低毒病毒CHV1-EP721基因組序列的測(cè)定及侵染性全長(zhǎng)cDNA克隆的構(gòu)建.pdf_第1頁(yè)
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1、該研究通過逆轉(zhuǎn)錄構(gòu)建了CHV1-EP721的cDNA文庫(kù)并測(cè)定了其全基因組序列.序列對(duì)比分析顯示:CHV1-EP721與已測(cè)序的低毒病毒CHV1-Euro7和CHV1-EP713相比在核苷酸水平上的同源性平均為99％和90%;氨基酸水平上的同源性平均為98%和92%.用合適的內(nèi)切酶輔助,精確連接全基因組的cDNA片段構(gòu)建了CHV1-EP721具有侵染性的全長(zhǎng)cDNA克隆p721.p721的體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物成功轉(zhuǎn)染無病毒的板栗疫病菌野生菌株E

2、P721(-)、EP155和Euro7(-).檢測(cè)CHV1-EP721對(duì)不同宿主表型的影響以及在不同宿主中的累積量,結(jié)果顯示感染了CHV1-EP721的不同宿主的表型相似,都和野生帶毒菌株EP721表型一樣菌體呈白色,可以產(chǎn)生少量分生孢子;并且在不同的宿主中CHV1-EP721的累積量沒有明顯的區(qū)別.這表明病毒累積量少是CHV1-EP721病毒本身決定的.CHV1-EP721的侵染性克隆的獲得,為進(jìn)行影響低毒病毒累積量的病毒基因的分析以

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