碘化鈉和IL-1β對(duì)人甲狀腺上皮細(xì)胞TRAIL表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過研究不同濃度碘化鈉(NaI)和白介素-1B(IL-1B)對(duì)體外培養(yǎng)的原代人甲狀腺上皮細(xì)胞(TEC)的腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)的表達(dá)及凋亡的影響，將碘、炎癥因子IL-1B、自身免疫和甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞凋亡的幾個(gè)因素結(jié)合起來綜合研究，從而探討自身免疫性甲狀腺疾病(AITD)的發(fā)病機(jī)制，并為AITD的治療提供新的線索。 方法：采集甲狀腺組織標(biāo)本，常規(guī)分離和培養(yǎng)原代人甲狀腺細(xì)胞，細(xì)胞免疫化學(xué)方法檢測(cè)細(xì)胞甲狀腺

2、球蛋白(Tg)表達(dá)進(jìn)行細(xì)胞鑒定。以不同濃度0，1，10，100mg/L的NaI刺激單層培養(yǎng)的人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分正常組、橋本組(HT)、Graves病組(GD)，細(xì)胞免疫化學(xué)方法檢測(cè)TRAIL表達(dá)和分布情況，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)干預(yù)后細(xì)胞TRAIL陽性表達(dá)率及細(xì)胞凋亡率的變化。以不同濃度0，250，500，1000pg/ml的IL-1β刺激單層培養(yǎng)的人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞，并分為正常組、HT組、GD組，噻唑蘭比色法(MIT)檢測(cè)細(xì)胞

3、增殖情況，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞TRAIL陽性表達(dá)率的變化。 結(jié)果：(1)TRAIL免疫染色陽性物質(zhì)呈棕黃色顆粒，位于甲狀腺細(xì)胞的胞漿和胞膜，GD和HT組TEC比正常組TRAIL免疫染色陽性細(xì)胞明顯深染且分布廣。 (2)GD和HT的TEC TRAIL陽性百分率與正常相比顯著增加(P<0.05)。(3)不同濃度NaI干預(yù)下TRAIL陽性百分率增加，正常組在10mg/L NaI干預(yù)下與1mg/L濃度組相比TRAIL陽性率明顯升高

4、(P<0.05)，GD組在10mg/L NaI干預(yù)下與1mg/L濃度組相比TRAIL陽性率有明顯增加(P<0.05)，HT組在100mg/LNaI干預(yù)下與1mg/L濃度組相比TRAIL表達(dá)明顯增加(P<0.01)。(4) HT組和GD組的TEC的凋亡率高于和正常人組(P<0.01)，隨干預(yù)的NaI濃度的升高各組細(xì)胞的凋亡率都有不同程度的增加。(5)相關(guān)性分析顯示TEC的凋亡率與TRAIL陽性百分率顯著相關(guān)，R=0.763，P<0.05。

5、(6)不同濃度的IL-1β對(duì)表達(dá)TRAIL有上調(diào)作用。IL-1B對(duì)正常、GD和HT組TEC從500-1000pg/ml與0pg/ml、250pg/ml相比TRAIL表達(dá)百分率有明顯升高(P<0.05)。從500-1000pg/ml濃度范圍IL-1β對(duì)TEC的增殖和活性有顯著影響，劑量越大，抑制作用越強(qiáng)。 結(jié)論：體外培養(yǎng)AITD患者的TEC的TRAIL表達(dá)增強(qiáng)，且高碘及IL-1B可上調(diào)TRAIL表達(dá)強(qiáng)度，使凋亡增加、增殖抑制，進(jìn)而