ATRA影響結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞化療藥物敏感性及Survivin基因表達(dá)的研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文ATRA影響結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞化療藥物敏感性及Survivin基因表達(dá)的研究姓名：胡寶光申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：衛(wèi)洪波20070520中山大學(xué)碩士學(xué)位論文ATRA影響結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞化療藥物敏感性及Survivin摹因表達(dá)的研究表藥物的誘導(dǎo)分化聯(lián)合化療用于結(jié)直腸癌治療町行性，并對(duì)結(jié)腸癌Lovo細(xì)胞內(nèi)Survivin的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)，分析其分子生物學(xué)機(jī)制，為該方案的進(jìn)一步臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法與

2、結(jié)果一、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度ATRA作用后L0vo細(xì)胞的周期分布情況：實(shí)驗(yàn)方法：結(jié)直腸癌LoVo細(xì)胞傳代培養(yǎng)至80％融合時(shí)，傳代并接種至A、B、C、D四個(gè)培養(yǎng)瓶中，分設(shè)對(duì)照組、10一、10擊、10刁molATRA組，當(dāng)各組細(xì)胞培養(yǎng)至指數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)換液，分別加入RPMI1640培養(yǎng)液及含有相應(yīng)濃度ATRA的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，分別于培養(yǎng)后24hr、48hr、72hr、第5天、第7天、傳二代、傳四代后收集各組培養(yǎng)瓶中的LoVo細(xì)胞，消化并制備

3、單細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度在l106／ml。依試劑盒說(shuō)明書加入相應(yīng)藥物，上機(jī)進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)，細(xì)胞周期分析顯示細(xì)胞周期分布，計(jì)算SPF值。并將數(shù)據(jù)輸入SPSSll0forWindows系統(tǒng)，應(yīng)用單因素方差分析(OneWayANOVA)進(jìn)行分析。結(jié)果：(1)對(duì)照組中在不同時(shí)間點(diǎn)GO／GI期細(xì)胞比例有顯著差異(P005)，72hr后不同時(shí)間點(diǎn)G0／G1期細(xì)胞比例有顯著性差異(PO05)，10‘濃度組與lO5及101濃度組120hr內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)

4、G0／G1期細(xì)胞比例有顯著性差異(PO05)，傳代后各濃度組在各時(shí)間點(diǎn)的G0／G1期細(xì)胞比例有顯著性差異(P005)。結(jié)論：不同濃度的ATI認(rèn)作用后，Go／Gl期的LoVo細(xì)胞比率增高，S期與G2／M期的細(xì)胞比率相應(yīng)降低，隨時(shí)I丑J延長(zhǎng)，G0／GI期細(xì)胞比例逐漸下降：72hr內(nèi)lO巧及10南濃度組G0／GI期細(xì)胞比例高于對(duì)照組及104組，而lO巧及l(fā)O。6組該期細(xì)胞比例無(wú)明顯差異。可以考慮選擇10擊moFLATRA作用48hr作為聯(lián)合用