結(jié)腸癌中HSP90β的表達(dá)意義以及與化療敏感性的關(guān)系.pdf

1、目的:結(jié)腸癌是消化系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，目前首選治療方式主要采用手術(shù)切除為主化學(xué)藥物和放射治療為輔的綜合治療。在化療過程中，腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的不敏感是導(dǎo)致化療失敗的主要原因，從而導(dǎo)致腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。熱休克蛋白(heat shock protein，HSP)作為分子伴侶對(duì)于細(xì)胞生長、發(fā)育和調(diào)節(jié)過程有著重要作用，是一組具有廣泛而重要生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)。熱休克蛋白90β(HSP90β)作為熱休克蛋白家族的一員，是導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞耐藥的因素

2、之一。本研究通過觀察HSP90β在正常結(jié)腸組織和結(jié)腸癌組織中表達(dá)情況的差異及其與腫瘤病理分級(jí)、Duke’s分期之間的關(guān)系，研究HSP90β與結(jié)腸癌發(fā)生、發(fā)展之間的聯(lián)系；通過對(duì)比結(jié)腸癌親本細(xì)胞與耐藥細(xì)胞中HSP90β mRNA的表達(dá)差異，初步闡明HSP90β與結(jié)腸癌細(xì)胞化療藥物耐藥的相關(guān)性。 方法:收集中南大學(xué)湘雅醫(yī)院普通外科和肝膽腸外科2005年1月至2005年12月手術(shù)切除的結(jié)腸癌組織標(biāo)本72例，癌旁正常組織30例，運(yùn)用免疫組

3、織化學(xué)染色方法觀察HSP90β在結(jié)腸癌組織以及癌旁正常組織的表達(dá)情況，分析HSP90β的表達(dá)水平與結(jié)腸癌組織的病理分級(jí)、Duke's分期之間的關(guān)系。MTT 法檢測結(jié)腸癌親本細(xì)胞HCT-8和耐藥細(xì)胞HCT08/VCR對(duì)長春新堿(VCR)藥物敏感性，運(yùn)用RT-PCR檢測HCT-8和HCT-8/VCR細(xì)胞中 HSP90βmRNA 表達(dá)水平的變化，分析HSP90β的表達(dá)水平與HCT-8細(xì)胞對(duì)長春新堿耐藥性之間的關(guān)系。 結(jié)果:免疫組織化學(xué)

4、顯示結(jié)腸癌和癌旁正常組織中均有HSP90β的陽性表達(dá)，癌組織中的表達(dá)陽性率為30/72(41.67％)，明顯高于癌旁正常結(jié)腸組織5/30(16.67％)(P<0.05)，HSP90β在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)水平與腫瘤的病理學(xué)分級(jí)之間有正相關(guān)性(P<0.05)，與腫瘤的Duke’s分期之間無明顯關(guān)系(P>0.05)，與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間無明顯關(guān)系(P>0.05)，與腫瘤的浸潤深度之間無明顯相關(guān)(P>0.05)，與腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移之間亦無顯著性

5、相關(guān)(P>0.05)。MTT檢測長春新堿(VCR)對(duì)結(jié)腸癌親本細(xì)胞HCT-8的半數(shù)有效濃度(IC50)為(3.79±0.66)x10<'-2>μg/ml，而長春新堿(VCR)對(duì)其耐藥細(xì)胞HCT-8/VCR．的半數(shù)有效濃度(IC50)為4.41±1.72μg/ml，兩者之間存在差異(P<0.05)，HSP90β mRNA 在 HCT-8/VCR 細(xì)胞中的相對(duì)含量(0.955±0.03)明顯高于在HCT-8 細(xì)胞中的相對(duì)含量(0.835±0