不同底物對(duì)大皰性皮膚病間接免疫熒光檢測(cè)的評(píng)價(jià).pdf

1、目的 應(yīng)用間接免疫熒光方法,以不同動(dòng)物及人組織為底物檢測(cè)大皰性皮膚病的循環(huán)抗體沉積情況,從中篩選出敏感性強(qiáng)且容易獲取的底物,為天皰瘡、大皰性類(lèi)天皰瘡靶抗原分子水平的研究,如免疫印跡研究,靶抗原的表位研究等提供材料來(lái)源.方法 一、實(shí)驗(yàn)材料:1.病例資料:天皰瘡患者血清10例,大皰性類(lèi)天皰瘡患者血清5例,所有病例均來(lái)自中國(guó)醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院皮膚科,均經(jīng)臨床、病理及免疫病理證實(shí).2.對(duì)照資料:正常人血清3例.來(lái)自本院血庫(kù)健康獻(xiàn)血員.以上血清

2、均以每份20μl分裝后置于-30℃冰箱保存待檢.3.底物資料:實(shí)驗(yàn)所需動(dòng)物(豚鼠、小鼠、大鼠、家兔)均購(gòu)自中國(guó)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,斷頸處死后分別取食道、小腸、膀胱、舌等組織,切成0.8×0.8cm大小,立即OCT包埋,液氮速凍,置于-70℃冰箱中保存?zhèn)溆?正常人皮膚取自本院外科整形手術(shù)切除多余的皮膚,人臍帶取自解放軍第二零二醫(yī)院產(chǎn)房,均用上述方法保存?zhèn)溆?4.試劑:FITC標(biāo)記的羊抗人IgG抗體,稀釋為1:80.二、染色方法:間接免疫