Herceptin聯(lián)合5-氟尿嘧啶和紫杉醇聯(lián)合治療胃癌的體外實驗研究.pdf

1、目的： 1．研究紫杉醇、5-FU不同聯(lián)合方案對Her-2陽性和Her-2陰性胃癌細胞體外增殖的影響，確定最佳用藥順序，比較兩種胃癌細胞對化療的敏感性差異。 2．研究抗Her-2單克隆抗體Herceptin對Her-2陽性和Her-2陰性胃癌細胞體外增殖作用的影響，探討其在胃癌生物治療中潛在應用價值。 3．評價Herceptin聯(lián)合紫杉醇、5-FU對Her-2陽性和Her-2陰性胃癌細胞是否存在協(xié)同抗增殖作用，確定

2、最佳用藥順序，為開辟胃癌分子靶向治療新途徑提供實驗依據(jù)。 4．初步探討Herceptin抗胃癌細胞的機制。 方法： 1．采用MTT比色法觀察不同濃度紫杉醇、5-FU、Herceptin單獨或聯(lián)合應用對MGC803、N87細胞生長的抑制作用，并利用中效法則判定兩藥合用的效果。 2．采用流式細胞術(shù)檢測紫杉醇、5-Fu、Herceptin單獨或聯(lián)合應用對MGC803、N87細胞周期分布和凋亡的影響以及Herce

3、ptin對N87細胞Her-2表達的影響。 3．采用Western-blot方法檢測Herceptin單獨以及聯(lián)合紫杉醇、5-Fu對N87細胞AKT、P-AKT表達的影響。 結(jié)果： 1．在MGC803和N87細胞上觀察到紫杉醇聯(lián)合5-Fu最佳方案是先用紫杉醇24h后用5-Fu48h；MGC803細胞對紫杉醇、5-Fu聯(lián)合的同一用藥方案敏感性明顯強于N87細胞。 2．Herceptin單獨作用，無論對MGC

4、803還是N87胃癌細胞都沒有觀察到明顯殺傷作用。 3．Herceptin聯(lián)合化療藥(紫杉醇、5-FU)對。MGC803細胞沒有療效提高作用，對N87細胞當先用化療藥(紫杉醇、5-Fu)，后用Herceptin時有明顯的療效提高作用。 4．Herceptin作用于N87細胞48h后明顯下調(diào)了S期細胞數(shù)，下調(diào)Her-2蛋白的表達；Herceptin單用或聯(lián)合化療藥(紫杉醇、5-FU)均能不同程度得抑制N87細胞的P-AKT