小鼠胚胎生殖細胞的分離與培養(yǎng).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、　　本研究以昆明白小鼠胎兒為材料，從原始生殖細胞分離培養(yǎng)出EG細胞，并進行傳代培養(yǎng)和鑒定，對影響胚胎生殖細胞(EG)分離與培養(yǎng)的因素進行了探討，為進一步建立昆明白小鼠EG細胞系奠定了基礎(chǔ)。主要實驗結(jié)果如下：1)從8.5～12.5dpc的昆明白小鼠胎兒分離培養(yǎng)胎兒原始生殖細胞，最高傳至9代。2)試驗比較了不同分離方法對小鼠胎兒原始生殖細胞分離的影響，發(fā)現(xiàn)分次消化分離效果好于一次消化。3)試驗比較了不同傳代方法對小鼠胚胎生殖細胞細胞傳代的影

2、響，發(fā)現(xiàn)“消化+機械離散法”，“消化+吹打法”和“消化+連續(xù)離散法”均可用于EG細胞的傳代。“消化+連續(xù)離散法”和“消化+吹打法”操作簡單，省時省力，也能夠很好的保持細胞的增殖活力。4)試驗以三種培養(yǎng)液培養(yǎng)小鼠PGCs，在原代培養(yǎng)時，都能克隆出EG細胞集落，小鼠胎兒肝細胞條件培養(yǎng)液可以支持小鼠PGCs的生長和增殖；而在傳代過程中，以含LIF1000IU/mL組培養(yǎng)效果最好，其次是小鼠胎兒肝細胞條件培養(yǎng)液，未添加細胞因子的EG細胞培養(yǎng)液組

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