鵝源新城疫病毒ZJ1株全基因組序列的測(cè)定及含該毒株全基因組cDNA的轉(zhuǎn)錄載體的構(gòu)建.pdf

1、新城疫病毒(NDV)是最重要的動(dòng)物病原體之一,可感染多種禽類(lèi)造成嚴(yán)重疾病.到目前為止,NDV的B1、Lasota、Clone-30、Beaudette C、HB V4等毒株的全基因序列已在GenBank上公布,其長(zhǎng)度均為15186nt.NDV基因組全長(zhǎng)序列的測(cè)定導(dǎo)致該病毒反向遺傳學(xué)的誕生,為基因組各基因結(jié)構(gòu)和功能研究以及新疫苗的研制開(kāi)辟了新的道路.自1997年以來(lái),在中國(guó)的華東及華南一些地區(qū)中出現(xiàn)由新城疫強(qiáng)毒所致的鵝的嚴(yán)重臨床疾病,引起

2、從業(yè)者和研究者的廣泛注意,因?yàn)轾Z以往被認(rèn)為是對(duì)NDV不敏感的禽類(lèi).該研究對(duì)一個(gè)NDV鵝源2000年分離株(ZJ1)進(jìn)行了全基因組序列測(cè)定,發(fā)現(xiàn)它的基因組全長(zhǎng)為15192nt,比上述已報(bào)道的5個(gè)毒株的基因組全長(zhǎng)多了6個(gè)核苷酸.我們確定了該6核苷酸的位置,并對(duì)其它具有不同遺傳及流行病學(xué)背景的17個(gè)NDV毒株是否在基因組的相同位置多6個(gè)核苷酸進(jìn)行了研究.該文還構(gòu)建了一個(gè)含該毒株(ZJ1)全基因組cDNA的轉(zhuǎn)錄載體和3個(gè)表達(dá)質(zhì)粒.1 鵝源新城疫

3、病毒ZJ1株全基因組序列測(cè)定及比較分析 2 新城疫病毒不同遺傳背景毒株NP基因5′末端的序列分析和新城疫病毒各基因的遺傳進(jìn)化 3 含鵝源新城疫病毒ZJ1株全基因組cDNA的轉(zhuǎn)錄載體及分別含NP、P和L基因的表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建 結(jié)論:1 完成了鵝源新城疫病毒ZJ1株全基因組的序列測(cè)定,其全基因序列長(zhǎng)15192nt,比NDV毒株B1、Beaudette C,Lasota,B1,Clone-30及HB V4株的全基因序列長(zhǎng)6個(gè)核苷酸,該6核苷酸位

4、于相對(duì)于NDV毒株B1、Beaudette C,Lasota,B1,Clone-30及HB V4株基因組的1647nt~1648nt位.2 所測(cè)的NDV基因VI~X型毒株在基因組的1646nt~1647nt位之間均多出6個(gè)核苷酸,而所測(cè)的基因I型~V型毒株則沒(méi)有該特征,6堿基的出現(xiàn)是NDV進(jìn)化中一個(gè)較早期的事件.3 完成了一個(gè)含NDV ZJ1株全基因組cDNA的轉(zhuǎn)錄載體及分別含NP、P和L基因的表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建,為制備感染性cDNA克隆和