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文檔簡介
1、在Genebank中搜索到與擬南芥中支持煙草花葉病毒復制的基因TOM1序列具部分同源的馬鈴薯EST序列.用特異性引物和RACE方法,從馬鈴薯(F-28-1)中克隆到與擬南芥AtTOM1基因具同源性的馬鈴薯PTOM1基因,PTOM1全長cDNA有1257個堿基對,編碼245個氨基酸,是一個含有五個跨膜區(qū)結構的蛋白.PTOM1 cDNA與擬南芥AtTOM1 cDNA有59.1%的同源性.二者的編碼產物有70.3%的同源性.為了研究PTOM1
2、基因在RNA病毒侵染馬鈴薯過程中的作用,構建了以下一系列的植物表達載體和病毒表達載體:(1)將PTOM1 cDNA反義構建于表達載體;(2)將PTOM1cDNA分為兩段分別構建RNA干涉質粒;(3)用基因組PTOM1基因片段構建反義表達載體;(4)將PTOM1 cDNA反義構建于病毒表達載體PTV00.將用上述方法得到的表達載體導入農桿菌并用于侵染馬鈴薯得到轉基因馬鈴薯植株,PCR檢測表明外源基因已整合入馬鈴薯染色體上.同時,我們建立了
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