玉米行粒相關(guān)蛋白(ZmSTKR)互作蛋白的篩選與驗證.pdf

1、玉米雌穗上的籽粒數(shù)目由其分化的小花數(shù)目決定，實際籽粒數(shù)即穗粒數(shù)是由正常發(fā)育且授粉的小花數(shù)決定;而玉米雌花序發(fā)育過程中的各類分生組織的啟始與分化活性的保持，都影響著雌性小花分化數(shù)目，進而最終影響穗粒數(shù)。因此，控制玉米雌花序各類分生組織的啟始與分化活性的基因均可能與行粒數(shù)的形成密切相關(guān)。本課題組前期已獲得了一個影響玉米行粒數(shù)的基因，該基因編碼一個絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶受體(serine/threonine protein kinase re

2、ceptor)，暫時命名為ZmSTKR。本研究利用酵母雙雜技術(shù)篩選與ZmSTKR互作的蛋白，并對篩選到的蛋白及預(yù)測的可能互作蛋白利用酵母雙雜技術(shù)進行點對點驗證和雙分子熒光互補驗證;通過分段雜交確定ZmSTKR功能域;結(jié)合以上實驗結(jié)果解析ZmSTKR作用機理，為深入分析該基因功能、闡明其作用機理奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.以ZmSKTR為誘餌蛋白篩選酵母雙雜文庫，經(jīng)序列分析共得到105條可用序列。其中，20條序列編碼跨膜運

3、輸相關(guān)的蛋白，占19％;核糖體蛋白（2個核糖體大亞基蛋白，16個核糖體小亞基蛋白）和熱激蛋白的編碼序列分別有18和15條，分別占17.1％和14.3％;蛋白激酶和蛋白磷酸解相關(guān)的蛋白編碼序列分別為4條和2條;泛素連接酶編碼序列3條。去除冗余序列，共獲得64個UniGene基因。
　　2.基于ZmSTKR與玉米行粒數(shù)相關(guān)的假說，本實驗分析了10個花序發(fā)育相關(guān)蛋白(TE1，LG2，ZmPIN1，F(xiàn)EA2，BIF2，TB1，BD1，BA