仔豬抗菌肽PR-39基因表達隨日齡的變化及不同鋅源對其表達的影響.pdf

1、浙江大學碩士學位論文仔豬抗菌肽PR39基因表達隨日齡的變化及不同鋅源對其表達的影響姓名：林文學申請學位級別：碩士專業(yè)：動物營養(yǎng)與飼料科學指導教師：汪以真許梓榮200305012003年浙江大學碗士學位論文仔豬抗菌肽PR一39基因表達隨豳齡的變化及不同鋅源對其表達的影響摘要本謙麓先以t、14、28、本2、S6罄齡懿子豬為試驗對象，駁RTPCR法失撿測手段，研究不鄹墨齡《孑豬摭蘺肽PR39基因表達的變化援律。根據(jù)已報道的豬抗菌肽PR39和看

2、家基因8。肌動蛋白(pactin)基因序列，分別設計PR39和Bactin朗引物，探討了PCR體系中適窟的MgCl2濃度、循環(huán)次數(shù)以及兩對引物間競爭情況。試驗揭示MgCl2適宜的濃度為25mmol／L，循環(huán)次數(shù)為29。稷瓣兩對琴l鐫之聞豹雜交鬻鼴，分澍進行了擴耀。穩(wěn)建了後純懿RTPCR法，用于仔豬抗菌默PR39基因mRNA襲達量的測寇。試駿紿果發(fā)現(xiàn)，仔豬顳奶廚PR，39mRNA表達攮有較大的變化。仔豬剮出生時PR39相對于pactin的

3、mRNA表達量平均為O45，14R齡時上升為O74，28門齡時上升為0，88，42E1齡時(斷奶聰7天)下降為022，56弱齡時上畀到230。挑選96頭36fjj齡社長嘉斷奶仔豬，分成處理l(對照組)、處理2、處理3、處理4甄個組(每個組設3個整復，每個重復8頭豬，公母各半)。蕊碥疆糧相同(消化能1325MJ／Kg，羊且蛋自185％)，處理1日糧中不添加任何鋅源，處理2、3、4分剮飼喂醵硫酸鋅、氯化鋅和納米輟傀鋅的澎式添嬲100mg／k

4、g、3000mg&g、100mg／kg鎊豹鑭糧。鞭試期燕7天，鍶養(yǎng)菠試襄必】5天。試驗豬充分喂斟(邂疆洶次)，竇由飲水。15天后按體重胡近的要求，從每綴磊選3頭，共12頭，屠宰，淑左腿股骨骨髓，從骨髓組織中提敷總RNA，反轉(zhuǎn)錄成eDNA保存。采用已構(gòu)建的優(yōu)化RTPCR法，邋當調(diào)整循環(huán)數(shù)的參數(shù)，檢測各處理組群懿中PR39稽對于pacfin靜mRNA表達量。鑭莠試驗縫果表明：與對照緩鞠魄，處理3(添擻3000mg／kgZn的ZnO組)丑增重