抗菌肽PR-39在兔骨髓間充質干細胞中的分泌表達及抗菌活性檢測.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：通過構建包含脯氨酸精氨酸抗菌肽（proline-arginine rich39-amino acid peptide，PR-39）的慢病毒載體，轉染兔骨髓間充質干細胞（bone mesenchymal stem cells，BMSC），并檢測其在BMSC中的表達及抗菌活性。
　　 方法：PCR擴增目的基因，連接入慢病毒載體質粒pGC-FU中，與包裝質粒pHelper1.0、pHelper2.0在脂質體2000介導下轉染29

2、3T細胞包裝出慢病毒顆粒，Real-Time PCR檢測滴度；分離培養(yǎng)BMSC，并用PR-39慢病毒載體轉染BMSC，熒光顯微鏡觀察和流式細胞儀檢測轉染效率，RT-PCR法檢測目的基因的表達情況，同時檢測PR-39抗菌活性。
　　 結果：成功得到滴度為2×109 TU/ml的PR-39慢病毒顆粒，并成功轉染BMSC，轉染72h后觀察到細胞呈現綠色熒光，流式細胞儀檢測到其轉染效率為74.09％，RT-PCR檢測到BMSC中有PR-

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