色素上皮衍生因子對(duì)體外培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞生長(zhǎng)周期的影響.pdf

1、目的:探討色素上皮衍生因子(PEDF)對(duì)體外培養(yǎng)的人類視網(wǎng)膜色素上皮(hRPE)細(xì)胞生長(zhǎng)周期的影響及其可能作用機(jī)制，為PEDE臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:采用MTT法檢測(cè)不同濃度的PEDF和不同作用時(shí)間下體外培養(yǎng)的hRPE細(xì)胞的吸光度(A值)，繪制生長(zhǎng)曲線；采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PEDF對(duì)hRPE細(xì)胞生長(zhǎng)周期變化及細(xì)胞周期蛋白Cyclin D1表達(dá)的影響，用免疫組化方法檢測(cè)PEDF對(duì)hRPE細(xì)胞P16表達(dá)的影響。 結(jié)果:

2、 1、在不同濃度PEDF作用下，hRPE細(xì)胞吸光度(A值)隨濃度增加而增加，且與對(duì)照組比較差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，不同濃度組間的差別也均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而50ng/ml PEDF作用下，加藥后第二天開(kāi)始PEDF組A值均高于對(duì)照組，48h的促增殖作用最明顯。 2、PEDF組與對(duì)照組比較，細(xì)胞周期GO/G1、S、G2/M各期所占比例均發(fā)生明顯的波動(dòng)，自12h起，PEDF組GO/G1期逐漸比例減小，S期比例逐漸增大并在48h達(dá)高峰，G

3、2/M期比例無(wú)明顯變化，60h后G2/M期比例上升，S期比例回降。在12h～60h間，G0/G1期細(xì)胞數(shù)明顯低于對(duì)照組，S期細(xì)胞數(shù)明顯高于對(duì)照組，而G2/M期沒(méi)有明顯變化。 3、體外培養(yǎng)的hRPE細(xì)胞基礎(chǔ)性表達(dá)Cyclin D1和P16，PEDF組Cvclin Dl表達(dá)明顯高于對(duì)照組，Pl6表達(dá)較對(duì)照組有升高，但二者差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:PEDF可促進(jìn)體外培養(yǎng)的hRPE細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，呈一定的劑量一效應(yīng)和時(shí)間一效應(yīng)關(guān)