兔眼虹膜色素上皮細胞體外培養(yǎng)實驗研究.pdf

1、該試驗采用細胞培養(yǎng)技術,探討兔眼虹膜色素上皮細胞體外培養(yǎng)和鑒定方法,并對體外培養(yǎng)的IPE細胞生物學特性進行了研究,為今后更進一步研究IPE細胞功能及自體移植提供了充足的細胞來源和重要的實驗基礎.目的建立兔眼虹膜色素上皮細胞(IPE)體外培養(yǎng)、擴增體系;觀察IPE細胞的超微結構,探討其鑒定方法;研究體外培養(yǎng)的IPE細胞生物學特性,為今后進一步研究IPE細胞功能及自體移植打下基礎.材料和方法聯(lián)合兩次酶消化加機械分離的方法分離兔眼IPE細胞,

2、臺盼藍染色法測定細胞活力.采用含不同濃度胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基在體外對IPE細胞進行原代及傳代培養(yǎng)擴增,倒置相差顯微鏡對細胞生長的動態(tài)變化進行觀察、攝像.應用免疫細胞化學技術(廣譜細胞角蛋白AE1/AE3、S-100蛋白單克隆抗體)對所培養(yǎng)的細胞進行鑒定;采用掃描電鏡、透射電鏡觀察IPE細胞的超微結構;通過細胞倍增時間、總分裂次數(shù)、細胞生長曲線等指標的測定研究體外培養(yǎng)兔眼虹膜色素上皮細胞的生物學特性.結論:1.酶-機械分離-酶消化法易