2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、本研究采用本課題組分離鑒定的豬圓環(huán)病毒分離株P(guān)CV2WHN,設(shè)計(jì)一對(duì)引物,用PCR擴(kuò)增出PCV2的ORF2基因,并克隆到pUCm-T載體上,測(cè)序得ORF2基因全長(zhǎng)705bp,編碼234個(gè)氨基酸?! ∮肒pnI和BamHI雙酶切的方法處理pUCm-PCV-ORF2和真核表達(dá)載體pcDNA3.1(+),進(jìn)行連接反應(yīng),轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109,酶切和PCR鑒定結(jié)果表明,成功構(gòu)建了真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA-PCV-ORF2。用堿裂解法提取并純化真

2、核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA-PCV-ORF2?! ∮谜婧吮磉_(dá)質(zhì)粒pcDNA-PCV-ORF2免疫小鼠(第一次免疫后兩周進(jìn)行第二次免疫),用間接ELISA方法檢測(cè)免疫抗體的結(jié)果表明,第一次免疫后一周產(chǎn)生抗體,二免后,小鼠的抗體水平迅速上升,在第4周達(dá)到高峰,其后緩慢下降,可持續(xù)11周以上。  用PCR檢測(cè)了pcDNA-PCV-ORF2的機(jī)體組織器官中的動(dòng)態(tài)分布。表明,首免后3h到28d小鼠的各種組織器官中均能擴(kuò)增出目的基因片段。在第44d腦

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