、名詞解釋11細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)CELLCULTURETECHNOLOGYCELLCULTURETECHNOLOGY是模擬體內(nèi)生理環(huán)境條件，一共細(xì)胞適宜的營(yíng)養(yǎng)和溫度條件，在無菌操作的基礎(chǔ)上，使離體組織細(xì)胞生長(zhǎng)增殖并進(jìn)行傳代的技術(shù)。22細(xì)胞系（細(xì)胞系（CELLLINESCELLLINES）原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代培養(yǎng)獲得的一群細(xì)胞。33原代細(xì)胞培養(yǎng)（原代細(xì)胞培養(yǎng)（PRIMARYCELLPRIMARYCELL）將動(dòng)物或人的胎兒組織經(jīng)剪碎、酶消化、稀釋計(jì)數(shù)、加營(yíng)養(yǎng)液，37度培養(yǎng)12天后，形成單層細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的方法。44傳代細(xì)胞培養(yǎng)（傳代細(xì)胞培養(yǎng)（CONTINUOUSCONTINUOUSCELLCELL）原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中，在大多數(shù)細(xì)胞退化時(shí)，少數(shù)細(xì)胞又能長(zhǎng)期傳下去，這種能在培養(yǎng)容器內(nèi)連續(xù)多次傳代的細(xì)胞。55細(xì)胞株（細(xì)胞株（CELLCELLSTRAINSTRAIN）從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的遺傳、生化特性相同的細(xì)胞群。二、問答題二、問答題11簡(jiǎn)答空斑形成單位法的原理。簡(jiǎn)答空斑形成單位法的原理。答將不同稀釋度的病毒懸液接種于單層細(xì)胞上，使病毒吸附于細(xì)胞，然后覆蓋一層營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。由于瓊脂的限制，病毒只能感染周圍的細(xì)胞，出現(xiàn)蝕斑現(xiàn)象。加入中性紅染料，由于死細(xì)胞不能攝入中性紅染料，會(huì)出現(xiàn)不染色的空斑。一個(gè)空斑理論上可認(rèn)為石油一個(gè)病毒粒子感染形成的，稱為一個(gè)空斑形成單位。可以定量測(cè)定病毒的感染力。250250終點(diǎn)法的原理和注意事項(xiàng)。終點(diǎn)法的原理和注意事項(xiàng)。答1原理將病毒液經(jīng)系列稀釋后，接種單層細(xì)胞，觀察細(xì)胞病變，計(jì)算造成50細(xì)胞發(fā)生最終病變的病毒液濃度。2注意事項(xiàng)88單層細(xì)胞培養(yǎng)上病毒增殖如何檢測(cè)單層細(xì)胞培養(yǎng)上病毒增殖如何檢測(cè)答答99病毒滴度測(cè)定有哪些方法病毒滴度測(cè)定有哪些方法答答

簡(jiǎn)介：犬瘟熱防控研究成就與進(jìn)展犬瘟熱防控研究成就與進(jìn)展2011級(jí)生物科學(xué)20114083049張?jiān)勒翢酑ANINEDISTEMPER,CD是由犬瘟熱病毒CANINEDISTEMPERVIRUS,CDV引起的一種急性、高度接觸性傳染病，流行范圍廣，發(fā)病率、致死率高，臨床癥狀多樣。CDV感染宿主廣泛，所有日齡的犬都有可能感染。CDV屬于副粘病毒科麻疹病毒屬，有囊膜包裹的單股負(fù)鏈線性RNA病毒。CDV基因組編碼6種蛋白，核衣殼（N）蛋白、磷（P）蛋白、基質(zhì)膜（M）蛋白、融合（F）蛋白、血凝素（H）蛋白和大L蛋白。N、P和L蛋白與病毒復(fù)制有關(guān)；M蛋白與病毒的裝配和出芽有關(guān)；F、H蛋白在病毒的侵染過程中起到關(guān)鍵作用。近年來，隨著我國(guó)寵物業(yè)、毛皮經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，CD在我國(guó)的發(fā)病率有升高的趨勢(shì)。論文對(duì)CDV分子生物學(xué)研究進(jìn)展進(jìn)行歸納總結(jié)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞犬瘟熱病毒，致病機(jī)理，分子生物學(xué)，致病機(jī)理，診斷檢測(cè)，防御治療犬瘟熱CANINEDISTEMPER,CD）是由犬瘟熱病毒CANINEDISTEMPERVIRUS,CDV引起的一種急性、高度接觸性傳染病，流行范圍廣，發(fā)病率及致死率高。臨床癥狀多表現(xiàn)為“雙相熱”，眼鼻有黏液樣分泌物，伴有腹瀉，嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)血便，四趾肉墊增厚、角質(zhì)化明顯，神經(jīng)癥狀多表現(xiàn)為抽搐。CDV感染宿主廣泛，主要為食肉目動(dòng)物，如犬科、鼬科、浣熊科、貓科和靈貓科等，但主要宿主為犬科動(dòng)物，所有日齡的犬都有可能感染［1］。本文將近期CDV分子生物學(xué)研究進(jìn)行歸納總結(jié)，為深入研究提供參考。犬瘟熱病毒的分子生物學(xué)犬瘟熱病毒的分子生物學(xué)CDV屬于副黏病毒科麻疹病毒屬，為有囊膜包裹的單股負(fù)鏈線性RNA病毒。呈圓形或橢圓形，有時(shí)呈長(zhǎng)絲狀。直徑約為150NM，核衣殼呈螺旋對(duì)稱。CDV只有１種血清型，根據(jù)血凝素H基因的多樣性和病毒的毒力，分6種基因型ASIA1、ASIA2、EUROPE、USA、ARCTIC和VACCINE）。由于具有囊膜，CDV對(duì)有機(jī)溶劑敏感，對(duì)酸堿抵抗力弱，所以臨床上常用消毒方法即可殺滅；CDV對(duì)熱和干燥敏感，故該病多流行于冬春寒冷季節(jié)。CDV侵染不同類型的細(xì)胞，如上皮、間質(zhì)、神經(jīng)內(nèi)分泌和造血干細(xì)胞，在不同組織和器官內(nèi)造成持續(xù)感染，例如中樞神經(jīng)系統(tǒng)CNS和淋巴組織［2］。感染犬通常表現(xiàn)為呼吸道、胃腸道以及其他組織和器官的多種臨床癥狀，其中急性感染導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘性腦脊髓炎（DEMYELINATINGLEUKOENCEPHALOMYELITIS,DL）,并引起嚴(yán)重的全身免疫抑制和淋巴組織損耗［24］?；蚪M位于病毒粒子內(nèi)部，被核衣殼蛋白包裹，基因組全長(zhǎng)約16KB，基因組呈線性排列。從3’端至5’端的基因順序依次為前導(dǎo)序列、N、P、M、F、H、L、前導(dǎo)（尾隨）序列。3’端前導(dǎo)序列由55個(gè)核苷酸組成，5’端前導(dǎo)（尾隨）序列由38個(gè)核苷酸組成。3’端前導(dǎo)序列和5’端前導(dǎo)（尾隨）序列，被認(rèn)為是啟動(dòng)、調(diào)節(jié)序列，指導(dǎo)基因的轉(zhuǎn)錄復(fù)制過程，同時(shí)又是CDV基因的轉(zhuǎn)錄終止、重起始序列。兩序列之間包括6個(gè)非重疊基因區(qū)，編碼六種基因蛋白核衣殼蛋白N、磷蛋白P、基質(zhì)膜蛋白M、融合蛋白F、血凝素蛋白H、大蛋白L。N、P和L蛋白形成核糖核蛋白復(fù)合體RNP包裹病毒RNA，三種蛋白與病毒復(fù)制過程相關(guān)；兩種表面糖蛋白F和H蛋白黏附在囊膜表面，形成纖突在病毒感染侵入過程中發(fā)揮重要作用；M蛋白則嵌合到囊膜內(nèi)，在糖蛋白與核衣殼連接中起橋連作用，同時(shí)與病毒的裝配和出芽有關(guān)。1、核衣殼、核衣殼NN蛋白及其基因蛋白及其基因核衣殼N蛋白基因由1683個(gè)核苷酸組成，有一個(gè)開放閱讀框起始于53位～55位的AUG起始密碼子，共編碼523個(gè)氨基酸，分子質(zhì)量為58KU。N蛋白基因由中間保守區(qū)和N末端、C末端的可變區(qū)組成［5］。N蛋白具有較高的保守性，能誘導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫。N蛋白的C末端1AA～80AA、337AA～358AA為抗原識(shí)別不可或缺的抗原表位，能誘導(dǎo)體液免疫產(chǎn)生抗體［6］；N蛋白的9氨基酸寡肽281AA～289AA，TYRPROALALEUHISGLUPHE介導(dǎo)CTL反應(yīng)，可能是CTL活性細(xì)胞作用靶細(xì)胞的抗原表位之一，對(duì)CDV引起的細(xì)胞免疫具有重要作用［78］。N蛋白和P、L蛋白與復(fù)制過程相關(guān)，P和L蛋白具有RNA聚合酶活性，隨后N蛋白包裹病毒RNA，避免RNA降解［910］，三者能夠構(gòu)成一個(gè)復(fù)制單位－核糖核蛋白復(fù)合體RNP。N蛋白上有特定的細(xì)胞核定位信號(hào)NLS和細(xì)胞核轉(zhuǎn)出信號(hào)NES，NLS和NES為N蛋白核轉(zhuǎn)運(yùn)過程中所必需的［11］。YOSHIDAE等［6］通過間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)IFA測(cè)得，缺失了N末端的1AA～80AA的N蛋白只4、融合、融合FF蛋白及其基因蛋白及其基因融合F蛋白基因長(zhǎng)為2205個(gè)核苷酸，F(xiàn)蛋白分子質(zhì)量為62KU，由F1和F2由兩個(gè)亞單位蛋白組成，翻譯時(shí)起始于461～463位的AUG到757位核苷酸，編碼99個(gè)氨基酸為F2蛋白，分子質(zhì)量為23KU，從758至2071位核苷酸，編碼438個(gè)核苷酸為F1蛋白。F1蛋白嵌入囊膜，而F2蛋白位于囊膜外側(cè)，F(xiàn)1蛋白和F2蛋白通過二硫鍵連接。F蛋白經(jīng)蛋白酶裂解分為三個(gè)部分，縮氨酸信號(hào)肽、F2蛋白和F1蛋白［20］。裂解位點(diǎn)AQIHW在縮氨酸信號(hào)肽的C端，而RRQRR在F1蛋白的N端［2123］，這兩個(gè)裂解位點(diǎn)是高度保守的?？s氨酸信號(hào)區(qū)在前體蛋白F0被裂解成F1蛋白和F2蛋白的過程中起到至關(guān)重要的作用［24］。將ASIA1型和ASIA2型CDV的縮氨酸信號(hào)區(qū)分別與ONDERSTEPOORT株進(jìn)行比對(duì)，氨基酸差異性分別為30％～32％和34％～35％，核苷酸序列差異性分別為15％～16％和18％～19％，說明該信號(hào)肽序列的多樣性。F1蛋白具有融合功能，它包括N端的縮氨酸融合區(qū)FP、穿膜區(qū)TM和C端的CYTOPLASMICTAI區(qū)CT；F2蛋白具有附著功能。ASIA型CDV的F蛋白上有7個(gè)潛在的糖基化位點(diǎn)，其中4個(gè)分別在F2蛋白區(qū)的141位～143、173位～175和179位～181位和F1蛋白區(qū)的517位～519位［25］。另外3個(gè)潛在糖基化位點(diǎn)具有一致的氨基酸序列NXS/T，而且只在ASIA1型CDV中被發(fā)現(xiàn)。其中2個(gè)在縮氨酸信號(hào)區(qū)的62位～64位和108位～110位，最后一個(gè)則在個(gè)別ASIA1型CDVF1蛋白區(qū)的605位～607位［26］。F蛋白是位于CDV囊膜上的I型糖蛋白，以非共價(jià)鍵連接的同源三聚體形式存在，介導(dǎo)囊膜和細(xì)胞膜融合，使病毒具有在宿主體內(nèi)擴(kuò)散的能力，是感染性病毒粒子進(jìn)入宿主細(xì)胞所必需的。VONMESSLING等［15］構(gòu)建了3種重組質(zhì)粒58UTRMFNP、58△F106和58UTRMFNP△F106。研究表明只缺失F蛋白縮氨酸信號(hào)FSP區(qū)不影響病毒感染的進(jìn)程和結(jié)果；將MFUTR替換成NPUTR能夠延長(zhǎng)病毒在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的感染進(jìn)程；縮短MFUTR能夠提高F蛋白轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而促進(jìn)F蛋白的翻譯和成熟病毒的產(chǎn)生。結(jié)果證明，麻疹病毒屬病毒MF基因區(qū)通過控制Ｆ基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄過程來調(diào)節(jié)病毒的抗原性［27］。5、血凝素、血凝素HH蛋白及其基因蛋白及其基因血凝素H蛋白基因長(zhǎng)為1946個(gè)核苷酸，有一個(gè)開放閱讀框，起始于21位～23位ATG，終止于1833位～1835位的TAA，編碼604個(gè)氨基酸，分子質(zhì)量為76KU。在麻疹病毒屬所有的結(jié)構(gòu)蛋白基因中，H蛋白基因變異性最大。H蛋白是CDV囊膜表面主要的糖蛋白之一，為Ⅱ型糖蛋白，是構(gòu)成囊膜纖突的主成分，決定了CDV的宿主特異性，并協(xié)助F蛋白使病毒囊膜與宿主細(xì)胞發(fā)生膜融合侵入宿主細(xì)胞。CDV的H蛋白首先吸附于宿主細(xì)胞SLAM受體上，隨后H蛋白的構(gòu)象發(fā)生改變，產(chǎn)生信號(hào)給F蛋白使病毒囊膜和宿主細(xì)胞發(fā)生膜融合，進(jìn)而入侵宿主細(xì)胞。而且膜融合的程度和效率也依賴于H蛋白［2830］。H蛋白還決定CDV的生長(zhǎng)特性和趨向性［29］。也是誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體的主要蛋白之一，而且抗CDVH蛋白單克隆抗體MCAB保護(hù)力強(qiáng)于抗F蛋白MCAB［31］。CDVH蛋白有廣泛的糖基化位點(diǎn)，但是野毒株與疫苗株H蛋白的潛在糖基化位點(diǎn)不同，野毒株為8個(gè)～9個(gè)，而ONDERSTEPOORT株為4個(gè)［3233］。形成大蝕斑的ONDERSTEPOORTOL株的H蛋白在60位氨基酸殘基處與野毒株5804P的H蛋白存在差別，可能是5804P株多了幾個(gè)潛在N糖基化位點(diǎn)，而且疫苗株H蛋白的分子量小于野毒株的H蛋白。由此可以推測(cè)減少的N糖基化位點(diǎn)可能對(duì)病毒感染性減弱起到關(guān)鍵作用，如果增加N糖基化位點(diǎn)可能最終導(dǎo)致疫苗免疫失敗［15，3334］。OL疫苗株的H蛋白較5804P強(qiáng)毒株的H蛋白少了3個(gè)潛在連接N糖基化位點(diǎn)，導(dǎo)致了在309N～S、393T～A和456N～D氨基酸序列的改變。VONMESSLINGV等［29］，研究證明了野毒株5804P的H蛋白上的7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的膜外N糖基化位點(diǎn)和一個(gè)非標(biāo)準(zhǔn)的N糖基化位點(diǎn)，其中5個(gè)可能被利用。將5804PH蛋白N糖基化位點(diǎn)突變，保留與OL株相同的3個(gè)糖基化位點(diǎn)，構(gòu)建P5804PHOLLIKE重組質(zhì)粒，經(jīng)轉(zhuǎn)染細(xì)胞表達(dá)，發(fā)現(xiàn)重組病毒致病性減弱，證明H蛋白的糖基化影響病毒的毒力；再使其H蛋白上的N糖基化位點(diǎn)全部缺失，構(gòu)建P5804PH5KO和P5804PH6KO重組質(zhì)粒，發(fā)現(xiàn)重組病毒不再引起發(fā)病，但是仍然具有引起免疫抑制的能力，這就證明了H蛋白N糖基化位點(diǎn)的減少，能夠引起病毒感染性減弱而不影響免疫抑制反應(yīng)。所以H蛋白的N糖基化位點(diǎn)對(duì)于病毒感染進(jìn)程是必不可少的，并且影響病毒的感染性。6、大、大LL蛋白及其基因蛋白及其基因大L蛋白基因長(zhǎng)為6573個(gè)核苷酸，有一個(gè)開放閱讀框起始于23位的AUG，編碼2161個(gè)氨基酸，5’端有22個(gè)核苷酸的非編碼區(qū)序列

簡(jiǎn)介：【書名版次】普通病毒學(xué)第一版開本16開【作者】謝天恩,胡志紅【出版社】科學(xué)出版社【簡(jiǎn)介】本書系統(tǒng)論述各類病毒的本質(zhì)、結(jié)構(gòu)與功能的相似形和特點(diǎn)，概括各方面共同的理論和概念，從分子水平、細(xì)胞水平、機(jī)體水平及群體水平闡明病毒與宿主相互關(guān)系的規(guī)律。內(nèi)容包括病毒的分類與命名、形態(tài)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、復(fù)制、遺傳與變異、進(jìn)化、基因工程、朊病毒、病毒與腫瘤、病毒與細(xì)胞凋亡，人類致病性病毒、昆蟲病毒、植物病毒等與宿主之間的相互關(guān)系。書后附有病毒專業(yè)術(shù)語匯編。全書內(nèi)容翔實(shí)，豐富而新穎，既介紹各類病毒的基礎(chǔ)知識(shí)、又反映病毒研究的最新發(fā)展動(dòng)態(tài)和方向。本書適用于病毒學(xué)、微生物學(xué)專業(yè)碩士、博士研究生的專業(yè)教材，也可供從事病毒學(xué)、微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)、農(nóng)業(yè)科技的人員參考。第三節(jié)病毒顆粒形態(tài)結(jié)構(gòu)的對(duì)稱性提要第四章病毒的復(fù)制前言第一節(jié)用于病毒復(fù)制研究的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)第二節(jié)病毒的復(fù)制周期第三節(jié)病毒的異常復(fù)制提要第五章病毒的遺傳與變異前言第一節(jié)病毒的突變第二節(jié)病毒的重組第三節(jié)影響病毒表型的病毒間相互作用第四節(jié)病毒基因圖的構(gòu)建方法第五節(jié)病毒基因功能的研究方法第六節(jié)哺乳動(dòng)物病毒表達(dá)載體提要第六章病毒的進(jìn)化前言第一節(jié)有關(guān)病毒起源的學(xué)說第二節(jié)研究病毒分子進(jìn)化的有關(guān)方法第三節(jié)DNA病毒的進(jìn)化第四節(jié)RNA病毒的進(jìn)化提要第七章病毒與腫瘤第一節(jié)腫瘤病毒概述第二節(jié)DNA腫瘤病毒第三節(jié)RNA腫瘤病毒第四節(jié)原癌基因與抑癌基因第五節(jié)細(xì)胞轉(zhuǎn)化與腫瘤提要第八章病毒的持續(xù)性感染前言第一節(jié)病毒感染的類型第二節(jié)病毒持續(xù)性感染的機(jī)制第三節(jié)病毒持續(xù)性感染的實(shí)例

簡(jiǎn)介：病毒教學(xué)目標(biāo)教學(xué)目標(biāo)過程與方法1能提出與病毒相關(guān)的問題；2會(huì)查閱與病毒相關(guān)的書刊和其信息源3能制作有關(guān)病毒的剪貼報(bào)4會(huì)用多種形式表達(dá)、交流研究的方法和結(jié)果科學(xué)知識(shí)1知道一些由病毒感染的病的種類主要傳播途徑和預(yù)防措施2了解病毒是一類什么樣的生物教學(xué)準(zhǔn)備教學(xué)準(zhǔn)備教師準(zhǔn)備有關(guān)病毒的資料學(xué)生準(zhǔn)備了解有關(guān)病毒的有關(guān)知識(shí)教學(xué)過程教學(xué)過程一、引入一、引入1教師提問關(guān)于由病毒感染引起的疾病，你知道些什么如何預(yù)防呢2學(xué)生交流自己收集的資料二、新授二、新授1流感的癥狀有哪些主要傳播途徑是什么如何預(yù)防2學(xué)生討論指名回答3教師講解4狂犬病的癥狀有哪些主要傳播途徑是什么如何預(yù)防5脊髓灰質(zhì)炎的癥狀有哪些主要傳播途徑是什么如何預(yù)防6麻疹的癥狀有哪些主要傳播途徑是什么如何預(yù)防7病毒是一類什么樣的生物8學(xué)生討論后教師講解三、拓展延伸三、拓展延伸（網(wǎng)上學(xué)習(xí)）1教師講述關(guān)于病毒，你還知道些什么請(qǐng)回去以后在網(wǎng)上自主學(xué)習(xí)2學(xué)生交流學(xué)習(xí)收獲和體會(huì)3課后作業(yè)（1）回去查資料了解人類與病毒的抗?fàn)幨罚?）利用作文、圖畫或小報(bào)的形式，說一說自己的學(xué)習(xí)體會(huì)和收獲教學(xué)反思

簡(jiǎn)介：,,什么是禽流感禽流感為何感染人何為H7N9H5N1H7N9為何致死率高,2013年3月安徽、上海等地出現(xiàn)人感染H7N9禽流感疫情。截至2013年4月22日20時(shí)全國(guó)已確診104人，21人死亡，13人痊愈,如何防治H7N9H7N9從哪里來H7N9會(huì)否人際傳播,,,需掌握的內(nèi)容,病毒與細(xì)菌的區(qū)別病毒的定義、分類病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒的感染與復(fù)制病毒致病機(jī)制病毒的檢測(cè)病毒的預(yù)防與治療,病毒的概念,病毒是一類比細(xì)菌更低等，體積更小、結(jié)構(gòu)更簡(jiǎn)單的，超級(jí)寄生的，具感染性的非細(xì)胞型微生物。它能侵犯植物、動(dòng)物和細(xì)菌、真菌等微生物。,病毒與人類的關(guān)系,所致疾病占感染性疾病的75傳播力強(qiáng)病死率高與致畸、腫瘤和某些免疫性疾病有關(guān)其它（分子生物學(xué)、遺傳學(xué)意義，經(jīng)濟(jì)領(lǐng)域關(guān)系）,病毒的特點(diǎn),體積小，能通過細(xì)菌濾器無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，只含有一種核酸嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生，以復(fù)制方式繁殖有機(jī)體水平和細(xì)胞水平兩種致病方式耐冷不耐熱，對(duì)抗生素不敏感,病毒的形態(tài),球狀體（皰疹病毒、腺病毒）絲狀體（煙草花葉病毒、流感病毒）磚形體（天花病毒）彈狀體（水泡性口炎病毒、狂犬病毒）蝌蚪狀體（噬菌體）,球狀,腺病毒,SARSCOV,絲狀,新分離的流感病毒,煙草花葉病毒,磚形,痘病毒,子彈形,狂犬病毒,蝌蚪狀,噬菌體,病毒的大小,測(cè)量單位為NM（NANOMETER）,,,,,,,,,,,,,,,葡萄球菌1000NM）,,,,,,,,,牛痘病毒300250NM,A,B,C,D,E,F,G,立克次體450NM,,,衣原體390NM,A、大腸桿菌噬菌體6595NM,B、腺病毒70NM,C、脊髓灰質(zhì)炎病毒30NM,D、乙腦病毒40NM,E、蛋白分子10NM,F、流感病毒100NM,G、煙草花葉病毒200NM,病毒體的大小,病毒體,病毒體VIRION成熟的、具有感染性的病毒個(gè)體。,SARSCOV,病毒的結(jié)構(gòu)與功能,基本結(jié)構(gòu)基因組蛋白衣殼特殊結(jié)構(gòu)包膜觸須,,,,,,基因組GENOME,遺傳物質(zhì)，DNAORRNA病毒遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)，編碼蛋白，控制病毒性狀，決定病毒復(fù)制及增殖。,SARSCOV基因組（單股正鏈RNA）,圖片來源MARRA,MA,ETALTHEGENOMICSEQUENCEOFTHESARSASSOCIATEDCORONAVIRUSSCIENCE2003MAY3030013991404,HIV1基因組（單正鏈RNA）HBV基因組（不完全雙鏈環(huán)狀DNA）,,蛋白衣殼CAPSID,包裹或鑲嵌在病毒核酸外面，由病毒基因組編碼的蛋白質(zhì)。保護(hù)核酸免受外界環(huán)境因素影響，同時(shí)有其特定的病毒生物學(xué)特性。如細(xì)胞親嗜性，致病性，抗原性，毒性等。,病毒衣殼的對(duì)稱性,病毒衣殼的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，就是其排列的對(duì)稱性。立體對(duì)稱螺旋對(duì)稱復(fù)合對(duì)稱,立體對(duì)稱,二十面體,五鄰體,六鄰體,,,螺旋對(duì)稱,復(fù)合對(duì)稱,,包膜ENVELOP,包裹在病毒核殼外的膜狀結(jié)構(gòu)，由脂質(zhì)和糖蛋白組成。脂質(zhì)細(xì)胞親嗜性，決定病毒的特定侵害部位。糖蛋白吸附，結(jié)合細(xì)胞受體，介導(dǎo)細(xì)胞融合，特殊功能，如流感病毒的HA，NA。,有包膜病毒,CALIFORNIAENCEPHALITISVIRUSCORONAVIRUSCYTOMEGALOVIRUSCMVEASTERNEQUINEENCEPHALITISVIRUSEEEVEPSTEINBARRVIRUSEBVHANTAVIRUSHEPATITISBVIRUSHBVHEPATITISCVIRUSHCVHEPATITISDELTAVIRUSHDVHERPESSIMPLEXVIRUS1HHV1ROTAVIRUSRUBELLAVIRUSSAINTLOUISENCEPHALITISVIRUSSMALLPOXVIRUSVARIOLAVACCINIAVIRUS,HERPESSIMPLEXVIRUS2HHV2HUMANIMMUNODEFICIENCYVIRUSHIVHUMANTLYMPHOTROPHICVIRUSHTLVINFLUENZAVIRUSFLUVIRUSMOLLUSCUMCONTAGIOSUMPAPILLOMAVIRUSHPVPOLIOVIRUSRHINOVIRUSVARICELLAZOSTERVIRUSHHV3VENEZUELANEQUINEENCEPHALVIRVEEVWESTERNEQUINEENCEPHALITISVIRUSWEEVYELLOWFEVERVIRUS,無包膜病毒,ADENOASSOCIATEDVIRUSAAVADENOVIRUSPARVOVIRUSB19COXSACKIEVIRUS–ACOXSACKIEVIRUS–BECHOVIRUSHEPATITISAVIRUSHAVHEPATITISEVIRUSHEVNORWALKVIRUS,,觸須ANTENNA,,腺病毒的觸須可凝聚和毒害宿主細(xì)胞。,病毒的化學(xué)組成,核酸DNA或RNA，決定病毒的感染性，復(fù)制特性，遺傳性蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，保護(hù)病毒核酸，參與病毒感染過程，抗原性，構(gòu)成病毒的酶，毒素作用糖類，脂類包膜成分，抗原性，毒性，信號(hào)傳導(dǎo),病毒的分類,核酸類型DNA病毒RNA病毒結(jié)構(gòu)特點(diǎn)雙鏈單鏈正鏈負(fù)鏈有包膜無包膜,病毒的分類,傳播方式和感染部位蟲媒病毒腸道病毒呼吸道病毒肝炎病毒性傳播病毒,亞病毒,亞病毒比病毒更小，更簡(jiǎn)單的病毒治病因子。衛(wèi)星病毒單鏈RNA（擬病毒）亞病毒類病毒單鏈環(huán)狀RNA分子朊病毒蛋白質(zhì),,病毒與細(xì)菌的比較,課堂作業(yè)疾病與病原體,1關(guān)于熱原質(zhì)，錯(cuò)誤的描述有A本質(zhì)是脂多糖B通過高壓蒸汽滅菌（121℃20MIN）可以破壞C主要由革蘭陰性菌產(chǎn)生D是細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物E采用高溫干烤可以破壞2細(xì)菌缺乏下列哪一種結(jié)構(gòu)仍可存活A(yù)細(xì)胞壁B細(xì)胞膜C細(xì)胞質(zhì)D核質(zhì)E以上均可3名詞解釋HOSPITALACQUIREDINFECTION4名詞解釋PHAGE5簡(jiǎn)答正常菌群什么情況下會(huì)變成條件致病菌6問答細(xì)菌的毒力包括哪些,第二章,病毒的復(fù)制與變異病毒的培養(yǎng),病毒的復(fù)制,病毒借助宿主細(xì)胞提供原料和能量，完成自我復(fù)制，產(chǎn)生子代病毒。即病毒的增殖。病毒的復(fù)制步驟（復(fù)制周期）可大致分為吸附ADSORPTION穿入PENETRATION脫殼UNCOATING生物合成BIOSYNTHESIS裝配ASSEMBLY釋放RELEASE,1吸附病毒表面蛋白與宿主細(xì)胞表面受體特異性結(jié)合。,包膜糖蛋白或衣殼蛋白與細(xì)胞表面受體特異性結(jié)合，決定了病毒嗜組織特異性。,2穿入包膜融合，病毒胞飲,,3脫殼,宿主細(xì)胞溶酶體酶破壞病毒衣殼，釋放病毒核酸,4生物合成,復(fù)制病毒核酸，轉(zhuǎn)錄MRNA，翻譯病毒蛋白質(zhì)。此過程不存在病毒體，只有病毒元件，稱為隱蔽期。DNA病毒DNA復(fù)制，合成蛋白質(zhì)RNA病毒/鏈雙鏈復(fù)制中間體逆轉(zhuǎn)錄病毒逆轉(zhuǎn)錄為DNA，整合至宿主染色體,逆轉(zhuǎn)錄,逆轉(zhuǎn)錄REVERSETRANSCRIPTION以RNA為模板合成DNA的過程，即RNA指導(dǎo)下的DNA合成。,HIV逆轉(zhuǎn)錄過程,HIV逆轉(zhuǎn)錄酶活性RNA依賴的DNA聚合酶活性RNASEH活性DNA依賴的DNA聚合酶活性但沒有3’?5’外切酶活性（無糾錯(cuò)功能，突變率高）,病毒基因組整合至宿主細(xì)胞染色體,HIV整合酶活性DNA外切酶活性雙鏈內(nèi)切酶活性連接酶活性,,裝配病毒核殼蛋白與核酸包裹，形成病毒體釋放無包膜病毒裂解細(xì)胞，子代病毒釋放有包膜病毒通過出芽方式，釋放子代病毒。帶走細(xì)胞核膜或細(xì)胞質(zhì)膜，作為自身包膜成分。,病毒生長(zhǎng)曲線,,,請(qǐng)觀看HIV1病毒復(fù)制周期FLASH，注意尋找病毒復(fù)制步驟。,,,病毒的異常增殖,頓挫感染ABORTIVEINFECTION缺損病毒DEFECTIVEVIRUS病毒干擾VIRALINTERFERENCE,病毒的變異,病毒變異類型突變基因重組表型重組,,,,,突變,突變的本質(zhì)突變類型條件致死性突變株（溫敏突變株）缺陷型干擾突變株宿主范圍突變株耐藥突變株突變株與變異株概念,,基因重組,兩個(gè)病毒基因組之間發(fā)生核酸水平上的互換和重新組合，形成兼有兩親代病毒特性的子代病毒。此過程為基因重組。重組時(shí)核酸分子斷裂，交叉連接，引起核酸分子內(nèi)部重新排列。分節(jié)段的RNA病毒基因組之間，兩個(gè)病毒株交換基因片段，稱為重配。,,表型重組,兩種病毒感染同一細(xì)胞時(shí)，各自產(chǎn)生不同的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，在子代病毒裝配時(shí)，出現(xiàn)互換衣殼和包膜蛋白時(shí)，表型會(huì)發(fā)生混合和交換。,,人工定向變異,改變宿主親嗜性冷適應(yīng)株或溫度敏感株基因重組基因改造突變,病毒的抵抗力,物理因素化學(xué)因素,病毒的培養(yǎng),易感動(dòng)物、雞胚或易感細(xì)胞,CPE（CYTOPATHICEFFECT）,D0,D15,D8,D5,D4,D3,D2,D1,D16,,,,,,,,,思考題,什么是病毒病毒有那些特點(diǎn)簡(jiǎn)述病毒的基本結(jié)構(gòu)。以HBV病毒為例，試述病毒的復(fù)制周期。解釋病毒的干擾現(xiàn)象、缺陷病毒、頓挫感染、亞病毒、朊粒。,THEEND,

簡(jiǎn)介：,病毒學(xué)研究方法,病毒培養(yǎng)方法形態(tài)學(xué)研究方法免疫學(xué)血清學(xué)方法生化、生物物理與分子生物學(xué)方法,1、體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)二十世紀(jì)中期動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的建立，極大推動(dòng)了動(dòng)物病毒學(xué)研究的發(fā)展原代成纖維細(xì)胞建株成纖維細(xì)胞上皮細(xì)胞,原代成纖維細(xì)胞建株成纖維細(xì)胞上皮細(xì)胞,PIGKIDNEYCELLSIBRS2GROWINGONCYTODEX1,VEROCELLSGROWINGONCYTODEX1,人二倍體細(xì)胞培養(yǎng),接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞72小時(shí),收毒第3天,,,,,,MDCK細(xì)胞,VERO細(xì)胞培養(yǎng),接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞48小時(shí),接種細(xì)胞60小時(shí),VERO細(xì)胞接種PEDV病毒病變過程照片,VERO細(xì)胞培養(yǎng),ST細(xì)胞,接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞48小時(shí),ST細(xì)胞,接種偽狂犬病毒病變過程照片,MARC145細(xì)胞,接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞38小時(shí),接種細(xì)胞50小時(shí),MARC145細(xì)胞,接種PRRSV病毒病變過程照片,PK15細(xì)胞,接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞36小時(shí),接種細(xì)胞48小時(shí),PK15細(xì)胞,接種TGEV病毒病變過程照片,MDCK細(xì)胞,接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞48小時(shí),接種細(xì)胞72小時(shí),MDCK細(xì)胞,接種H9N2病毒病變過程照片,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在病毒學(xué)中的應(yīng)用病毒生物學(xué)定量病毒克隆化獲得遺傳均一的病毒方便地生產(chǎn)病毒同步化研究病毒復(fù)制的過程，提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性,病毒的定量并非所有的病毒顆粒都有感染活性有感染活性的病毒顆粒一般僅占總數(shù)的幾百到幾萬分之一,病毒的定量病毒的定量分為物理顆粒的數(shù)量有感染活性的顆粒的數(shù)量有感染活性的顆粒的數(shù)量，更有生物學(xué)意義特稱為或TITRE病毒的效價(jià)TITERTITRE,病毒效價(jià)的測(cè)定（之一）空斑測(cè)試（PLAQUEASSAY）用稀釋的病毒液感染單層細(xì)胞，蓋上瓊脂，限制病毒的流動(dòng)病毒感染造成局部細(xì)胞死亡或病變，形成肉眼可見的“斑”或“空斑”（噬菌體中噬菌斑）根據(jù)“斑”的數(shù)量和稀釋倍數(shù)可以統(tǒng)計(jì)病毒的效價(jià),病毒空斑,未感染的細(xì)胞被染成紅色,病毒空斑,顯微鏡下的空斑帶有LACZ基因的重組病毒形成的空斑,病毒效價(jià)的測(cè)定（多孔板終點(diǎn)稀釋法）病毒逐級(jí)稀釋接入長(zhǎng)有細(xì)胞的孔中，培養(yǎng)后觀察各孔中細(xì)胞是否被感染，計(jì)算TCID50（TISSUECULTURE50INFECTIONDOSE一半的孔被感染時(shí)的稀釋度）,病毒效價(jià)的相對(duì)性用不同的細(xì)胞株去測(cè)定病毒的效價(jià)，可能會(huì)得到完全不同的效價(jià)數(shù)據(jù)需要標(biāo)準(zhǔn)化,病毒感染復(fù)數(shù)MULTIPLICITYOFINFECTION,MOI,病毒感染復(fù)數(shù)病毒感染細(xì)胞時(shí)平均每個(gè)細(xì)胞的病毒數(shù),1萬個(gè)細(xì)胞，為了保證99細(xì)胞感染病毒，至少有一個(gè)病毒感染，共需要多少病毒病毒感染細(xì)胞是隨機(jī)的獨(dú)立事件群體感染時(shí)，有的細(xì)胞被1個(gè)病毒粒子感染，有的被2個(gè)病毒粒子感染有的可能沒有被病毒感染病毒感染細(xì)胞的情況，符合泊松分布PKEMMK/K其中M病毒感染復(fù)數(shù)，PK細(xì)胞被K個(gè)病毒感染的幾率所以未被感染的細(xì)胞的比率P0EM被1個(gè)病毒感染的細(xì)胞比率P1EMM被2個(gè)病毒感染的細(xì)胞比率P2EMM2/2,,問題PFU與TCID50間的換算關(guān)系是1TCID5007PFU為什么,感染復(fù)數(shù)對(duì)病毒感染的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大影響低感染復(fù)數(shù)時(shí)感染不同步高感染復(fù)數(shù)時(shí)病毒易產(chǎn)生變異不同的實(shí)驗(yàn)要求不同的感染復(fù)數(shù),2、活體培養(yǎng)方法仍有許多病毒缺乏可供其復(fù)制的離體細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)如乙肝病毒，大多數(shù)植物病毒活體系統(tǒng)還可提供病毒與宿主相互作用的信息免疫反應(yīng)致病機(jī)理治療方法最常用活體系統(tǒng)之一雞胚,雞胚用于繁殖病毒、制備疫苗,雞胚的構(gòu)造和病毒培養(yǎng),流感病毒,單純皰疹病毒,病毒在雞胚中的繁殖流感病毒單純皰疹病,活體培養(yǎng)方法免疫缺陷動(dòng)物SCID小鼠）對(duì)病毒感染無免疫排斥可接入人的免疫細(xì)胞等，使之具有人的免疫功能，用于研究HIV、皰疹病毒等與免疫系統(tǒng)的相互關(guān)系SCIDSEVERECOMBINEDIMMUNODEFICIENT,二、病毒形態(tài)學(xué)研究方法1、光學(xué)顯微鏡病毒細(xì)小，一般光學(xué)顯微鏡下不可見但有時(shí)可見病毒聚集，或衍生形成的包涵體,狂犬病毒包涵體,病毒包含體,昆蟲桿狀病毒的多角體,2、電子顯微鏡,噬菌體負(fù)染，透射電鏡皰疹病毒感染細(xì)胞的超薄切片，透射電鏡,新的電鏡技術(shù)冰凍電鏡低輻射電鏡,冰凍電鏡圖像重構(gòu)技術(shù),冰凍電鏡解析病毒結(jié)構(gòu),一種綠藻病毒的冰凍電鏡重構(gòu),冰凍電鏡解析病毒結(jié)構(gòu),質(zhì)型多角體病毒冰凍電鏡圖,X射線晶體學(xué)通過X射線衍射研究病毒中原子、分子的排列,研究可形成晶體的病毒,熒光顯微鏡,新的熒光顯微鏡技術(shù)用于實(shí)時(shí)跟蹤AAV入侵的過程,三、免疫學(xué)方法病毒學(xué)與免疫學(xué)是密切相關(guān)的免疫技術(shù)在病毒學(xué)中的應(yīng)用利用抗原抗體反應(yīng)的專一性進(jìn)行病毒的檢測(cè)病毒的鑒定分型病毒的定量特異性抗體的監(jiān)測(cè),常用免疫學(xué)技術(shù)血球凝集試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）免疫印跡試驗(yàn)（WESTERNBLOT）免疫熒光組織化學(xué)免疫膠體金標(biāo)記免疫共沉淀,血球凝集試驗(yàn)?zāi)承┎《揪哂信c血細(xì)胞表面多糖分子結(jié)合的蛋白（基團(tuán)）。如流感病毒，風(fēng)疹病毒,補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)游離的補(bǔ)體可導(dǎo)致抗體包被的紅血球破裂溶血但當(dāng)有抗原抗體復(fù)合物存在時(shí)，補(bǔ)體就會(huì)與抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，可避免溶血。由此可檢測(cè)是否有特定的抗原或抗體存在,補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)測(cè)定特定抗原的量抗體（抗血清）與待測(cè)抗原樣品混合加入一定量的補(bǔ)體加入包被抗體的紅血球測(cè)定溶血,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）用酶標(biāo)記的抗體靈敏地定量檢測(cè)病毒抗原,ELISAENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAYA雙抗夾心B間接法,ELISA檢測(cè)抗體,A抗原E標(biāo)記酶S低物,四、生化、生物物理與分子生物學(xué)方法生物物理方法離心技術(shù)病毒顆粒分離純化病毒顆粒的大小、沉降系數(shù)測(cè)定生物化學(xué)方法病毒顆粒生物化學(xué)組分分析蛋白質(zhì)分析核酸分析其它組分分析,分子生物學(xué)方法舉例病毒反向遺傳學(xué)方法,從合成基因到合成病毒人工合成脊髓灰質(zhì)炎病毒,

簡(jiǎn)介：HIV1病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南_____________________________________________________________________1本指南由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室組織有關(guān)專家撰寫，由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心批準(zhǔn)執(zhí)行。編寫主持人編寫主持人蔣巖編寫人員編寫人員潘品良蔣巖李敬云鐘平尚紅李太生審核咨詢專家及技術(shù)人員邵一鳴康來儀朱效科王佑春汪寧朱紅郭志宏季陽(yáng)劉海林肖瑤邱茂鋒馬春濤編寫單位編寫單位中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心參編單位參編單位中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院上海市疾病預(yù)防控制中心中國(guó)醫(yī)科大學(xué)北京協(xié)和醫(yī)院技術(shù)顧問MIKEUSSERYHAOZHANG美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院過敏及傳染病研究所JAMESWBREMER美國(guó)RUSH大學(xué)醫(yī)學(xué)中心VQA實(shí)驗(yàn)室TREVERPETER克林頓基金中國(guó)艾滋病防治項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室專家DONALDJBRAMBILLA美國(guó)華盛頓大學(xué)新英格蘭研究所FRANCISFMY加拿大公共衛(wèi)生局疾病預(yù)防控制中心國(guó)家免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室HIV1病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南_____________________________________________________________________3HIV1HIV1病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南（病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南（20072007版）版）目錄目錄第一章總則第二章實(shí)驗(yàn)室設(shè)置第三章樣品的采集、處理、保存、運(yùn)輸?shù)谒恼鲁Ｓ肏IV1病毒載量檢測(cè)方法簡(jiǎn)介第五章室內(nèi)質(zhì)量控制第六章外部質(zhì)量控制第七章實(shí)驗(yàn)室生物安全附表1常見問題分析和處理附表2HIV1病毒載量檢測(cè)樣品送檢及接收單附表3HIV1病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證樣品接收專用單附表4HIV1病毒載量檢測(cè)報(bào)告單附表5HIV1病毒載量能力驗(yàn)證結(jié)果專用報(bào)告單（NASBA附表6HIV1病毒載量能力驗(yàn)證結(jié)果專用報(bào)告單（RTPCR參考文獻(xiàn)縮略語

簡(jiǎn)介：病毒,病毒能感染所有生物，如細(xì)菌、真菌、植物和動(dòng)物。人類80％的疾病是有病毒引起的。,各種病毒,甲型H7N9病毒,流行性感冒病毒,艾滋病毒,禽流感病毒,乙型肝炎病毒,煙草花葉病毒,SARS病毒,番茄病毒,病毒引起的疾病,麻疹是由病毒感染引起的；流行性感冒是由于感染了流行性感冒病毒；百日咳是由百日咳桿菌引起的兒童呼吸道傳染??；肝炎病毒會(huì)使人患肝炎；口蹄疫病毒會(huì)侵害動(dòng)物，人被傳染后會(huì)中毒發(fā)??；,由病毒感染引起的疾病,鼻炎，鼻竇炎，肺炎，氣管炎，支氣管發(fā)炎感冒時(shí)間長(zhǎng)了，就會(huì)導(dǎo)致以上的疾病,預(yù)防措施,病毒一般通過空氣、飲食、體液或接觸等途徑進(jìn)行傳播。因此我們要養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣。,春季學(xué)校常見傳染性疾病及預(yù)防措施,常見傳染性疾病流行性感冒、麻疹、水痘、腮腺炎、風(fēng)疹、猩紅熱等,預(yù)防措施1、合理膳食，增加營(yíng)養(yǎng)，多飲水，攝入足夠的維生素，積極參加體育鍛煉，增強(qiáng)體質(zhì)；2、教室、辦公室、宿舍等每天應(yīng)開窗通風(fēng)，，保持室內(nèi)空氣新鮮，并對(duì)教室、辦公室、宿舍等公共場(chǎng)所的室內(nèi)空氣和地面，墻壁、課桌椅等表面進(jìn)行定期消毒工作；3、養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣，飯前便后要洗手、不喝生水、不吃不潔凈的食物，把好“病從口入關(guān)”。合理安排好作息，做到生活有規(guī)律；注意不要過度疲勞，防止感冒，以免抗病力下降；4、做好相關(guān)傳染病疫苗接種工作。5、一旦發(fā)現(xiàn)傳染病病人，及時(shí)報(bào)告疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)。,病毒是一類怎樣的生物體,病毒是一種沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微生物。結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，所有病毒都由保護(hù)病毒蛋白質(zhì)外殼和由遺傳物質(zhì)組成的內(nèi)核組成，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；它們必須寄生在其他生物的活細(xì)胞里，病毒才能繁殖，繁殖出的新病毒從細(xì)胞中釋放出來，同時(shí)將細(xì)胞摧毀。離開了活細(xì)胞病毒就會(huì)變成結(jié)晶體失去生命活動(dòng)；病毒只能侵入或感染某些特定物種中的某些細(xì)胞，如大多數(shù)流感病毒只能侵染人的鼻和咽喉部。煙草花葉病毒只能侵染煙草的葉部。病毒個(gè)頭微小，觀察病毒大小用的是高分辯率電子顯微鏡，放大幾萬到幾十萬倍直接測(cè)量。,“病毒體”的五種形態(tài),1、球形。大多數(shù)人類和動(dòng)物病毒為球形，如脊髓灰質(zhì)炎病毒、皰疹病毒及腺病毒等。2、絲形。多見于植物病毒，如煙草花葉病病毒等。人類某些病毒（如流感病毒）有時(shí)也可形成絲形。3、彈形。形似子彈頭，如狂犬病病毒等，其他多為植物病毒。4、磚形。如痘病毒（無花病毒、牛痘苗病毒等）。5、蝌蚪形。由一卵圓形的頭及一條細(xì)長(zhǎng)的尾組成，如噬菌體。,根據(jù)病毒寄生的細(xì)胞不同，將病毒分為三類,,動(dòng)物病毒,植物病毒,細(xì)菌病毒（又叫噬菌體）,防治病毒的方法1藥物治療。2接種疫苗。3通過切斷病毒傳播途徑防止病毒的傳播。,課外拓展,查閱資料，了解人類與病毒的抗?fàn)幨贰Ｖ谱饔嘘P(guān)病毒的剪貼報(bào)。,

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簡(jiǎn)介：病毒學(xué)VIROLOGY,病毒的基本性狀,3000BC，埃及孟非思壁畫中長(zhǎng)老患小兒麻痹癥。,什么是病毒,病毒是一類體積微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、只含有一種類型的核酸、嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的、對(duì)抗生素不敏感，而對(duì)干擾素敏感的非細(xì)胞型微生物。,病毒與其它微生物的區(qū)別,第一節(jié)病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成,病毒體VIRION具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)和感染性的完整病毒顆粒。,一、病毒的大小和形態(tài)大小50－250NM左右。形態(tài)球形、桿狀或絲狀、磚形、子彈形、蝌蚪形等。,,,,,,,,,,,,,,,葡萄球菌1000NM）,,,,,,,,,牛痘病毒300250NM,A,B,C,D,E,F,G,立克次體450NM,,,衣原體390NM,A、大腸桿菌噬菌體6595NM,B、腺病毒70NM,C、脊髓灰質(zhì)炎病毒30NM,D、乙腦病毒40NM,E、蛋白分子10NM,F、流感病毒100NM,G、煙草花葉病毒,二、病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成基本結(jié)構(gòu)NUCLEOCAPSID輔助結(jié)構(gòu)VIRALENVELOPE,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,病毒體結(jié)構(gòu)模式圖,,,,殼粒,,,衣殼,,,核心（核樣物）,,,,,核衣殼,,包膜,,包膜病毒,,,,,包膜子粒（刺突）,化學(xué)組成－病毒核酸,分子量差別顯著3ＫＢ－400ＫＢ多種形式存在ＲＮＡ或ＤＮＡ；不同形式復(fù)制；病毒基因組可相互重疊，轉(zhuǎn)錄的ＲＮＡ前體可以多種方式拼接；與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)相似，有內(nèi)含子及非編碼區(qū)；具有感染性。,化學(xué)組成－病毒蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白CAPSID,ENVELOPEPROTEIN非結(jié)構(gòu)蛋白酶與病毒復(fù)制有關(guān)的酶；與致病有關(guān)的酶；調(diào)控蛋白HIVTAT,REVETC,病毒衣殼病毒20面體立體對(duì)稱模式圖,不同病毒核酸結(jié)構(gòu)不同，殼粒數(shù)目和排列也不相同。根據(jù)殼粒的排列方式稱為對(duì)稱，病毒結(jié)構(gòu)由以下幾種對(duì)稱型,ICOSAHEDRALSYMMETRY（二十面體立體對(duì)稱型）,,病毒衣殼螺旋對(duì)稱模式圖,病毒衣殼復(fù)合對(duì)稱模式圖,,衣殼的主要功能保護(hù)病毒核酸參與感染過程具有抗原性,病毒衣殼電鏡照片,病毒包膜電鏡照片,包膜的主要功能維護(hù)病毒體結(jié)構(gòu)的完整性與病毒入侵有關(guān)具有抗原性,第二節(jié)病毒的增殖,一、VIRUSREPLICATIONCIRCLE吸附ADSORPTION穿入PENETRATION脫殼UNCOATING生物合成BIOSYNTHESIS裝配與釋放ASSEMBLYANDRELEASE,1吸附ADSORPTION（幾分至幾十分鐘）,23PENETRATION、UNCOATING,融合有包膜病毒胞飲無包膜病毒直接穿入,,在溶酶體酶作用下，脫殼。,4生物大分子合成BIOSYNTHESIS（隱蔽期）,6大類型雙鏈DNA病毒單鏈DNA病毒單正鏈RNA病毒單負(fù)鏈RNA病毒雙鏈RNA病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒區(qū)域DNA病毒核內(nèi)（除痘病毒）RNA病毒胞質(zhì)（除流感病毒及逆轉(zhuǎn)錄病毒）,生物合成（以DSDNA為例）,親代DNAMRNA早期蛋白（酶）（功能蛋白）子代DNA子代MRNA晚期蛋白（結(jié)構(gòu)蛋白）子代病毒,,,,,,,,RNA病毒的生物合成,單正鏈RNAMRNA結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)蛋白中間復(fù)制體子代核酸單負(fù)鏈RNA正鏈RNA蛋白質(zhì)中間復(fù)制體子代核酸（依賴RNA的RNA多聚酶）,,,,,,,,逆轉(zhuǎn)錄病毒,病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄酶RNADNA中間體雙鏈DNA整合入細(xì)胞染色體子代病毒MRNA和子代核酸,,,,,57ASSEMBLY，MATURATION,ANDRELEASE,裝配（ASSEMBLY）,釋放（RELEASE）,裂解（DISINTEGRATION）NAKEDVIRUSCAUSETHEHOSTCELLLYSIS出芽（BUDDING）ENVELOPEDVIRUSES,二、病毒的生長(zhǎng)曲線,1、隱蔽期2、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期3、細(xì)胞死亡期,缺陷病毒因病毒基因組不完整或基因發(fā)生改變，而不能進(jìn)行正常增殖所產(chǎn)生的子代病毒。缺陷干擾顆粒DEFECTIVEINTERFERINGPARTICLE,DIP缺陷病毒，具有干擾同種成熟病毒體進(jìn)入細(xì)胞的作用。輔助病毒可以輔助缺陷病毒完成正常增殖的病毒。,三、與病毒增殖有關(guān)的異?，F(xiàn)象,,頓挫感染病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后，如細(xì)胞不能為病毒增殖提供所需要的酶、能量及必要的成分，則病毒在細(xì)胞中不能合成本身的成分，稱為頓挫感染。非容納細(xì)胞、容納細(xì)胞。干擾現(xiàn)象兩種病毒感染同一種細(xì)胞，常發(fā)生一種病毒抑制另一種病毒復(fù)制的現(xiàn)象，稱干擾現(xiàn)象。機(jī)制IFN、受體、DIP。,第三節(jié)理化因素對(duì)病毒的影響,一、物理因素的影響溫度大多數(shù)病毒耐冷不耐熱。在－70℃（數(shù)月）或－196℃（數(shù)年）條件下，病毒感染性可保持?jǐn)?shù)月至數(shù)年。一般加熱60℃經(jīng)30MIN或100℃數(shù)秒鐘可使大多數(shù)病毒滅活。PH值多數(shù)病毒在PH6～8范圍內(nèi)穩(wěn)定。射線和UV射線使核苷酸鏈發(fā)生致死性斷裂；UV則是在病毒的多核苷酸上形成雙聚體如胸腺核苷與尿核苷，抑制病毒DNA或RNA的復(fù)制。,二、化學(xué)因素的影響脂溶劑乙醚、氯仿、去氧膽酸鹽等脂溶劑可使有包膜病毒的包膜脂質(zhì)溶解而滅活病毒，失去吸附能力。消毒劑過氧乙酸、甲醛等均能使大多數(shù)病毒滅活。與細(xì)菌相比，病毒對(duì)消毒劑抵抗力強(qiáng)，特別是無包膜的小型病毒。中草藥板藍(lán)根、大青葉、大黃、貫仲和七葉一枝花等對(duì)某些病毒有一定的抑制作用。,第四節(jié)病毒分類動(dòng)物病毒,DNA病毒,RNA病毒,亞病毒一類比病毒還小的、結(jié)構(gòu)更簡(jiǎn)單的微生物。包括類病毒和PRION。,病毒的感染與致病機(jī)制,,第一節(jié)病毒的傳播方式和感染類型,,一、病毒感染,來源感染途徑傳播方式水平傳播垂直傳播,二、病毒感染的類型,機(jī)體感染病毒后1按有無臨床癥狀，可分為隱性感染和顯性感染。2依病毒感染后在機(jī)體內(nèi)滯留的時(shí)間長(zhǎng)短，分為急性感染和持續(xù)性感染。3持續(xù)性感染根據(jù)發(fā)展和預(yù)后又分為慢性感染、潛伏感染、慢發(fā)病毒感染和急性感染的遲發(fā)并發(fā)癥。,（一）隱性病毒感染與顯性病毒感染,1隱性病毒感染病毒進(jìn)入機(jī)體后不引起臨床癥狀的感染，對(duì)組織和細(xì)胞的損傷不明顯。相關(guān)因素病毒毒力弱、機(jī)體防御能力強(qiáng)、病毒種類、病毒的性質(zhì)。病毒仍可在體內(nèi)增殖并向外界播散病毒，可成為重要的傳染源。隱性感染者雖不出現(xiàn)臨床癥狀，但仍可獲得免疫力而終止感染。病毒攜帶者有部分隱性感染者一直不產(chǎn)生對(duì)此種病毒的免疫力叫病毒攜帶者，無癥狀，但病毒可在體內(nèi)增殖并向外界排泄播散，也是重要的傳染源。,有的病毒如天花病毒、麻疹病毒等進(jìn)入機(jī)體，到達(dá)靶細(xì)胞后大量增殖，使細(xì)胞和組織損傷，機(jī)體出現(xiàn)明顯的臨床癥狀，這樣的感染稱為顯性病毒感染或臨床感染；按癥狀出現(xiàn)早晚、持續(xù)時(shí)間的長(zhǎng)短以及病毒在體內(nèi)持續(xù)存在狀態(tài)等顯性感染又分為急性病毒感染和持續(xù)性病毒感染兩種。,2顯性病毒感染,（二）急性病原消滅型病毒感染,病毒侵入機(jī)體后，在細(xì)胞內(nèi)增殖，經(jīng)數(shù)日以至數(shù)周的潛伏期后突然發(fā)病。在潛伏期內(nèi)1、病毒增殖到一定水平，由靶細(xì)胞的損傷和死亡而導(dǎo)致組織器官的損傷和功能障礙，出現(xiàn)臨床癥狀。2、宿主動(dòng)員非特異性和特異性免疫因素清除病毒。宿主一般能在癥狀出現(xiàn)一段時(shí)間內(nèi)，把病毒清除掉而進(jìn)入恢復(fù)期。特點(diǎn)為潛伏期短，發(fā)病急，病程數(shù)日至數(shù)周。病后常獲得特異性免疫。因此，特異性抗體可作為受過感染的證據(jù)。,（三）持續(xù)性病毒感染,病毒可在機(jī)體內(nèi)持續(xù)存在數(shù)月數(shù)年數(shù)十年。可出現(xiàn)癥狀，可不出現(xiàn)癥狀而長(zhǎng)期帶病毒，成為重要的傳染源。持續(xù)性病毒感染有病毒和機(jī)體兩方面的因素機(jī)體免疫功能低下，無力完全清除病毒；病毒抗原性弱，機(jī)體難以產(chǎn)生免疫應(yīng)答以清除；病毒存在于受保護(hù)的部位或病毒發(fā)生突變,可以逃避宿主免疫作用；某些病毒的抗原性弱，難以產(chǎn)生免疫應(yīng)答；病毒基因整合在宿主細(xì)胞的基因組中，長(zhǎng)期與宿主細(xì)胞共存。,持續(xù)性感染有下述四種類型,1．潛伏性病毒感染LATENTVIRALINFECTION2．慢性病毒感染（CHRONICVIRALINFECTION）3．慢發(fā)病毒感染SLOWVIRUSINFECTION或稱遲發(fā)病毒感染DELAYEDVIRALINFECTION4．急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥（DELAYEDCOMPLICATIONAFTERACUTEVIRALINFECTION）,1潛伏性病毒感染,經(jīng)急性或隱性感染后，病毒基因組存在于一定組織或細(xì)胞內(nèi)，但并不能產(chǎn)生有感染性的病毒體。在某些條件下病毒被激活而急性發(fā)作，病毒僅在臨床出現(xiàn)間歇性急性發(fā)作時(shí)才被檢出。在非發(fā)作期，用一般常規(guī)法不能分離出病毒。例如，單純皰疹病毒Ⅰ型（HSV1）感染水痘帶狀皰疹病毒（VZV）感染,2慢性病毒感染,經(jīng)顯性或隱性感染后，病毒并未完全清除，可持續(xù)存在于血液或組織中并不斷排出體外，病程長(zhǎng)達(dá)數(shù)月至數(shù)十年?；颊呖杀憩F(xiàn)輕微或無臨床癥狀。如乙型肝炎病毒（HBV）、巨細(xì)胞病毒（CMV）及EB病毒（EBV）等常形成慢性感染。,3慢發(fā)病毒感染,病毒感染后潛伏期很長(zhǎng)可達(dá)數(shù)月、數(shù)年甚至數(shù)十年之久。此時(shí)機(jī)體無癥狀，也分離不出病毒。一旦發(fā)病出現(xiàn)慢性進(jìn)行性疾病，最終常為致死性感染。如AIDS、羊瘙癢病（SCRAPIE）、人克雅?。–JD）、庫(kù)魯病（KURU）等。庫(kù)魯病是朊病毒感染機(jī)體后，經(jīng)過長(zhǎng)達(dá)數(shù)十年的潛伏期后，引起的一種進(jìn)行性小腦退行性疾病。,4急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥,急性感染后1年或數(shù)年，發(fā)生致死性的病毒病。如亞急性硬化性全腦炎（SSPE）。該病是在兒童期感染麻疹病毒后，有些到青春期才表現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，用電鏡在腦組織中可查到類似麻疹病毒樣顆粒。有人認(rèn)為這是麻疹病毒的缺陷病毒。,第二節(jié)病毒的致病機(jī)制,病毒能否感染機(jī)體引起疾病取決于病毒的致病性病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖，導(dǎo)致宿主細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能改變，并擴(kuò)延到多數(shù)細(xì)胞，便可形成組織器官的損傷及功能障礙。宿主免疫力在病毒和機(jī)體細(xì)胞相互作用過程中，機(jī)體的免疫應(yīng)答有時(shí)也可對(duì)機(jī)體造成某些免疫病理性損傷，介導(dǎo)疾病的發(fā)生與發(fā)展。,一、病毒感染引起宿主細(xì)胞的變化,病毒對(duì)細(xì)胞的致病作用包括來自病毒的直接損傷和機(jī)體免疫病理應(yīng)答兩個(gè)方面。敏感的宿主細(xì)胞被病毒感染后，兩者相互作用下可表現(xiàn)為溶細(xì)胞作用穩(wěn)定狀態(tài)感染細(xì)胞凋亡包涵體的形成細(xì)胞增生和轉(zhuǎn)化病毒基因的整合,（一）溶細(xì)胞作用,病毒在宿主易感細(xì)胞內(nèi)增殖成熟后，短時(shí)間釋放大量子代病毒造成細(xì)胞破壞與死亡，這種作用稱殺細(xì)胞效應(yīng)，或稱為溶細(xì)胞作用。主要見于無包膜，殺傷性強(qiáng)的病毒。病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞變性、死亡裂解的作用稱病毒的細(xì)胞病變效應(yīng)（CYTOPATHICEFFECT,CPE）。,,病毒培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)的CPE,二穩(wěn)定狀態(tài)感染,一些不具有殺細(xì)胞效應(yīng)的病毒（多為有包膜病毒）所引起的感染稱穩(wěn)定狀態(tài)感染STEADYSTATEINFECTION。病毒在感染宿主細(xì)胞的過程中，對(duì)細(xì)胞代謝、溶酶體膜影響不很大。成熟的病毒多以出芽方式釋放出來，其過程緩慢、病變輕微，細(xì)胞暫時(shí)還不會(huì)出現(xiàn)裂解和死亡，但可發(fā)生宿主細(xì)胞膜受體被破壞、細(xì)胞膜成分發(fā)生變化，出現(xiàn)細(xì)胞融合及細(xì)胞表面產(chǎn)生新的抗原等。,1細(xì)胞融合感染與未感染的細(xì)胞融合，可以使病毒從感染的細(xì)胞直接進(jìn)入相鄰的正常細(xì)胞，有利于病毒在細(xì)胞間的擴(kuò)散。2細(xì)胞膜出現(xiàn)新抗原病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖過程中，將病毒基因編碼的蛋白質(zhì)插入細(xì)胞膜表面，導(dǎo)致細(xì)胞膜表面抗原的改變。有利于進(jìn)行病毒感染的診斷。,（三）細(xì)胞凋亡,細(xì)胞凋亡（CELLAPOPTOSIS）是由細(xì)胞基因自身指令發(fā)生的一種生物學(xué)過程。實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)有些病毒（腺病毒、人免疫缺陷病毒等）增殖可直接誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，也可通過病毒基因組編碼的蛋白質(zhì)間接作用下誘發(fā)細(xì)胞凋亡。,（四）包涵體的形成,某些受病毒感染的細(xì)胞內(nèi)，用普通光學(xué)顯微鏡可看到有與正常細(xì)胞結(jié)構(gòu)和著色不同的圓形或橢圓形斑塊，稱為包涵體（INCLUSIONBODYORIBCLUSION）。因病毒種類不同，包涵體有位于胞漿內(nèi)的痘病毒，也有在細(xì)胞核內(nèi)的皰疹病毒；或者兩者都有麻疹病毒；有嗜酸性的或嗜堿性的。包涵體的本質(zhì)①有些病毒的包涵體就是病毒顆粒的聚集體；②有些是病毒增殖留下的痕跡；③病毒感染引起的細(xì)胞反應(yīng)物?？勺鳛樵\斷依據(jù)和鑒定病毒的參考。如從可疑為狂犬病的腦組織切片或涂片中發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)有嗜酸性包涵體，即內(nèi)基小體NEGRIBODY，可診斷為狂犬病。,（五）細(xì)胞轉(zhuǎn)化增生和病毒基因組的整合,某些DNA病毒的全部或部分核酸，或RNA病毒基因組經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后產(chǎn)生的DNA，結(jié)合至細(xì)胞染色體中，稱為整合。整合作用可使細(xì)胞遺傳性狀發(fā)生改變，即轉(zhuǎn)化（TRANSFORMATION）。轉(zhuǎn)化的細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂失控，細(xì)胞可發(fā)生惡性變。,病毒的致腫瘤作用,DNA病毒（1）乙型肝炎病毒（HBV）與原發(fā)性肝癌有關(guān)；（2）EB病毒（EBV）與鼻咽癌、非洲兒童惡性淋巴瘤有關(guān)；（3）人乳頭瘤病毒（HPV）與子宮頸癌有關(guān)。RNA病毒只有逆轉(zhuǎn)錄病毒科與癌癥有關(guān)。人類T細(xì)胞白血病病毒HTLVI型。,二、病毒感染引起的機(jī)體變化,一組織器官的損傷及組織器官的親嗜性病毒對(duì)細(xì)胞的殺傷作用，在大多數(shù)情況下，必然導(dǎo)致組織和器官的損傷和功能障礙。病毒對(duì)人體組織的致病作用是有選擇性的。例如，流感病毒和鼻病毒對(duì)呼吸道粘膜有親嗜性；天花病毒和皰疹病毒對(duì)皮膚粘膜細(xì)胞有親嗜性；而腦炎病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒則對(duì)神經(jīng)組織具有親嗜性。,（二免疫病理?yè)p傷,1．體液免疫病理作用許多病毒如狂犬病病毒、HSV、流感病毒等有包膜病毒侵入細(xì)胞后，能誘發(fā)細(xì)胞表面出現(xiàn)新抗原。這種抗原與特異性抗體結(jié)合后，在補(bǔ)體參與下引起細(xì)胞的破壞。2．細(xì)胞免疫病理作用細(xì)胞免疫在某些病毒感染的恢復(fù)上起著重要作用。但特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞CTL可以同時(shí)損傷受病毒感染而出現(xiàn)膜新抗原的靶細(xì)胞。病毒蛋白亦可因與宿主細(xì)胞的某些蛋白間存在共同抗原性而導(dǎo)致自身免疫應(yīng)答。由于某些病毒可引起免疫病理性損傷，因此，一般在臨床上不宜應(yīng)用免疫功能增強(qiáng)劑治療這類疾病。綜上，病毒感染早期所致細(xì)胞損傷主要是病毒引起，感染后期由免疫復(fù)合物、補(bǔ)體活化、ADCC作用、CD4T細(xì)胞介導(dǎo)的復(fù)雜反應(yīng)引起機(jī)體局部組織器官的嚴(yán)重?fù)p傷和炎癥。,三病毒感染對(duì)免疫系統(tǒng)的影響,1．病毒感染引起的免疫抑制許多病毒感染可引起暫時(shí)性免疫抑制。如麻疹病毒、風(fēng)疹病毒、CMV等感染，急性期和恢復(fù)期患者外周血淋巴細(xì)胞對(duì)特異性抗原和促有絲分裂原PHA、CONA）的反應(yīng)減弱。同時(shí)，對(duì)結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)也出現(xiàn)轉(zhuǎn)陰的情況。2．病毒感染對(duì)免疫活性細(xì)胞的殺傷已發(fā)現(xiàn)引起AIDS的人類免疫缺陷病毒HIV）對(duì)輔助性T細(xì)胞CD4＋具有強(qiáng)親和性和殺傷性。因而在感染者出現(xiàn)CD4＋細(xì)胞減少，CD8細(xì)胞數(shù)相對(duì)增多，兩種細(xì)胞比值倒置的現(xiàn)象。3．病毒感染引起自身免疫性疾病隱蔽在細(xì)胞內(nèi)的一些抗原暴露或釋放出來；病毒抗原也可能與機(jī)體細(xì)胞結(jié)合，改變細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)成為“非已物質(zhì)”，這些細(xì)胞可成為靶細(xì)胞而受到免疫細(xì)胞和免疫因子的作用，從而發(fā)生自身免疫性疾病。,第三節(jié)抗病毒免疫ANTIVIRALIMMUNITY,干擾素,定義,由病毒或其他干擾素誘生劑刺激人或動(dòng)物細(xì)胞所產(chǎn)生的一類分泌性蛋白具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)活性。,,種類,種類產(chǎn)生細(xì)胞抗病毒免疫調(diào)節(jié)抗腫瘤?人白細(xì)胞強(qiáng)弱弱?人成纖維細(xì)胞強(qiáng)弱弱?T細(xì)胞弱強(qiáng)強(qiáng),抗病毒意義,抗病毒特點(diǎn),種的特異性、間接性、廣譜性,早期中斷病毒復(fù)制，阻止病毒擴(kuò)散,LYSISOFVIRUSINFECTEDCELLSBYCYTOTOXICEFFECTORCELLS,體液免疫,病毒中和抗體針對(duì)病毒某些表面抗原血凝抑制抗體血凝素補(bǔ)體結(jié)合抗體病毒內(nèi)部抗原或表面非中和抗原,HUMORALIMMUNITY,MECHANISMSOFVIRUSNEUTRALIZATIONBYANTIBODYATTHECELLULARLEVEL,EXTRACELLULARNEUTRALIZATIONOFVIRUSBYANTIBODY,ANTIBODYDEPENDENTCELLULARCYTOTOXICITYORADCC,細(xì)胞免疫,細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞直接殺傷靶細(xì)胞（細(xì)胞裂解、細(xì)胞凋亡）分泌多種細(xì)胞因子（IFN－GAMMA、TNF）等發(fā)揮抗病毒作用。TH1細(xì)胞,LYSISOFVIRUSINFECTEDCELLSBYCYTOTOXICEFFECTORCELLS,CELLMEDIATEDEVENTSINVIRALINFECTIONS,抗病毒免疫持續(xù)時(shí)間,牢固持久免疫力有病毒血癥的全身性病毒感染水痘、天花單一血清型的病毒感染乙型腦炎病毒短暫免疫力局部或粘膜表面感染流感病毒、鼻病毒多血清型病毒感染鼻病毒易發(fā)生抗原變異的病毒感染流感病毒,病毒感染的診斷與防治,常用的病毒學(xué)診斷方法包括病毒的分離鑒定病毒的血清學(xué)檢查病毒蛋白和核酸的檢測(cè),一、病毒感染的診斷,（一）標(biāo)本的采取與送檢,應(yīng)注意下列原則1對(duì)本身帶有雜菌如咽拭子、糞便或易受污染的標(biāo)本，要進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)使用抗生素。2因病毒在室溫中易失去活性，標(biāo)本應(yīng)低溫保存并盡快送檢。3血清學(xué)診斷標(biāo)本的采取應(yīng)在發(fā)病初期和病后2～3W內(nèi)各取1份血清，以便對(duì)比雙份血清抗體效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化。,（二）病毒的分離與鑒定,病毒的分離1動(dòng)物接種是最原始的病毒培養(yǎng)方法，根據(jù)病毒種類不同，選擇敏感動(dòng)物及適宜接種部位，如嗜神經(jīng)性病毒（狂犬病毒）可接種于小鼠腦內(nèi)，痘病毒可接種于家兔角膜或皮內(nèi)。,,2雞胚培養(yǎng)雞胚對(duì)多種病毒敏感。一般采用孵化9～14天的雞胚，根據(jù)病毒種類不同，將病毒標(biāo)本接種于雞胚的不同部位，最常用的雞胚接種部位有羊膜腔、尿囊腔、絨毛尿囊膜和卵黃囊等。,3組織培養(yǎng)法TISSUECULTURE或細(xì)胞培養(yǎng)CELLCULTURE法是將離體活組織塊或分散的組織細(xì)胞加以培養(yǎng)的技術(shù)總稱，為病毒分離鑒定中的最常用的基本方法。,細(xì)胞的變化有些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)可引起特有的細(xì)胞病變，稱為細(xì)胞病變效應(yīng)CYTOPATHICEFFECT，CPE。常見的變化有細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等。有些病毒如麻疹病毒、CMV、RSV等作用于細(xì)胞膜，可使鄰近的細(xì)胞相互融合，形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞。有些病毒如狂犬病病毒、麻疹病毒等可在培養(yǎng)細(xì)胞中形成胞漿或核內(nèi)的包涵體。,病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的指標(biāo),,病毒培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)的CPE,,2紅細(xì)胞吸附HEMADSORPTION,HAD流感或副流感病毒等感染細(xì)胞后，由于細(xì)胞膜上出現(xiàn)了血凝素HAEMAGGLUTININ,HA，具有吸附脊椎動(dòng)物豚鼠、雞、猴等紅細(xì)胞的能力，這一現(xiàn)象稱紅細(xì)胞吸附，常用來測(cè)定具有HA的粘病毒與副粘病毒的增殖。若有相應(yīng)的抗血清，則能中和細(xì)胞膜上的HA，HAD不再發(fā)生，稱紅細(xì)胞吸附抑制試驗(yàn)。,3干擾現(xiàn)象INTERFERENCE某些病毒感染細(xì)胞時(shí)不出現(xiàn)CPE或其他易于測(cè)出的變化如HAD，但能干擾在其后感染的另一病毒的增殖。如風(fēng)疹病毒感染VERO細(xì)胞時(shí)CPE不明顯，但它能干擾后感染的?？刹《綞CHOV的增殖，從而阻抑后者所特有的CPE。,4細(xì)胞代謝的改變病毒感染細(xì)胞的結(jié)果可使培養(yǎng)液的PH值改變，說明細(xì)胞的代謝在病毒感染后發(fā)生了變化。這種培養(yǎng)環(huán)境的生化改變也可作為判斷病毒增殖的指標(biāo)。,病毒的數(shù)量與感染性測(cè)定,空斑形成單位（PLAQUEFORMINGUNIT，PFU）限于用在有產(chǎn)生空斑能力的病毒。測(cè)定單層細(xì)胞培養(yǎng)中病毒裂解空斑的形成。50組織細(xì)胞感染量（50TISSUECULTUREINFECTIOUSDOSE，TCID50）引起50雞胚、動(dòng)物死亡或50的培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生CPE的最小病毒量。,（三）病毒感染的血清學(xué)診斷,原理是用已知病毒抗原來檢測(cè)病人血清中有無相應(yīng)抗體，故須待病人感染后體內(nèi)產(chǎn)生抗體時(shí)才能檢出。另外，在采取臨床標(biāo)本及病人血清應(yīng)注意病程，必須采取患者急性期血清與恢復(fù)期血清雙份血清進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)。若第2次血清抗體滴度比第1次高出4倍以上時(shí)，才有診斷意義。,（四）病毒感染的快速診斷,快速診斷主要是指從含有病毒標(biāo)本及感染機(jī)體的血清中檢測(cè)病毒顆粒、蛋白抗原、IGM抗體和核酸等，往往在數(shù)小時(shí)內(nèi)即可得出結(jié)果。,形態(tài)學(xué)檢查,1電鏡和免疫電鏡檢查2普通光學(xué)顯微鏡檢查有些病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖后，在細(xì)胞的一定部位胞核、胞漿或兩者兼有出現(xiàn)一個(gè)或數(shù)個(gè)、圓形或橢圓形、嗜酸性或嗜堿性的結(jié)構(gòu)，即包涵體。包涵體對(duì)病毒感染的診斷有一定價(jià)值。,病毒蛋白抗原檢查,用熒光素、放射性同位素、過氧化物酶等標(biāo)記抗體，采用免疫學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)，檢測(cè)標(biāo)本中的病毒蛋白抗原，具有敏感、特異、快速等優(yōu)點(diǎn)。1免疫熒光技術(shù)IMMUNOFLUORESCENCE,IF2固相放射免疫測(cè)定SOLIDPHASERADIOIMMUNOASSAY,SPRIA3酶免疫技術(shù)ENZYMEIMMUNOASSAY,EIA此法可檢測(cè)多種病毒及其抗體，主要是酶免疫組化法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法ELISA。,特異性IGM抗體的檢測(cè),檢測(cè)病毒特異性IGM抗體可診斷急性感染，特別是對(duì)證實(shí)孕婦感染風(fēng)疹病毒尤為重要，但應(yīng)注意類風(fēng)濕因子IGM的干擾。另外，檢測(cè)早期抗原的抗體是快速診斷的另一途徑。如檢測(cè)針對(duì)EBV的早期抗原EA、核心抗原EANA和衣殼抗原VCA等的抗體，可以區(qū)別急性或慢性EBV感染。此外，分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)、氣相色譜技術(shù)等，均可用來分析和鑒定病毒感染。,檢測(cè)病毒核酸,1核酸雜交技術(shù)用于病毒檢測(cè)的有斑點(diǎn)雜交、細(xì)胞內(nèi)原位雜交、DNA印跡雜交、RNA印跡雜交等。2核酸擴(kuò)增法目前多數(shù)病毒基因已通過分子克隆技術(shù)被明確了核苷酸序列，使得DNA擴(kuò)增技術(shù)逐步發(fā)展為常規(guī)診斷技術(shù)之一。3基因芯片技術(shù),,,病毒的快速診斷,光鏡包涵體,電鏡,免疫熒光,ELISA,分子生物學(xué)技術(shù),雜交,SOUTHERNBLOT,PCR,NORTHERNBLOT,,,,,,,,,,,,,,,二、病毒感染的防治,免疫預(yù)防,人工主動(dòng)免疫,滅活疫苗,乙腦疫苗,狂犬疫苗,流感滅活疫苗,HAV等,減毒活疫苗,脊髓灰質(zhì)炎疫苗,麻疹疫苗,腮腺炎疫苗,風(fēng)疹疫苗,HAV疫苗,其他疫苗基因工程疫苗，核酸疫苗，亞單位疫苗等,,,,,藥物防治,金剛烷胺抑制病毒脫殼預(yù)防感冒,核苷類藥物,病毒蛋白酶的抑制物INDINAVIR其他干擾素及干擾素誘生劑，中草藥抗病毒基因治療ASODN，ASON，核酶,皰疹凈，阿昔洛韋，AZT,,抗病毒藥物,特異性抗體治療性疫苗,免疫制劑,,,

簡(jiǎn)介：普通病毒學(xué),曾勇EMAILZY110CNYAHOOCOMCNCELLPHONE15053532606,教學(xué)參考書基礎(chǔ)病毒學(xué)莽克強(qiáng)，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年，第一版普通病毒學(xué)謝天恩、胡志紅，科學(xué)出版社、2002年，第一版獸醫(yī)微生物學(xué)陸承平，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2007年，第四版病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)傅繼華，山東科技出版社，2001年，第一版分子病毒學(xué)吳柏春，華中師范大學(xué)出版社，1999年病毒學(xué)概覽姜莉等譯，化學(xué)工業(yè)出版社，2006年HOWPATHOGENICVIRUSESWORKBASICVIROLOGYEDWARDKWAGNERMARTINEZJHEWLETT，BLACKWELLPUBLISHING,2004,SECONDEDITIONPRINCIPLESOFVIROLOGYFLINTSJ,ETAL2004,ASMPRESSSECONDEDITIONPRINCIPLESOFMOLECULARVIROLOGYCANNAJELSEVIERACADEMICPRESSFOURTHEDITION2005,課件下載煙臺(tái)大學(xué)網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)用戶名2009ZENGYONG密碼123,主要章節(jié),第一章導(dǎo)論病毒學(xué)概述第二章病毒的形態(tài)與結(jié)構(gòu)第三章病毒的分類與命名第四章病毒的侵染與復(fù)制第五章病毒的遺傳與變異第六章病毒與寄主的相互作用第七章病毒基因工程第八章幾種重要病毒的簡(jiǎn)介第九章病毒與腫瘤第十章病毒學(xué)技術(shù)第十一章病毒病的防治,國(guó)家規(guī)定強(qiáng)免（強(qiáng)制免疫）的疫苗是必須打的，即強(qiáng)制免疫的，也是免費(fèi)的，小孩日后入托、入學(xué)甚至出國(guó)都要憑打過的接種證辦理的。以下是規(guī)定強(qiáng)免的疫苗（2006年3月1日?qǐng)?zhí)行）出生時(shí)乙肝疫苗（第一次）、卡介苗1月齡乙肝疫苗（第二次）2月齡脊髓灰質(zhì)炎疫苗（第一次）3月齡脊髓灰質(zhì)炎疫苗（第二次）、百白破（第一次）4月齡脊髓灰質(zhì)炎疫苗（第三次）、百白破（第二次）5月齡百白破（第三次）6月齡乙肝疫苗（第三次）、A群流腦疫苗（第一次）8月齡麻疹疫苗（第一次）、乙腦疫苗（非活第一、二次）、（減活第一次）9月齡A群流腦疫苗（第二次）,18月齡百白破（第四次）、麻疹疫苗（第二次）2歲乙腦疫苗（非活第三次）、（減活第二次）3歲A群流腦疫苗（第三次）4歲脊髓灰質(zhì)炎疫苗（第四次）6歲乙腦疫苗（非活第四次）、（減活第三次）、A群流腦疫苗（第四次）、精白破（第一次）16歲精白破（第二次）還有一些疫苗不屬于強(qiáng)免范圍，如麻腮風(fēng)、風(fēng)疹、腮腺炎、肺炎、水痘等，都要收費(fèi)的，可自愿選擇打或不打。記住一點(diǎn),凡是收費(fèi)的疫苗都需要家長(zhǎng)簽名認(rèn)可,方可接種。,接種疫苗可以有效預(yù)防傳染病，但是在疫苗的接種過程中，由于多種原因，可能會(huì)發(fā)生極少數(shù)接種疫苗人出現(xiàn)不良反應(yīng)，在學(xué)術(shù)上叫做疫苗的相關(guān)病例。對(duì)于疫苗相關(guān)病例，國(guó)家將給予一定的補(bǔ)償。,由于中國(guó)使用的脊灰疫苗是減毒活疫苗，加上受種者個(gè)體差異等，兒童服用后有可能發(fā)生疫苗相關(guān)麻痹病例，但發(fā)生率極低，每250萬至1000萬孩子接種后，可能有1人出現(xiàn)接種后的麻痹甚至下身癱瘓等副反應(yīng)，這種副反應(yīng)主要發(fā)生在首次接種的兒童中。1994年，我國(guó)報(bào)告了最后1例本土脊髓灰質(zhì)炎病例，以后再無病例發(fā)生。2008年，衛(wèi)生部等部門聯(lián)合發(fā)布關(guān)于做好脊髓灰質(zhì)炎疫苗相關(guān)病例鑒定及善后處理工作的指導(dǎo)意見，承諾對(duì)因接種脊灰疫苗后出現(xiàn)相關(guān)小兒麻痹副反應(yīng)的兒童，由地方和衛(wèi)生部門相助，開展醫(yī)療鑒定、賠償。同年，北京市衛(wèi)生局等相關(guān)部門印發(fā)北京市疫苗預(yù)防接種異常反應(yīng)相關(guān)麻痹型脊髓灰質(zhì)炎病例補(bǔ)償辦法試行，其中提出，當(dāng)事人應(yīng)在出現(xiàn)癥狀滿2年后的1年內(nèi)，向北京市醫(yī)學(xué)會(huì)提出傷殘等級(jí)鑒定申請(qǐng)，補(bǔ)償費(fèi)用實(shí)行一次性結(jié)算，由市財(cái)政部門在預(yù)防接種工作經(jīng)費(fèi)中安排，最高可達(dá)24萬元。,第一章導(dǎo)論病毒學(xué)概述,第一節(jié)病毒學(xué)知識(shí)的起源及發(fā)展第二節(jié)病毒和病毒學(xué)第三節(jié)病毒的起源,本章重點(diǎn),1、了解病毒學(xué)發(fā)展歷程中的主要事件。2、病毒的基本特點(diǎn)。3、幾種亞病毒的定義。4、病毒性病原確定的標(biāo)準(zhǔn)。5、病毒的起源。,第一節(jié)病毒學(xué)知識(shí)的起源及發(fā)展,一、病毒學(xué)發(fā)展的動(dòng)力1、防治病毒性疾病2、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的重要模式生物,二、病毒學(xué)發(fā)展的歷史,1、經(jīng)驗(yàn)時(shí)期公元前1400年，古埃及象形文字就描述了一位司祭人員的病狀是典型的脊髓灰質(zhì)炎。,公元前1000年，中國(guó)已有天花發(fā)生，到公元1000年，宋真宗時(shí)代已有吸入病痂接種人痘預(yù)防天花的辦法，1796年英國(guó)人EDWARDJENNER提出接種牛痘預(yù)防天花。1966年世界衛(wèi)生組織提出對(duì)對(duì)接觸天花患者的人進(jìn)行計(jì)劃免疫；1977年10月索馬里最后一位患者治愈，宣布全世界消滅了天花病。,天花的種痘預(yù)防,1979年10月26日聯(lián)合國(guó)世界衛(wèi)生組織在肯尼亞首都內(nèi)羅畢宣布，全世界已經(jīng)消滅了天花病，并且為此舉行了慶祝儀式?，F(xiàn)在美國(guó)和俄羅斯的兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室（美國(guó)亞特蘭大的疾病控制中心、俄羅斯新西伯利亞的維克托實(shí)驗(yàn)室）還暫時(shí)保存有天花病毒。,在家畜的病毒病中，狂犬病的相關(guān)記載可能最早。巴斯德18221895法國(guó)著名科學(xué)家發(fā)明巴氏消毒法、1884年研制成功狂犬疫苗。,家蠶“高節(jié)”、“腳腫”郁金香碎色花病,2、病毒的發(fā)現(xiàn)時(shí)期,煙草花葉病1886年麥爾MAYER證明其有傳染性，但認(rèn)為是細(xì)菌。1892年伊萬諾夫斯基IVANOVSKI證明通過細(xì)菌濾器的汁液仍有致病性，但認(rèn)為是細(xì)菌毒素。,CHAMBERLAND氏濾器,1898年貝杰林克BEIJERINCK荷蘭著名科學(xué)家（麥爾的助手）A能通過細(xì)菌濾器B僅能在感染的細(xì)胞內(nèi)繁殖，在體外非生命的物質(zhì)中不能生長(zhǎng)C“有感染性的、活的物質(zhì)”，并將其命名為VIRUS,第一個(gè)動(dòng)物病毒的病例?？谔阋撸?898）德國(guó)細(xì)菌學(xué)家勒夫勒（LOEFFLER）和費(fèi)羅施（FROSH）發(fā)現(xiàn)引起?？谔阋叩牟≡部梢酝ㄟ^細(xì)菌濾器，從而再次證明伊萬諾夫斯基和貝杰林克的重大發(fā)現(xiàn)。證明高度稀釋的濾液可以再現(xiàn)疾病，否定了毒素說。第一個(gè)有關(guān)噬菌體的報(bào)道葡萄球菌噬菌體PHAGE來自希臘文，意指”吃”。,認(rèn)為病毒是一種與細(xì)菌類似的病原體，不同僅在于病毒必須在活細(xì)胞內(nèi)才能繁殖，體積很小，能通過細(xì)菌濾器，被稱為“超顯微的濾過性病毒”。,3、病毒本質(zhì)的研究時(shí)期,早期的工作證實(shí)病毒的活性與蛋白有關(guān)。1935年美國(guó)生物化學(xué)家斯坦利得到了TMV的蛋白晶體，晶體溶解后保持致病性。病毒是由蛋白質(zhì)和核酸組成，核酸可分為RNA和DNA兩種，核酸是感染、致病、復(fù)制的主體。,20世紀(jì)30年代的后期，電子顯微鏡的發(fā)展，進(jìn)一步促進(jìn)了病毒學(xué)的發(fā)展，證明病毒顆粒的內(nèi)部是核酸，外面包裹著蛋白質(zhì)。ELECTRONMICROGRAPHSOFHIGHLYPURIFIEDPREPARATIONSOFSOMEVIRUSESAADENOVIRUSBROTAVIRUSCINFLUENZAVIRUSCOURTESYOFGEORGELESERDVESICULARSTOMATITISVIRUSETOBACCOMOSAICVIRUSFALFALFAMOSAICVIRUSGT4BACTERIOPHAGEHM13BACTERIOPHAGE,4、病毒學(xué)發(fā)展中的主要成就,斯坦利（19041971）美國(guó)著名化學(xué)家，1935年提純了煙草花葉病毒，1946年獲得諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng),蒂勒（THEILERM）美國(guó)著名病毒學(xué)家，確證了黃熱病毒，成功地開發(fā)了減毒疫苗而榮獲1951年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,美國(guó)科學(xué)家恩德斯ENDERSJF、韋勒WELLERTH、羅賓斯ROBBINSFC因?qū)⒓顾杌屹|(zhì)炎病毒成功地在培養(yǎng)細(xì)胞中培養(yǎng)而榮獲1954年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),法國(guó)科學(xué)家雅各布JACOBF、利沃夫LWOFFAM、莫諾MONODJL因提出“操縱子”概念，預(yù)言了MRNA的存在，導(dǎo)致MRNA的證實(shí)，從而使遺傳密碼的實(shí)驗(yàn)研究得以開始，因而使分子遺傳學(xué)的整個(gè)體系得以建立，其意義十分深遠(yuǎn)。發(fā)現(xiàn)酶和病毒合成的遺傳控制機(jī)制獲1965年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,勞斯（PEYTONROUS18791970）美國(guó)著名病毒學(xué)家，證明病毒可引起動(dòng)物的癌癥，獲1966年諾貝爾生理學(xué)醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),德爾布呂克（DELBRUCKM）德國(guó)、赫爾希（HERSHEYA）美國(guó)、盧里亞（LURIAS）（意大利）因提出病毒的“一步生長(zhǎng)曲線”，發(fā)現(xiàn)病毒的復(fù)制機(jī)理與噬菌體的基因重組現(xiàn)象，證明遺傳物質(zhì)是DNA而不是蛋白質(zhì)，獲1969年諾貝爾生理學(xué)醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,巴爾的摩（BALTIMORED）（美國(guó)）、杜爾貝科（DULBECCOR）（意大利）、特明（TEMINHM）（美國(guó)）巴爾的摩和特明發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶，證明遺傳信息不僅由DNA到RNA，也可由RNA到DNA；杜爾貝科發(fā)現(xiàn)了腫瘤病毒和細(xì)胞遺傳之間的相互作用，他倡導(dǎo)了向細(xì)胞內(nèi)注入已知功能的單個(gè)病毒基因而不注入完整病毒的技術(shù)。獲1975年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,畢曉普（美國(guó)）JMICHAELBISHOP,瓦爾姆斯（美國(guó)）HAROLDEVARMUS,發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶病毒致癌基因的細(xì)胞起源，否定以前的看法癌基因必然源自病毒。獲1989年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,普魯西納（美國(guó)）（SBPRUSINER１９９７年諾貝爾醫(yī)學(xué)或生理學(xué)獎(jiǎng)、發(fā)現(xiàn)感染性蛋白子（PRION）,德國(guó)科學(xué)家哈拉爾德楚爾豪森（HARALDZURHAUSEN）,法國(guó)科學(xué)家弗朗索瓦絲巴爾－西諾西（FRAN?OISEBARRéSINOUSSI）,法國(guó)科學(xué)家呂克蒙塔尼（LUCMONTAGNIER）,德國(guó)科學(xué)家哈拉爾德楚爾豪森（HARALDZURHAUSEN）因發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤病毒引發(fā)子宮頸癌獲此殊榮，兩名法國(guó)科學(xué)家弗朗索瓦絲巴爾－西諾西（FRAN?OISEBARRéSINOUSSI）和呂克蒙塔尼（LUCMONTAGNIER）因發(fā)現(xiàn)人類免疫缺陷病毒獲此殊榮。,2008年度諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),美國(guó)12/21法國(guó)5/21德國(guó)2/21意大利2/21女科學(xué)家1/21,第二節(jié)病毒和病毒學(xué),一、病毒與其他微生物的區(qū)別要點(diǎn),二、病毒的特點(diǎn),①結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，不具細(xì)胞結(jié)構(gòu)，僅含一種核酸，DNA或RNA。②嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生，沒有新陳代謝機(jī)能，利用宿主細(xì)胞的酶、能量合成系統(tǒng)、核糖體、細(xì)胞因子、大分子以及病毒自身組分進(jìn)行自身繁殖。③在宿主細(xì)胞內(nèi)，子代病毒粒子由新合成的結(jié)構(gòu)組分進(jìn)行裝配而增殖。④純化的病毒可被結(jié)晶。⑤感染周期中組裝的子代病毒粒子在它們感染另外的宿主細(xì)胞時(shí)將病毒基因轉(zhuǎn)染給新的宿主細(xì)胞。⑥對(duì)一般抗生素和作用于微生物代謝途徑的藥物均不敏感。⑦絕大多數(shù)病毒在不同程度上對(duì)干擾素敏感。⑧有些病毒的核酸能整合到宿主細(xì)胞的DNA中，從而誘發(fā)潛伏性感染。,病毒的定義是一類比較原始的、有生命特征的、能夠自我復(fù)制和嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的非細(xì)胞生物。,三、病毒學(xué),病毒學(xué)作為一獨(dú)立的學(xué)科出現(xiàn)在20世紀(jì)50年代。它是一門在充分了解病毒的一般形態(tài)和結(jié)構(gòu)特征基礎(chǔ)上，研究病毒基因組的結(jié)構(gòu)與功能，探尋病毒基因組復(fù)制、基因表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制，從而揭示病毒感染、致病的分子本質(zhì)，為病毒基因工程疫苗和抗病毒藥物的研制以及病毒病的診斷、預(yù)防和治療提供理論基礎(chǔ)及其依據(jù)的科學(xué)。,研究病毒學(xué)的主要目的A預(yù)防疾病B利用病毒C作為模式生物，研究分子間的相互作用以及基因的復(fù)制、突變等D認(rèn)識(shí)生命的起源,四、病毒類型,根據(jù)寄主的不同植物病毒動(dòng)物病毒噬菌體,根據(jù)核酸的不同,單鏈DNA病毒雙鏈DNA病毒DNA與RNA反轉(zhuǎn)錄病毒雙鏈RNA病毒負(fù)鏈單鏈RNA病毒正鏈單鏈RNA病毒,根據(jù)病毒組成成分與復(fù)制方式的不同,（真）病毒EUVIRUS至少含有蛋白質(zhì)和核酸兩類物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)病毒與缺損病毒病毒在增殖過程中，由于病毒基因組因某種環(huán)境因素的影響或轉(zhuǎn)錄過程的錯(cuò)誤而發(fā)生的突變，以致有裝配不全的病毒顆粒產(chǎn)生，成為缺損病毒（DEFECTIVEVIRUSPARTICLE），又稱干擾缺損顆粒（DEFECTIVEINTERFERINGPARTICLESDI）（DI顆粒），必須依賴于其同源的完全病毒才能復(fù)制。許多病毒都有標(biāo)準(zhǔn)病毒與缺損病毒的兩重性，如脊髓灰質(zhì)炎病毒。假病毒與真病毒假型病毒（PSEUDOTYPEVIRUS）一種病毒的核酸被以另一種病毒編碼的外殼。假病毒或假病毒顆粒（PESUDOVIRION）由細(xì)胞的DNA片段被病毒的外殼包被形成。雜種病毒與純種病毒雜種病毒一種病毒顆粒中含有兩種病毒的遺傳物質(zhì)。,衛(wèi)星病毒SATELLITEVIRUS和衛(wèi)星核酸它們?nèi)鄙侏?dú)立復(fù)制的能力，需要輔助病毒HELPERVIRUS才能復(fù)制，或由輔助病毒提供外殼蛋白來包被核酸。其核酸序列大部分與輔助病毒不同，僅末端小段為同源。其中核酸編碼自己外殼蛋白的稱為衛(wèi)星病毒，否則稱為衛(wèi)星核酸SSDNA,SSRNA,DSRNA。類病毒VIROID它是最小的（240375BP）單鏈、環(huán)狀RNA；有獨(dú)力侵染、自主復(fù)制能力，無需輔助病毒；沒有外殼蛋白；其核酸不編碼任何蛋白。目前僅知類病毒侵染植物。朊病毒或朊粒PRION是一種不含有核酸的傳染性蛋白質(zhì)顆粒，能通過分子自身的構(gòu)想變化，并傳到其他分子引起同樣的變化而致病。,亞病毒SUBVIRUS,五、病毒性病害的確立,科赫法則（病毒不能用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖）1937年RIVERS法則A必須發(fā)現(xiàn)某種特異病毒以一定程度的規(guī)律與某種疾病有聯(lián)系，并從患病寄主中分離病毒。B在實(shí)驗(yàn)寄主或寄主細(xì)胞中培養(yǎng)。C證明培養(yǎng)物的濾過性。D在原始寄主或有關(guān)的種內(nèi)產(chǎn)生類似病害。E能重新分離出同一種病毒。,1973年EVANS提出免疫學(xué)證據(jù)A病毒必須存在于病人的組織、血液，并在該處反復(fù)出現(xiàn)。B能在實(shí)驗(yàn)室中很好地經(jīng)動(dòng)物或組織傳代。C在患病前期有規(guī)律地缺乏病毒特異抗體。D在疾病期間抗體有規(guī)律地出現(xiàn)。1暫時(shí)的病毒特異IGM抗體2持續(xù)的IGG抗體3局部抗體IGA在原發(fā)增殖部位E抗體的產(chǎn)生伴隨在相應(yīng)組織中存在病毒。F無類似有關(guān)的其他病毒或抗體。G能用特異性疫苗預(yù)防。,六、病毒生命形式的兩重性,病毒存在的兩重性細(xì)胞內(nèi)（核酸分子形式）細(xì)胞外（不顯示復(fù)制活性，保持感染活性，病毒體或病毒顆粒形式）病毒的結(jié)晶性與非結(jié)晶性結(jié)晶是很多無機(jī)化合物存在的一種形式,七、病毒研究的發(fā)展趨勢(shì),1988年，世界衛(wèi)生組織（WHO）提出2000年底全球消滅脊髓灰質(zhì)炎，計(jì)劃修訂到2008年。病毒功能基因組學(xué)和功能蛋白質(zhì)組學(xué)的研究朊病毒的研究DNA疫苗的研究病毒與宿主的相互作用及致病機(jī)制,第三節(jié)病毒的起源,病毒的起源有三類學(xué)說1）退化性起源學(xué)說退化性起源學(xué)說認(rèn)為病毒是細(xì)胞內(nèi)寄生物的退化形式。這種細(xì)胞內(nèi)寄生的產(chǎn)生原因可能是由于微生物對(duì)某種不能穿過細(xì)胞膜的代謝發(fā)生了嚴(yán)重依賴。退化性起源學(xué)說可以把病毒的起源解釋為兩個(gè)階段首先，寄生物在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生獨(dú)立復(fù)制的DNA質(zhì)粒，然后，編碼寄生物亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)單位的基因發(fā)生突變，形成病毒的衣殼蛋白。隨著進(jìn)化的發(fā)生，新獲得的可在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移的特性被進(jìn)一步選擇下來。,2）病毒起源于宿主細(xì)胞中的RNA和（或）DNA成分的學(xué)說這種學(xué)說認(rèn)為，病毒是正常的細(xì)胞組分在進(jìn)化過程中獲得了自主復(fù)制的能力獨(dú)立進(jìn)化而來的。該學(xué)說能解釋所有病毒的起源DNA病毒起源于質(zhì)粒或轉(zhuǎn)移因子；反轉(zhuǎn)錄病毒起源于反轉(zhuǎn)座子；RNA病毒起源于自主復(fù)制的MRNA。,3）病毒起源于具有自主復(fù)制功能的原始大分子的學(xué)說病毒起源于自主復(fù)制的RNA分子。核糖核酸多聚體具有自主復(fù)制的信息和能力。由于發(fā)現(xiàn)RNA分子具有催化化學(xué)反應(yīng)的能力使得RNA為生命和病毒的起源的學(xué)說變得更具有吸引力。小而簡(jiǎn)單的RNA分子具有至少下列三種化學(xué)功能①核糖核酸酶的活性；②能自我拼接去掉內(nèi)部的核酸序列；③有實(shí)驗(yàn)表明，以RNA作引物可以合成依賴于模板的多聚胞嘧啶核酸。RNA分子可以進(jìn)行復(fù)制和進(jìn)化相關(guān)的三個(gè)基本反應(yīng)。,這些觀察都有利于RNA是現(xiàn)今生物的進(jìn)化起源的學(xué)說。首先是RNA的形成和復(fù)制，然后演變出RNA蛋白介導(dǎo)的一系列反應(yīng)，第三步產(chǎn)生了DNA。DNA由于比RNA穩(wěn)定而最終成為遺傳信息。RNA的反應(yīng)性有利于它作為催化物而不利于它成為遺傳物質(zhì)。有些分子被包裝在細(xì)胞和組織中，形成宿主細(xì)胞，另一些分子則自我復(fù)制或寄生在宿主細(xì)胞中，進(jìn)化成為病毒。這一理論認(rèn)為病毒與宿主是共進(jìn)化的。現(xiàn)今的類病毒和衛(wèi)星RNA，仍保留有部分的RNA催化性能，因而被一些學(xué)者認(rèn)為是生命形式出現(xiàn)以前的RNA世界的化石。,研究病毒的進(jìn)化有多種方法，可以通過序列同源性、基因組排列順序、基因組的基因組成等方面構(gòu)建病毒的進(jìn)化樹。研究基因組成的演化對(duì)揭示基因的起源及病毒與宿主之間的關(guān)系具有重要意義。DNA病毒和RNA病毒相比相對(duì)穩(wěn)定。一方面，DNA復(fù)制時(shí)，其酶具有校正功能；另一方面，DNA病毒容易在宿主體內(nèi)形成持續(xù)性或慢性感染，它們可以在宿主體內(nèi)存在多年而后爆發(fā)，其間可能幾乎不發(fā)生變異，因此，這類病毒的變異速率可能表現(xiàn)得比裂解型病毒慢一些。一般來講，DNA病毒不會(huì)像RNA病毒那樣引起人類世界范圍的流行性疾病。RNA病毒引起的疾病流行和變異成為研究RNA病毒進(jìn)化，特別是進(jìn)化時(shí)間的良好素材。,相關(guān)病毒學(xué)研究單位,中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所武漢大學(xué)，病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中國(guó)疾病預(yù)防控制中心軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,習(xí)題,1列舉5例病毒學(xué)發(fā)展史上的突出成就2列舉5本有影響的病毒學(xué)雜志3病毒的特點(diǎn)4病毒基因組的特點(diǎn)5病毒性病原確立的標(biāo)準(zhǔn),

簡(jiǎn)介：病毒學(xué)研究方法簡(jiǎn)介,生物安全實(shí)驗(yàn)室,P1實(shí)驗(yàn)室研究的病毒危險(xiǎn)性較低，試驗(yàn)人員連口罩都不用帶，穿上白大褂就可以了，試驗(yàn)人員在這里很放松；P2實(shí)驗(yàn)室研究的是中度危險(xiǎn)的病原，像肝炎、流行性感冒等等，要求戴防護(hù)性較好的口罩；P3實(shí)驗(yàn)室研究的是高度危險(xiǎn)的病毒，傳染性很強(qiáng)，而且沒有疫苗，試驗(yàn)人員的保護(hù)措施要比P1/P2實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)密得多；P4實(shí)驗(yàn)室全球級(jí)別最高的生物安全實(shí)驗(yàn)室，研究的是極度危險(xiǎn)的病毒，如令人談之色變的埃博拉病毒、馬爾堡病毒，進(jìn)入這種實(shí)驗(yàn)室的工作人員，處于防護(hù)服的嚴(yán)密保護(hù)之下，連空氣都不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)呼吸，紅色螺旋狀管子，是專門用來向室內(nèi)輸送新鮮空氣的，試驗(yàn)人員一進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，要先屏住呼吸，馬上接上這種管子，然后才能呼吸。,,根據(jù)微生物及其毒素的危害程度不同，分為４級(jí)，一級(jí)最低，四級(jí)最高。,病毒學(xué)研究的主要方法,生物學(xué)特性測(cè)定在宿主上的反應(yīng)癥狀、傳播等病毒分離與培養(yǎng)提純與純化、二元培養(yǎng)法光鏡與電鏡觀察病毒粒子和病毒與相應(yīng)抗血清的特異免疫吸附情況免疫學(xué)技術(shù)以血清學(xué)和組織免疫化學(xué)方法檢測(cè)帶毒情況、多克隆抗體、單克隆抗體分子生物學(xué)技術(shù)核酸分子雜交、PCR等,一、生物學(xué)特性測(cè)定,在宿主上的反應(yīng)宿主范圍、癥狀表現(xiàn)、傳播方式等病毒的理化性質(zhì)病毒粒子的形態(tài)、大小、對(duì)理化因子的耐受性、體外存活期等病毒接種方法注射接種、病毒組織培養(yǎng)技術(shù)植物病毒汁液摩擦接種、昆蟲介體接種、嫁接接種、菟絲子接種法等,巨細(xì)胞病毒感染細(xì)胞的典型“貓頭鷹眼”樣核內(nèi)包涵體,冠狀病毒感染“非典”X線胸部檢查可見肺部不同程度的片狀陰影，少數(shù)病人進(jìn)展迅速，呈大片狀陰影，大多數(shù)為雙側(cè)改變，陰影吸收消散較慢。,TMVTRANSMISSIONBYANAPISSP,ASEVEREMOSAICSYMPTOMONTOMATOLEAFTMV,腿色斑CHLOROTICSPOTING,黃化YELLOWING,病毒檢測(cè),二、病毒的分離與鑒定,,提純EXTRACTION/純化PURIFICATION,病毒的分離與鑒定,病毒的提純是將宿主中的病毒粒子與宿主細(xì)胞組分區(qū)分開來的過程。原理是利用病毒的蛋白質(zhì)和大分子粒體的特性，及其與宿主細(xì)胞組分在理化特性上的差異將病毒粒子區(qū)分出來，并盡可能保持侵染力。目的是確切地研究病毒理化、生物學(xué)特性、化學(xué)組分、組成、增殖過程及機(jī)制，還可用于制備高效價(jià)的抗血清。,1953年，斯坦利第一次提取并結(jié)晶了TMV，這是病毒學(xué)史上一個(gè)重要的里程碑。,（一）病毒的純化與提純,,一般純化方法動(dòng)物病毒的純化從空斑、病斑分離，用終點(diǎn)稀釋法植物病毒的純化如確定是一種病毒，且可機(jī)械摩擦接種，則接種到適當(dāng)寄主上；如可能有多種病毒，則要嫁接傳染，先將病毒保存，然后試用蟲媒或其他方法分離。,二、病毒的分離與培養(yǎng),,,1、差速離心和密度梯度離心差速離心交替使用高速和低速離心高速離心（4000080000G）使病毒沉淀，取沉淀低速離心（約4000G）僅去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì)，取上清密度梯度離心部分或完全根據(jù)顆粒在一個(gè)無對(duì)流介質(zhì)中的密度而獲得分離蔗糖1040CSCL等,（三）病毒提純的技術(shù),二、病毒的分離與培養(yǎng),,,2、沉淀法簡(jiǎn)便快速但粗糙易變性鹽析法硫酸銨濃度達(dá)3050飽和度時(shí)多數(shù)病毒沉淀等電點(diǎn)沉淀加醋酸或鹽酸丙酮沉淀濃度達(dá)4070聚乙二醇沉淀濃度達(dá)48乙醇沉淀濃度達(dá)20沉淀植物蛋白，上清夜用硫酸銨沉淀3、吸附法磷酸鈣、離子交換樹脂、羧甲基纖維素4、酶處理許多病毒抗蛋白酶和核酸酶,（三）病毒提純的技術(shù),二、病毒的分離與培養(yǎng),,,5、有機(jī)溶劑萃取有機(jī)溶劑可溶掉脂肪、有色雜質(zhì)或非病毒的變性蛋白，如脊髓灰質(zhì)炎病毒提純中用正丁醇要考慮病毒對(duì)有機(jī)溶劑的耐受性,（三）病毒提純的技術(shù),,,,脂肪,變性非病毒蛋白,病毒,水,醇,,,,,,二、病毒的分離與培養(yǎng),,,6、電泳法普通電泳、密度梯度電泳、等電聚焦電泳等7、柱層析法吸附用離子交換或吸附法分子篩瓊脂糖或葡聚糖制成凝膠柱8、抗血清處理針對(duì)宿主蛋白的血清來沉淀雜蛋白加病毒的抗血清形成病毒抗體復(fù)合物,（三）病毒提純的技術(shù),二、病毒的分離與培養(yǎng),要證明某種疾病是某一感染因子所引起．則必須滿足RIVERS法則①?gòu)幕疾≌唧w內(nèi)分離出病毒；②在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或寄主細(xì)胞中可以培養(yǎng)；③證明這種培養(yǎng)物具有濾過性；④在原始宿主或相關(guān)種內(nèi)能產(chǎn)生同樣的病癥；⑤能重新分離出病毒。病毒的分離與鑒定組成了病毒學(xué)診斷技術(shù)的主體。病毒分離VIRUSISOLATION是診斷病毒感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”GOLDSTANDARD。,二、病毒的分離,病毒的分離,組織培養(yǎng)雞胚培養(yǎng)動(dòng)物接種,,組織培養(yǎng)原代細(xì)胞新鮮組織胰蛋白酶消化，分散培養(yǎng)液成單層細(xì)胞二倍體細(xì)胞株原代細(xì)胞傳代（為二倍體細(xì)胞）傳代細(xì)胞系腫瘤組織或二倍體細(xì)胞自發(fā)轉(zhuǎn)化（非整倍體）,二、病毒的分離與培養(yǎng),,卵黃囊接種用58D雞胚，以細(xì)長(zhǎng)針由氣室端刺入卵黃囊，孵育后收集卵黃囊膜檢查。常用于一些嗜神經(jīng)病毒羊膜腔用1214D雞胚，將檢材注入羊膜腔，孵育后取羊水檢查。常用于流感病毒的初次分離尿囊腔用912D雞胚，將標(biāo)本接種于尿囊腔，孵育后取尿囊液檢查。常用于培養(yǎng)流感病毒和腮腺炎病毒等絨毛尿囊膜用1012D雞胚，無菌下開一小窗，將材料滴在絨毛尿囊膜上，孵育后觀察膜上有無斑點(diǎn)病變。常用于培養(yǎng)單純皰疹病毒，天花病毒和痘病毒,雞胚接種,絨毛尿囊膜痘病毒特異性損傷,3動(dòng)物接種,常用動(dòng)物小鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猴等。不同病毒對(duì)動(dòng)物的敏感性不同，根據(jù)病毒種類加以選擇。接種途徑按病毒侵襲部位選擇相應(yīng)的接種途徑乙型腦炎病毒及狂犬病毒小鼠腦內(nèi)接種柯薩奇病毒乳鼠腹腔接種乙肝病毒黑猩猩靜脈注射流感病毒鼻腔滴種用途分離鑒定病毒，制備疫苗，制備抗血清,標(biāo)本制備濃縮標(biāo)本有以下幾種方法①超速離心離心的時(shí)間和速度取決于病毒顆粒的大小和離心機(jī)轉(zhuǎn)頭的半徑，一般是30MIN到3H．沉淀的樣本用滅菌蒸餾水洗后再放到銅網(wǎng)上；②超過濾法用于分子篩的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量為10000；③接種細(xì)胞接種細(xì)胞增殖病毒，然后快速包埋、切片；④免疫凝集如有特異抗血清，且病毒已知，也可用該法濃縮病毒,三、病毒的光鏡與電鏡觀察法,光鏡宿主組織切片、包涵體,三、病毒的電鏡觀察法,1、正染法（超薄切片法、病組織）將細(xì)胞用戊二醛固定，然后脫水、包埋、切片、染色、觀察病毒顆粒，通常12D完成。操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)，但樣品可長(zhǎng)期保存，可觀察病毒粒子形態(tài)與發(fā)生過程。2、負(fù)染法直接將病毒懸液也可用細(xì)胞滴在銅網(wǎng)上，用重金屬通常用磷鎢酸進(jìn)行染色，觀察病毒顆粒，1020MIN可出結(jié)果。原理負(fù)性染料不滲入病毒顆粒，而是將病毒顆粒包繞，由于負(fù)性染料含重金屬使電子束不能穿透，病毒顆粒具有亮度，在周圍暗背景上顯示亮區(qū)較正染法顯示的圖像清晰，可顯示病毒的結(jié)構(gòu)。缺點(diǎn)敏感性低，要求病毒量在107／ML以上，同科病毒難于鑒別。3、投影技術(shù)4、膠體金標(biāo)記技術(shù)、與免疫學(xué)技術(shù)結(jié)合等,采用幾種電鏡技術(shù)觀察病毒粒子的形態(tài),ORFVIRUS口瘡病毒接觸性膿皰皮炎,EBOLAVIRUS埃博拉病毒（正染技術(shù)）,VACCINIAVIRUS痘苗病毒（投影技術(shù)）,負(fù)染技術(shù),美國(guó)疾病控制和預(yù)防中心公布的一張未標(biāo)明日期的彩色電子顯微照片。它顯示出H5N1型禽流感病毒（金黃色）在MDCK細(xì)胞（綠色）培養(yǎng)液中的活動(dòng)狀態(tài),電鏡技術(shù)的應(yīng)用,研究病毒形態(tài)、鑒定觀察病毒的形態(tài)及形態(tài)發(fā)生學(xué)過程；亞顯微結(jié)構(gòu)；病毒與宿主細(xì)胞的關(guān)系；病毒感染細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)改變；病毒的分類等。診斷病毒病檢測(cè)不能在體外培養(yǎng)的病毒，如輪狀病毒、星狀病毒、嵌杯病毒、HAV等都是用電鏡最先發(fā)現(xiàn)的能進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)新的病毒和病毒病。,四、免疫學(xué)技術(shù),1、病毒抗原2、病毒抗體3、免疫學(xué)診斷方法免疫熒光法IF免疫酶法（ELISA）單克隆抗體技術(shù),血凝抑制（HI）試驗(yàn),血凝試驗(yàn)HA,瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),五、病毒抗原檢查,可檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)、外的游離病毒抗原。敏感、特異，簡(jiǎn)便、快速。適用于多種病毒性疾病的早期快速診斷。,INFLUENZAVIRUSA培養(yǎng)物DFA染色陽(yáng)性,生殖道HSV2涂片DFA染色陽(yáng)性,五、分子生物學(xué)技術(shù),,聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）核酸分子雜交SOUTHERNBLOT、NOUTHERNBLOT和WESTHERNBLOT蛋白質(zhì)組學(xué)基因組學(xué)核酸序列測(cè)定及基因功能基因工程抗病毒疫苗或抗病毒的大分子多肽、病毒載體,

簡(jiǎn)介：醫(yī)學(xué)病毒學(xué),MEDICALVIROLOGY,病毒是如何發(fā)現(xiàn)的,1886年MAYER證實(shí)了煙草花葉病的傳染性1892年IWANOWASKI證實(shí)其病原是一種新的病原因子。1896年BEIGERINK給這種病原起拉丁名叫VIRUS。,,FIGLEAFOFTOBACCOANDEMOFTOBACCOMOSAICVIRUS,臨床病毒學(xué)現(xiàn)狀,發(fā)病率高，傳染性強(qiáng)；人類部分腫瘤與病毒感染有關(guān)；某些病毒感染有致畸作用；其他一些疾病與病毒感染的關(guān)系；目前病毒感染的診療還相對(duì)滯后，部分尚缺乏有效疫苗；,病毒的概念,病毒（VIRUS）是一類體積微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，僅含一種類型核酸，必須在活的敏感細(xì)胞內(nèi)才能生長(zhǎng)繁殖的非細(xì)胞型微生物。,第二十三章病毒的基本性狀,,第一節(jié)病毒的形態(tài)第二節(jié)病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成,VIRION完整性?感染性,（一）大小測(cè)量單位為納米NM，最大的痘苗病毒為300NM，最小的脊髓灰質(zhì)炎病毒為30NM準(zhǔn)確測(cè)量方法電鏡ELECTRONMICROSCOPE,EM,,病毒體,,FIGEMOFINFLUENZAVIRUSSCALEBAR100NM,FIG1THECOMPARATIVESIZESOFREPRESENTATIVEVIRUSES,?300NM,?20NM,（二）形態(tài),（三）病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成,1基本化學(xué)組成,核酸蛋白質(zhì),2病毒的結(jié)構(gòu),裸病毒,,核心（核酸）,外披蛋白質(zhì)衣殼,,包膜,核衣殼,,包膜病毒,NAKEDVIRUSES,NEUCLEOCAPSID,ENVELOPEDVIRUSES,GENERALSTRUCTUREOFAVIRION,衣殼組成殼粒CAPSOMERES,殼粒,,數(shù)目,排列,,螺旋對(duì)稱型,20面體立體對(duì)稱型,復(fù)合對(duì)稱型,衣殼分為螺旋對(duì)稱型、20面體立體對(duì)稱型等,FIGAICOSAHEDRALSYMMETRYBHELICALSYMMETRY,FIGANICOSAHEDRALVIRUS,FIGAHELICALVIRUS,FIGEMOFCOMPLEXVIRUSESPOXVIRUSSCALEBAR100NM,包膜ENVELOPE糖脂,包膜子粒PEPLOMERE或刺突SPIKE,,3病毒核酸及功能,多樣性（1）核酸種類DNA/RNA（2）形態(tài)分類線形/環(huán)形；（3）單/雙；/；節(jié)段；（4）開放讀碼框OPENREADINGFRAME,ORF間可有基因重疊。,不分節(jié)段（脊髓灰質(zhì)炎病毒）RNAV分節(jié)段（RNA腫瘤病毒）SSRNA不分節(jié)段（副黏病毒）RNAVRNAV分節(jié)段（正黏病毒）DSRNA±RNAV分節(jié)段（呼腸病毒）SSDNADNAAAVDNAVDSDNA±DNAHSV,,,,,,,FIGOVERLAPPINGREADINGFRAMES,RNA病毒基因組的極性（1）RNA病毒的基因組可直接充當(dāng)MRNA的稱為‘POSITIVESTRANDED’（2）由新合成的RNA充當(dāng)MRNA的RNA病毒，其基因組稱為‘NEGATIVESTRANDED’,,核酸的功能,遺傳物質(zhì)／復(fù)制／變異；感染性核酸；檢測(cè)的物質(zhì)基礎(chǔ)；研究生命物質(zhì)的模型；分子生物學(xué)工具；,4病毒蛋白質(zhì)及功能,分類結(jié)構(gòu)蛋白衣殼、基質(zhì)或包膜等；非結(jié)構(gòu)蛋白調(diào)節(jié)蛋白、酶類等；功能結(jié)構(gòu)蛋白衣殼保護(hù)作用；抗原性；受體配體；細(xì)胞毒性；非結(jié)構(gòu)蛋白復(fù)制有關(guān)酶類；致病有關(guān)酶；調(diào)節(jié)蛋白等；部分可作檢測(cè)的靶點(diǎn)；,第三節(jié)病毒的增殖,VIRALMULTIPLICATION,一、病毒的復(fù)制周期（VIRALREPLICATIONCYCLE）,特點(diǎn)復(fù)制（自我復(fù)制SELFREPLICATION）病毒的復(fù)制周期（VIRALREPLICATIONCYCLE）病毒進(jìn)入敏感細(xì)胞后，以其基因組為模板，借助細(xì)胞中的原料、能量及場(chǎng)所合成自己的大分子（蛋白質(zhì)與核酸）以組裝子代病毒顆粒，最終按一定方式釋放出細(xì)胞。分為吸附和穿入、脫殼、生物合成、組裝成熟和釋放,吸附ABSORPTION,,?（受體－配體）,穿入PENETRATION,,,,融合ENVELOPEDVIRUSES,胞飲NAKEDVIRUSES,,脫殼UNCOATING,,?酶,生物合成BIOSYNTHESIS,,合成產(chǎn)物,,合成地點(diǎn),,,,裝配ASSEMBLY,,?場(chǎng)所,,釋放RELEASE,,裸病毒,殺細(xì)胞型,?,出芽型,?,（包膜病毒）,,FIGSCANNINGELECTRONMICROGRAPHOFVIRUSPARTICLESBUDDINGFROMTHECELLSURFACE,FIGTYPICALGROWTHCURVEOFAVIRUSCOMPAREDWITHTHATOFABACTERIUM,1吸附與穿入ABSORPTIONANDPENETRATION,吸附通過病毒的包膜或無包膜病毒表面的配體位點(diǎn)與細(xì)胞表面的特異受體結(jié)合而吸附，如脊髓灰質(zhì)炎病毒神經(jīng)系統(tǒng)，HIV病毒GP120TH（CD4）穿入包膜病毒包膜與宿主細(xì)胞膜融合無包膜病毒胞飲方式,2脫殼UNCOATING,病毒在細(xì)胞內(nèi)脫去衣殼后，核酸才可發(fā)揮指令作用，多數(shù)是在細(xì)胞的溶酶體酶作用下脫殼釋放出病毒基因組,3生物合成BIOSYNTHESIS,通過病毒基因組表達(dá)與復(fù)制來完成的，包括蛋白質(zhì)的合成與核酸的復(fù)制,此階段無完整病毒可見，也不能用血清學(xué)檢測(cè)出病毒的抗原，稱為隱蔽期發(fā)生在病毒核酸復(fù)制之前的轉(zhuǎn)錄稱為早期轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)物為早期MRNA，翻譯出早期蛋白；發(fā)生在病毒核酸復(fù)制開始或之后的轉(zhuǎn)錄稱為晚期轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)物為晚期MRNA，翻譯出晚期蛋白,早期蛋白EARLYPROTEIN是功能性蛋白質(zhì)，為病毒核酸復(fù)制提供酶類，參與調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞的自身代謝過程。晚期蛋白LATEPROTEIN主要是病毒的結(jié)構(gòu)蛋白，與病毒的形態(tài)構(gòu)成有關(guān)。,4裝配與釋放ASSEMBLYANDRELEASE,裝配部位可在核內(nèi)、胞質(zhì)內(nèi)、核膜、胞質(zhì)膜上無包膜病毒裝配成核衣殼即為成熟病毒體包膜病毒裝配成核衣殼后以出芽方式釋放，釋放時(shí)包有核膜或胞質(zhì)膜成為成熟病毒體,二、病毒實(shí)例1,DSDNAVHSV（１）DNA半保留復(fù)制；（２）根據(jù)病毒核酸復(fù)制時(shí)點(diǎn)將轉(zhuǎn)錄分為早期轉(zhuǎn)錄／晚期轉(zhuǎn)錄；,FIGREPLICATIONSTRATEGYOFADENOVIRUS,ADNAVIRUS,病毒實(shí)例2,SSRNAVPOLIOVIRUS（１）本身具有MRNA功能；（２）復(fù)制中間體（REPLICATIVEINTERMEDIATE,RI）；±RNA；（３）早、晚期轉(zhuǎn)錄時(shí)相似不明顯；多聚大蛋白；,FIGREPLICATIONSTRATEGYOFPOLIO,APOSITIVESTRANDEDRNAVIRUS,病毒實(shí)例3,RETROVIRUSHIV（１）逆轉(zhuǎn)錄酶；（２）復(fù)制中間體（REPLICATIVEINTERMEDIATE,RI）；RNADNA雜交體；（３）前病毒PROVIRUS；,三、病毒的異常增殖,宿主細(xì)胞方面的原因非容納細(xì)胞NONPERMISSIVECELLS頓挫感染ABORTIVEINFECTION病毒本身的原因缺陷病毒DEFECTIVEVIRUSES輔助病毒HELPERVIRUSES缺陷干擾顆粒DEFECTIVEINTERFERINGPARTICLE，DIP,四、病毒的干擾現(xiàn)象,當(dāng)兩種病毒同時(shí)感染同一細(xì)胞時(shí)，可發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象INTERFERENCE；機(jī)制可能為受體的占據(jù)或細(xì)胞代謝途徑改變；干擾素（INTERFERON產(chǎn)生,,,第四節(jié)理化因素對(duì)病毒的影響,滅活（INACTIVATION）失去感染性；但仍可保留其抗原性、紅細(xì)胞吸附等生物學(xué)功能；物理因素TMPH射線；化學(xué)因素脂溶劑；化學(xué)消毒劑；抗生素等；,病毒的遺傳和變異,1．病毒變異的類型遺傳型變異非遺傳型變異,,2病毒變異的機(jī)制,（１）遺傳型變異基因突變（GENEMUTATION）突變株（MUTANT）,,表現(xiàn)為宿主范圍、組織親嗜性、抗原成分、耐藥性、毒力等性狀改變；,Ⅰ自發(fā)突變SPONTANEOUSMUTATIONRNAV﹥DNAVⅡ誘發(fā)突變INDUCEDMUTATION理化方法；,條件致死性突變?nèi)鏣S突變株；高溫下TS變異株基因編碼的蛋白或酶失去功能；宿主范圍突變株HOSTRANGEMUTANT,HR改變了對(duì)細(xì)胞的吸附或相互作用街病毒→固定病毒；,耐藥突變株DRUGRESISTANTMUTANT病毒靶酶基因發(fā)生改變→耐藥；HIV→AZT變異株；基因重組GENETICRECOMBINATION形成兼有兩親代病毒特性的子代病毒；,基因重配GENETICREASSORTMENT,通過交換RNA節(jié)段而進(jìn)行的重組；,,（2）非遺傳型變異（基因產(chǎn)物的相互作用）Ⅰ互補(bǔ)作用；Ⅱ表型混合；,,第五節(jié)病毒的分類,分類原則1核酸類型與結(jié)構(gòu)2病毒體的形狀和大小3病毒體的形態(tài)結(jié)構(gòu)4對(duì)脂溶劑的敏感性現(xiàn)一般分為DNA病毒、RNA病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒三類。,其他,非尋常病毒1衛(wèi)星病毒SATELLITES基因組為5002000個(gè)核苷酸的單鏈RNA2類病毒VIROIDS基因組為200400個(gè)單鏈環(huán)狀RNA，有二級(jí)結(jié)構(gòu)，不含蛋白質(zhì)。3朊粒PRIONPROTEINACEOUSINFECTIONPARTICLES，蛋白侵染顆粒生物學(xué)地位待定。結(jié)構(gòu)僅由一種耐蛋白酶K的蛋白分子組成。,

簡(jiǎn)介：病毒,制作人張博張?bào)愫?病毒,什么是病毒病毒是什么樣子的病毒會(huì)引起哪些疾病怎么預(yù)防病毒的感染,什么是病毒,病毒是一種介于生物與非生物之間的一種原始的生命體。病毒個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，甚至沒有維持新陳代謝的基本結(jié)構(gòu)。病毒自身不能繁殖，必須借助宿主細(xì)胞才能繁殖。病毒能引起自然界中各種動(dòng)植物的多種疾病。截至目前，還沒有很好的抗病毒的藥物。,病毒長(zhǎng)得是什么樣子的,病毒的形態(tài)多種多樣，有球形的，有桿狀的，有絲狀的，有方形的，有子彈狀的，有蝌蚪狀的等等。絕大多數(shù)的動(dòng)物性病毒呈球形或者是類似球形。絕大多數(shù)植物性病毒呈絲狀和桿狀。還有一部分特殊形狀的病毒，比如狂犬病毒呈現(xiàn)子彈狀，噬菌體呈現(xiàn)蝌蚪狀。,球形病毒,桿狀病毒,絲狀病毒,特殊形狀的病毒,病毒的大小,病毒在普通的顯微鏡下是看不到的，必須借助電子顯微鏡才能看到。大多數(shù)病毒在100納米左右。（1納米等于十億分之一米）打個(gè)比方，簽字筆的筆尖大約在05毫米左右，病毒和筆尖比起來，就好像是人跟地球相比較。,病毒可以引起哪些疾病,流感手足口病乙型肝炎水痘艾滋病狂犬病小兒麻痹癥埃博拉,流感病毒,手足口病,,禽流感病毒,埃博拉病毒,病毒是怎樣傳播的,病毒的傳播途徑有很多種，主要通過一下幾種方式傳播呼吸道傳播流感水痘流行性腮腺炎消化道傳播手足口病病毒性肝炎血液傳播肝炎病毒艾滋病病毒接觸傳播肝炎病毒艾滋病病毒皰疹病毒其中，呼吸道傳播和消化道傳播是最主要的,怎樣預(yù)防病毒性疾病,鍛煉身體，提高身體的免疫力注射疫苗切斷病毒的傳播途徑,鍛煉身體，提高身體的免疫力,合理的飲食不挑食，多吃水果蔬菜，多吃豆制品，適量添加魚、肉、蛋，多喝水規(guī)律的體育鍛煉每天堅(jiān)持適量的運(yùn)動(dòng)良好的生活習(xí)慣按時(shí)作息，不熬夜。保持良好的心態(tài)養(yǎng)成樂觀、積極向上的良好心態(tài),注射疫苗,國(guó)家為預(yù)防某些特定傳染病的發(fā)生，制訂了國(guó)家免疫規(guī)劃。國(guó)家免疫規(guī)劃中的Ⅰ類疫苗共計(jì)14種，可以預(yù)防15種傳染病。Ⅰ類疫苗是每個(gè)兒童必須接種的。Ⅰ類疫苗也是完全免費(fèi)的。注射疫苗之后，我們的身體會(huì)產(chǎn)生針對(duì)某一種疾病的抗體。當(dāng)我們的身體接觸到這種病毒的時(shí)候，抗體就會(huì)把這種病毒殺滅、排出體外，保證我們的身體不會(huì)生病。,切斷病毒的傳播途徑,隔離傳染源如果我們得了傳染性疾病，最好在家中隔離，避免外出；外出時(shí)戴口罩，打噴嚏時(shí)要用手卷掩住口鼻。以免傳染給他人。防止被感染在疾病的高發(fā)季節(jié)，要避免到人群密集的地方。每天堅(jiān)持開窗通風(fēng)做好環(huán)境消毒正確的洗手，保持良好的個(gè)人衛(wèi)生,什么是正確的洗手方法,得了病毒性疾病怎么辦,到目前為止，還沒有很好的治療病毒性疾病的方法。如果我們得了病毒性的疾病，不要驚慌。一般的病毒性疾病經(jīng)過一段時(shí)間的發(fā)病期，都會(huì)自然痊愈。發(fā)病期間應(yīng)在家隔離治療，避免傳播給他人。多休息，多喝水，吃清淡的食物。聽從醫(yī)生的建議，對(duì)癥治療。,流行性感冒,流行性感冒是流感病毒引起的急性呼吸道感染，也是一種傳染性強(qiáng)、傳播速度快的疾病。流行性感冒是通過人與人之間通過咳嗽及打噴嚏時(shí)產(chǎn)生的呼吸道飛沫傳播。也可通過接觸表面沾有病毒的物件后再接觸口鼻而染病流行性感冒不同于普通的感冒。癥狀相對(duì)普通的感冒要嚴(yán)重。典型的癥狀是急起高熱、全身疼痛、顯著乏力和輕度呼吸道癥狀。一般秋冬季節(jié)是流行性感冒的高發(fā)期,流行性感冒的治療,臥床休息，多飲水，給予流質(zhì)或流質(zhì)飲食，適宜營(yíng)養(yǎng)，補(bǔ)充維生素，進(jìn)食后以溫開水或溫鹽水漱口，保持口鼻清潔，全身癥狀明顯時(shí)予抗感染治療。早期應(yīng)用抗病毒治療。流行性感冒是由流感病毒引起的，使用消炎藥（抗生素）治療無效。只有在出現(xiàn)細(xì)菌性感染的情況下抗生素治療才有效。,流行性感冒的預(yù)防,接種疫苗。注射流感疫苗是防范流感的最有效的武器勤開窗戶，保持生活、學(xué)習(xí)環(huán)境的空氣流通定期對(duì)生活學(xué)習(xí)環(huán)境消毒在呼吸道疾病流行期間，盡量減少到人員擁擠的公共場(chǎng)所勤洗手，注意防寒保暖，衣著適量隨氣候增減注意體育鍛煉，提高耐寒能力，增強(qiáng)體質(zhì)飲食合理，多吃蔬菜水果，保證足夠的營(yíng)養(yǎng)，多喝白開水避免與流感病人近距離接觸。戴口罩，做好個(gè)人防護(hù)。,預(yù)防傳染病小妙招,種疫苗，強(qiáng)免疫帶口罩，少聚集勤開窗，多通風(fēng)曬衣被，保清潔勤洗手，不招菌常鍛煉，增抗力學(xué)有時(shí)，樂有度多喝水，營(yíng)養(yǎng)豐有病歇，須隔離早求醫(yī)，對(duì)癥治,,,謝謝大家,

簡(jiǎn)介：?ACADEMICPRESS,2000,EVASIONOFIMMUNERESPONSESBYVIRUSES,INHIBITIONOFMHCIRESTRICTEDANTIGENPRESENTATIONCTLSCANONLYRESPONDTOFOREIGNANTIGENSPRESENTEDBYMHCICOMPLEXESONTHETARGETCELLANUMBEROFVIRUSESINTERFEREWITHMHCIEXPRESSIONORFUNCTIONTODISRUPTTHISPROCESSVIRUSINFECTIONSOFTHEEYEAREALSOQUITECOMMON,?ACADEMICPRESS,2000,THEALIMENTARYCANAL,VIRUSESMAYINFECTTHEALIMENTARYCANALVIATHEMOUTH,OROPHARYNX,GUT,ORRECTUM,ALTHOUGHVIRUSESWHICHINFECTTHEGUTVIATHEORALROUTEMUSTSURVIVEPASSAGETHROUGHTHESTOMACH,ANEXTREMELYHOSTILEENVIRONMENTWITHAVERYLOWPHGOODMEDICALPRACTICESUCHASTHESTERILIZATIONOFSURGICALINSTRUMENTSVACCINATION,WHICHMAKESUSEOFTHEIMMUNESYSTEMTOCOMBATVIRUSINFECTIONSMOSTOFTHEDAMAGETOCELLSDURINGVIRUSINFECTIONSOCCURSVERYEARLY,OFTENBEFORETHECLINICALSYMPTOMSOFDISEASEAPPEARTHISMAKESTHETREATMENTOFVIRUSINFECTIONVERYDIFFICULT,THEREFORE,INADDITIONTOBEINGCHEAPER,PREVENTIONOFVIRUSINFECTIONISUNDOUBTEDLYBETTERTHANCURE,?ACADEMICPRESS,2000,VIRUSVACCINEDESIGN,TODESIGNEFFECTIVEVACCINES,ITISIMPORTANTTOUNDERSTANDBOTHTHEIMMUNERESPONSETOVIRUSINFECTIONTHESTAGESOFVIRUSREPLICATIONTHATAREAPPROPRIATETARGETSFORIMMUNEINTERVENTIONTOBEEFFECTIVE,VACCINESMUSTSTIMULATEASMANYOFTHEBODYSDEFENCEMECHANISMSASPOSSIBLEINPRACTICE,THISUSUALLYMEANSTRYINGTOMIMICTHEDISEASE,WITHOUTOFCOURSECAUSINGPATHOGENESISFOREXAMPLE,THEUSEOFNASALLYADMINISTEREDINFLUENZAVACCINESORALLYADMINISTEREDPOLIOVIRUSVACCINESTOBEEFFECTIVE,ITISNOTNECESSARYTOGET100UPTAKEOFVACCINEHERDIMMUNITYRESULTSFROMTHEBREAKINTRANSMISSIONOFAVIRUSWHICHOCCURSWHENASUFFICIENTLYHIGHPROPORTIONOFAPOPULATIONHASBEENVACCINATEDTHISSTRATEGYISMOSTEFFECTIVEWHERETHEREISNOALTERNATIVEHOSTFORTHEVIRUS,EGMEASLES,INPRACTICEISTHESITUATIONTHATUSUALLYOCCURSSINCEITISIMPOSSIBLETOACHIEVE100COVERAGEWITHANYVACCINE,?ACADEMICPRESS,2000,DNAVACCINES,THESEARETHENEWESTTYPEOFVACCINECONSISTOFONLYADNAMOLECULEENCODINGTHEANTIGENSOFINTERESTPOSSIBLY,COSTIMULATORYMOLECULESSUCHASCYTOKINESTHECONCEPTBEHINDTHESEVACCINESISTHATTHEDNACOMPONENTWILLBEEXPRESSEDINVIVO,CREATINGSMALLAMOUNTSOFANTIGENICPROTEINWHICHSERVETOPRIMETHEIMMUNERESPONSESOTHATAPROTECTIVERESPONSECANBERAPIDLYGENERATEDWHENTHEREALANTIGENISENCOUNTEREDINTHEORY,THESEVACCINESCOULDBEMANUFACTUREDQUICKLYSHOULDEFFICIENTLYINDUCEBOTHHUMORALCELLMEDIATEDIMMUNITY,?ACADEMICPRESS,2000,SUBUNITVACCINES,THESECONSISTOFONLYSOMECOMPONENTSOFTHEVIRUS,SUFFICIENTTOINDUCEAPROTECTIVEIMMUNERESPONSEBUTNOTENOUGHTOALLOWANYDANGEROFINFECTIONINGENERALTERMS,THEYARECOMPLETELYSAFE,EXCEPTFORVERYRARECASESINWHICHADVERSEIMMUNEREACTIONSMAYOCCURUNFORTUNATELY,ATPRESENT,THEYAREALSOTHELEASTEFFECTIVEMOSTEXPENSIVETYPEOFVACCINESTHEMAJORTECHNICALPROBLEMSASSOCIATEDWITHSUBUNITVACCINESARETHEIRRELATIVELYPOORANTIGENICITYTHENEEDFORNEWDELIVERYSYSTEMS,SUCHASIMPROVEDCARRIERSADJUVANTSTHEREARESEVERALCATEGORIESOFSUCHVACCINESSYNTHETICVACCINES,SUCHASSHORT,CHEMICALLYSYNTHESIZEDPEPTIDESRECOMBINANTVACCINES,PRODUCEDBYGENETICENGINEERINGVIRUSVECTORS,IERECOMBINANTVIRUSGENOMESGENETICALLYMANIPULATEDTOEXPRESSPROTECTIVEANTIGENSFROMUNRELATEDPATHOGENICVIRUSES,?ACADEMICPRESS,2000,INACTIVATEDVACCINES,PRODUCEDBYEXPOSINGTHEVIRUSTOADENATURINGAGENTUNDERPRECISELYCONTROLLEDCONDITIONSTHEOBJECTIVEISTOCAUSELOSSOFVIRUSINFECTIVITYWITHOUTLOSSOFANTIGENICITYINACTIVATEDVACCINESHAVECERTAINADVANTAGES,SUCHASGENERALLYBEINGEFFECTIVEIMMUNOGENSIFPROPERLYINACTIVATED,BEINGRELATIVELYSTABLE,CARRYINGLITTLEORNORISKOFVACCINEASSOCIATEDVIRUSINFECTIONIFPROPERLYINACTIVATEDITISNOTPOSSIBLETOPRODUCEDINACTIVATEDVACCINESFORALLVIRUSES,SINCEDENATURATIONOFVIRUSPROTEINSMAYLEADTOLOSSOFANTIGENICITY,EGMEASLESVIRUSALTHOUGHRELATIVELYEFFECTIVE,KILLEDVACCINESARESOMETIMESNOTASEFFECTIVEATPREVENTINGINFECTIONASLIVEVIRUSVACCINES,OFTENBECAUSETHEYFAILTOSTIMULATEPROTECTIVEMUCOSALCELLMEDIATEDIMMUNITYTOTHESAMEEXTENTTHESEVACCINESMAYCONTAINVIRUSNUCLEICACIDS,WHICHMAYTHEMSELVESBEASOURCEOFINFECTION,EITHEROFTHEIROWNACCORDEGSENSERNAVIRUSGENOMESORAFTERRECOMBINATIONWITHOTHERVIRUSES,